Кислые аминокислота
Cтраница 2
Нейтральными называют аминокислоты, боковые цепи которых имеют нейтральный характер; у кислых аминокислот боковые цепи содержат карбоксильные группы; у основных - группы, обладающие основными свойствами. [16]
Нейтральными называют аминокислоты, боковые цепи которых имеют нейтральный характер; у кислых аминокислот боковые цепи содержат карбоксильные группы; у основных - группы, обладающие основными свойствами. [17]
По сравнению с фенолом в крезолах уменьшаются и сближаются между собой значения Rt кислых аминокислот, однако лучше разделяются соединения с высоким значением R. Иногда рекомендуют применять 80 % - ную масляную или изомасляную кислоты, так как они не образуют являющийся помехой цветной фронт. О добавках органических кислот к спиртовым растворителям будет сказано ниже. [18]
Многие авторы [25, 28, 33, 35] исследовали возможность использования ионного обмена для разделения аминокислот на три группы: кислые аминокислоты, извлекающиеся из раствора кислыми смолами; основные аминокислоты, извлекающиеся катионньши обменниками, и нейтральные аминокислоты, которые, как можно ожидать, не будут извлекаться обменными адсорбентами. [19]
Этот факт противоречит сообщению Фрейденберга и его сотрудников [21], согласно которому только нейтральные или кислые аминокислоты могут быть отделены от оснований с помощью водного раствора пиридина. Расхождение опытных данных вызвано, очевидно, применением различных катионитов. [20]
Белки свеклы имеют кислотные свойства ( точка коагуляции при рН 3 5), содержат больше кислых аминокислот - глутаминовую, аспарагиновую и др. Они гидролизу-ют с образованием низкомолекулярных пептидов и аминокислот: аланин; валин, гликокол, лейцин, изолейцин, фенилаланин, - у-аминомасляная, тирозин, серии, треонин, цистин, метионин, пролин, триптофан, аспарагиновая, глу-таминовая, гистидин. [21]
При этом в фильтрат собираются, главным образом, основные аминокислоты с рН 10 - 11, а нейтральные и кислые аминокислоты задерживаются на смоле. Первые промывные воды, доведенные раствором аммиака до рН 5 8, выдерживают при температуре 0 - 5 в течение 3 часов. При этом выпадает в осадок сырой, технический тирозин, а в растворе остаются лейцин, валин и др. Сырой тирозин отфильтровывают и подвергают очистке. Раствор осветляют 3 % по объему активированного угля при 70 в течение 2 часов, уголь отфильтровывают, доводят уксусной кислотой рН до 5 8 и выдерживают раствор при температуре 0 - 5 в течение 3 часов. Тирозин выпадает в осадок в виде белых шелковистых кристаллов. [22]
Для анализа аминокислот по классической методике Штейна и Мура используются колонки со смолой Амберлит IR-120 или Дауэкс 50X8, высота слоя которой составляет 150 см для нейтральных и кислых аминокислот, 15 см для основных аминокислот и 50 см для анализа биологических жидкостей. При этом длина стеклянной трубки колонки должна превышать на 5 см высоту слоя смолы. [23]
При рН, характерном для природных вод, катионит сорбирует большинство аминокислот ( глицин, аланин, аргинин, гистидин и др.), а анионит поглощает избирательно только кислые аминокислоты, такие, как глутамин и аспарагин. Чисто ионообменный процесс в этих условиях не реализуется, и взаимодействие с ионитами протекает по функциональным группам сорбента за счет образования водородных связей. [24]
Его аминокислотный, состав включает два остатка метионина ( что ограничивает использование гидрогенолиза в процессе синтеза), два остатка чувствительного к кислотной обработке триптофана и шесть остатков кислых аминокислот. Глициновый остаток в положении 13 служил обычной точкой сшивки, поскольку он представляет собой нерацемизующийся остаток на С-конце одного пептидного фрагмента. Сшивка в точке 5 была выбрана потому, что наличие в этом месте остатка метионина не дает возможности проводить гидрогенолиз в процессе построения нужной последовательности остатков в центре молекулы. [25]
Следует отметить, что аргинин и лизин двигались в сторону катода ( аргинин двигался с большой скоростью), в то время как гистидин с нейтральными аминокислотами своей группы и кислые аминокислоты двигались в соответствии со своими изоэлектри-ческими точками в сторону анода. Объяснить указанное поведение аргинина и лизина нам пока не представляется возможным. [26]
Элюирование проводят в ступенчатом градиенте. Кислые аминокислоты элюируются кислыми буферными растворами ( рН 2 5 - 3 5), имеющими относительно небольшую ионную силу. В ходе разделения за 3 - 4 приема повышают рН ( до 5 - 8) и ионную силу. Обычно в ходе анализа повышают температуру в несколько ступеней от 35 - 40 до 65 - 80 С. По завершении разделения, которое длится 1 - 2 ч с помощью 0 4, М раствора NaOH проводят регенерацию колонки, после чего уравновешивают ее первым буферным раствором. [27]
Теперь рассмотрим электролиз смеси основных, нейтральных и кислых аминокислот в сосуде, поделенном на три камеры двумя мембранами, расположенными перпендикулярно направлению электрического тока. Кислые аминокислоты концентрируются у анода, нейтральные - в средней части, а основные - в катодной камере. [28]
 |
Зависимость величины Rf чистого вещества ( глицина от количества пробы. [29] |
Впрочем, величина Rf может изменяться в присутствии постороннего вещества незначительно. Так, например, Rf увеличивается для кислых аминокислот в растворителе и-пропанол - вода ( 70 30), если эти кислоты находятся в смеси с другими аминокислотами. Для смесей ДНФ-аминокислот также установлено значительное влияние на величину Rf соотношения количеств, причем, как это известно из бумажной хроматографии [45], в особенности мешает динитрофенол. [30]
Страницы: 1 2 3 4