Лист - хроматографическая бумага
Cтраница 1
Лист хроматографической бумаги ( ватман № 1) размерами 10X15 см равномерно пропитывают 1 % - ным раствором ( NH4) 2MoO4, содержащим 5 мл концентрированной НС1 на каждые 1СО мл. Лист помещают между сухими листами фильтровальной бумаги для удаления избытка ( NH4) 2McO4 и сушат при 20 на стеклянной пластинке. Высушенный лист пропитывают раствором К4Ре ( СМ) 6 и вновь сушат. Из полученной импрегнированной бумаги вырезают полосы шириной 3 - 6 мм и длиной 15 - 17 см, карандашом делают отметки на середине полос и хранят в сухом темном месте. [1]
Лист хроматографической бумаги помещают на стеклянную пластинку и вырезают вдоль волокон полосы ( 28x2 5 см), стараясь не трогать участки полос пальцами. [2]
На лист хроматографической бумаги в различные точки наносят по 0 1 мл каждого свидетеля и обрабатывают аналогично пробам. [3]
На листы хроматографической бумаги соответствующего размера наносят растворы нуклеотидов-свидетелей ( адениловой, гуаниловой. [4]
 |
Поглотительная трубка. [5] |
На листе хроматографической бумаги медленная размерами 180X500 мм на расстоянии 7 см от края проводят линию старта, на которой намечают четыре точки на расстоянии 3 5 см друг от друга. [6]
На листе хроматографической бумаги в 7 см от края проводят линию старта, на которой намечают точки на расстоянии 2 - 2 5 см друг от друга. [7]
На листе хроматографической бумаги шириной 95 мм и длиной 220 мм на расстоянии 18 мм от нижнего края во всю ширину намечается линия старта. От нее вверх вырезают полосы шириной 6 5 мм и высотой 80 мм. [8]
На листе хроматографической бумаги определяют расположение волокон целлюлозы, как описано на с. Затем размечают лист на полоски шириной 2 - 3 см с продольным расположением волокон. На расстоянии 4 - 5 см от края проводят простым карандашом линию старта на всех будущих полосках сразу. На расстоянии 25 - 30 см, в зависимости от размеров камеры, проводят линию конца хроматограмм. Размеченный лист разрезают на полоски, которые хранят в пакетах из кальки или из полиэтилена. [9]
На листе хроматографической бумаги ( 16X40) на расстоянии 7 см от нижнего края намечают линию старта, по которой на расстоянии 3 - 3 5 см друг от друга наносят 0 15 мл поглотительного раствора ( в качестве контроля) и 0 15 мл исследуемого раствора. При нанесении растворов на бумагу ее обдувают теплым воздухом при помощи вентилятора. Хроматографическую бумагу с пробой и контролем помещают в лодочку. По истечении этого времени растворитель опускается на расстояние 25 см. Бумагу извлекают из камеры, высушивают на воздухе ( 0 5 - 1 ч) и орошают раствором дифенилкарбазида. Хроматограмму помещают в термостат и выдерживают в течение 1 - 2 мин при 70 С. [10]
На листе хроматографической бумаги на расстоянии 7 см от края проводят линию старта, на которой намечают 4 точки, расположенные в 3 5 - 4 0 см друг от друга. С помощью пипетки в одну точку наносят 0 1 мл раствора свидетелей, в три другие - по 0 1 мл пробы. При этом диаметр пятен на линии старта не должен превышать 5 - 6 мм. [11]
На листе промытой хроматографической бумаги проводят линию старта на расстоянии 6 5 см от края, на которой фиксируют четыре точки с расстоянием 3 5 см друг от друга. [12]
На листе хроматографической бумаги нужного размера на расстоянии 4 см от нижнего края проводят стартовую линию, на которую наносят исследуемый раствор, содержащий дипептиды. Безбелковый экстракт ткани после упаривания на роторном испарителе чаще всего растворяют в смеси НСООН-СНзСООН-Н2О ( 7: 5: 13) или в 10 % - ном изопропаноле, чтобы 1 мл раствора соответствовал 1 5 - 2 г ткани и наносят на хро-матограмму небольшими порциями ( 0 01 - 0 03 мл), подсушивая бумагу теплым воздухом. На эту же хроматограмму наносят стандартные растворы карнозина и анзерина, содержащие по 0 03 - 0 05 мкмоль в пятне. Бумагу сшивают в виде цилиндра ( следят, чтобы края не соприкасались) и помещают в хроматографическую камеру в строго вертикальном положении. Когда фронт растворителя дойдет до верхнего края бумаги, хроматограмму вынимают и высушивают под тягой в течение 2 - 3 сут. От следов фенола хроматограмму отмывают горячим ацетоном. Для этого сухую хроматограмму сворачивают трубочкой, перевязывают ниткой, помещают в цилиндр, заливают кипящим ацетоном и оставляют на 10 - 15 мин; промывание повторяют 2 - 3 раза. [13]
После подсушивания лист хроматографической бумаги с нанесенными на него кислотами подвешивают в камере, на ее дно наливают растворитель, камеру плотно закрывают и проводят хроматографирование. Для лучшего разделения кислот необходимо удлинить хроматографирование до 48 - 50 часов. Поэтому хроматографирование проводят в два приема. [14]
Затем на лист хроматографической бумаги шириной 12 см наносят 100 мкл исследуемого образца и 20 мкл стандартного раствора п-нитрофенола так же, как это описано для тиофоса. [15]
Страницы: 1 2 3 4