Клеточная линия

Cтраница 3

Результаты воздействия токов, проходящих через человеческое тело.| Примерные диапазоны плотности тока для различных биологических объектов. [31]

Несколько исследований на живых организмах ( WHO, 1993; NRPB, 1993) выявили метаболические изменения ( например, альтерацию деятельности энзимов и белкового метаболизма и пониженную цитотоксичность лимфоцитов) в различных клеточных линиях, подвергавшихся воздействию ELF и VLF электрических полей и токов, примененных непосредственно на клеточной культуре. Однако стоит отметить, что эндогенная плотность токов, созданных электрической активностью нервов и мышц, обычно составляет 1 мА / м2 и может достигать 10 мА / м2в сердце. Такая плотность тока не оказывает вредного воздействия на нервы, мышцы и другие ткани. [32]

По сравнению с опытами на лабораторных животных этот вид биоиндикации имеет преимущества: 1) дешевизна и доступность используемого материала ( для выращивания культуры клетки достаточно изъять клетки органов у 1 - 2 животных, и полученные клеточные линии могут использоваться в течение длительного периода, в отличие от биомониторинга, в котором гибнут десятки и сотни животных); 2) возможность быстрого получения результатов и прижизненного наблюдения за моделью в течение всего эксперимента; 3) высокая корреляция результатов in vitro и in vivo; 4) полученные клеточные линии сохраняют высокую видовую, органо-тканевую специфичность в течение всего эксперимента, что позволяет проводить на них практически все эксперименты. [33]

Клеточная линия - последовательные поколения клеток, развивающиеся из определенного исходного органа и геноти-пически приспособившиеся к жизни в культуре ткани. Клеточные линии обычно малигнизируются, приобретая свойства злокачественных клеток. [35]

Аналогично анализу клеток бактерий линии клеток млекопитающих ( в развитии от клеток грызунов до клеток человека) подвергаются воздействию анализируемого агента в пластиковых чашках с культурами или пробирках, а затем высеваются в чашки с культурами, содержащими среду с селективным агентом, что позволяет расти только клеткам-мутантам. Другие клеточные линии включают различные мутации ДНК репараций, а также отдельные гены человека, участвующие в метаболизме. [36]

Такие клеточные линии и опухолевые клетки возникают только из клеток на ранней стадии развития, поскольку зрелые дифференцированные нейроны не делятся. В частности, клетка нейробластомы опухоли мыши ( С 1300), открытая в 1940 г. и затем воспроизведенная как перевиваемая опухоль, была клонирована в 1969 г. и с тех пор стала классической модельной системой. [37]

Методы молекулярной биологии также играли важное значение при разработке непрерывных клеточных линий, которые могут быть использованы для анализа токсичности органов-мишеней. Эти клеточные линии образуются путем трансфекции ДНК в первичные клетки. При процедуре трансфекции клетки и ДНК обрабатываются таким образом, что ДНК может захватываться клетками. ДНК можно модифицировать таким образом, что иммортализация генов контролируется при помощи специального стимулятора. Преимущество данного типа сообщества заключается в том, что клетки разделяются только в том случае, когда они получают соответствующий химический стимул для экспрессии гена, вызывающего иммортализацию. Примером такого сообщества является крупный Т - ан-тиген, полученный из Simian Vims 40 ( SV40) ( ген, вызывающий иммортализацию), которому предшествует область стимуляции гена металлотионина, индуцируемого в присутствии металла в культурной среде. Таким образом, после трансфекции гена в клетки клетки могут быть обработаны слабой концентрацией цинка для стимуляции МТ активатора и включения экспрессии Т - антигенового гена. В этих условиях происходит размножение клетки. При удалении цинка из среды клетки прекращают деление и в идеальных условиях возвращаются в состояние, при котором они выражают функции, характерные для конкретных тканей. [38]

Скрининг библиотеки геномной ДНК с применением меченого зонда. Клетки после трансформации высевают на твердую питательную среду, обеспечивающую рост только трансформированных клеток. 1. Переносят клетки из каждой выросшей колонии на твердую подложку ( например, нитроцеллюлозный или найлоно-вый фильр так, чтобы их расположение соответствовало таковому на чашке. 2. Клетки лизируют, высвободившуюся ДНК подвергают денатурации и депротеинизации и фиксируют на фильтре. 3. На фильтр наносят меченый ДНК-зонд и проводят гибридизацию. Смывают с фильтра негибридизовавшийся зонд и проводят радиоавтографию с тем чтобы определить, какие клетки содержат меченый ДНК-зонд. 4. Идентифицируют на чашке колонии, содержащие искомую ДНК ( положительный гибридизационный сигнал, отбирают из них материал и культивируют. [39]

Технически эта процедура имеет много общего с гибридизацией. Все клеточные линии ( клоны) библиотеки высевают на чашки с питательной средой. Выросшие колонии переносят на фильтр, клетки лизируют, а высвободившиеся белки фиксируют на фильтре. Затем на фильтр наносят первые антитела, которые специфически связываются с данным белком ( антигеном), все несвязавшиеся антитела удаляют, а фильтр помещают в раствор вторых антител, специфичных в отношении первых антител. Во многих тест-системах используют конъюгаты вторых антител с ферментом, например с щелочной фосфатазой. [40]

Однако прежде чем эти клеточные линии могут быть использованы в качестве заменителя настоящих клеточных видов, необходимо провести их тщательную характеризацию, чтобы определить, насколько нормальными они являются в действительности. [41]

Например, сконструировали пакующую клеточную линию, содержащую Е1 - область и ряд аденовирусных генов, которые не входят в состав трансдуцирующей ДНК и не попадают в клетки-мишени. [42]

Оксигенированные жирные кислоты. [43]

Ци-тотоксичен по отношению ко многим клеточным линиям солидных опухолей человека. [44]

Клеточные культуры имеют общее свойство с бактериальными культурами, а именно: они представляют собой клетки одного типа. Бактериальная культура в микробиологии ( штамм) соответствует клеточной линии ( клону) клеточной биологии. Сегодня клеточная биология играет все возрастающую роль как определенная, удобная для работы, воспроизводимая модельная система для исследования специфических функций клеток эукариот. Такие системы имеют много достоинств, мы же упомянем только два, которые и обусловили преимущественное использование клеточной культуры, а не целого организма животного или его органа. Во-первых, как и культуры бактерий, некоторые из них способны пролиферировать таким образом, что особые - и редкие типы клеток делаются вполне доступными для биохимического изучения. [45]

Страницы: 1 2 3 4