Cтраница 1
Ферментативные методы основаны на использовании реакций, катализируемых ферментами - биологическими катализаторами, отличающимися высокой активностью и избирательностью действия. [1]
Ферментативные методы начинают все шире применять в аналитической химии для решения разнообразных задач определения: от простых ионов типа нитрата или фосфата до макромолекул. [2]
Ферментативные методы могут быть также использованы для получения информации относительно аномерной конфигурации повторяющихся гликозидных связей, природы межцепных связей и последовательности моносахаридных остатков в полисахаридах. Так, ферментативное расщепление гуарана [213] дает маннотри-озу и 6 - 0 - ( а - /) - галактопиранозил) - 1) - маннозу. [3]
Ферментативные методы, энзиматические методы - определения с помощью ферментов ( энзимов) основаны на участии определяемых веществ в ферментативных реакциях в качестве субстратов, активаторов или ингибиторов. Методы отличаются специфичностью, позволяющей избирательно вовлекать в реакцию ( значит и анализировать) определенные вещества в присутствии других веществ, сходных по химическому составу. Для работы необходим соответствующий фермент или микроорганизм, продуцирующий данный фермент. [4]
Ферментативные методы не требуют очистки экстрактов и позволяют обнаружить десятые и даже сотые доли микрограмма пестицида в 1 мл экстракта. [5]
Ферментативные методы гидролиза основаны на избирательности действия протеолитических ( вызывающих распад белков) ферментов, расщепляющих пептидные связи, образованные определенными аминокислотами. В частности, пепсин ускоряет гидролиз связей, образованных остатками фенилаланина, тирозина и глутаминовой кислоты, трипсин - аргинина и лизина, химотрипсин-триптофана, тирозина и фенилаланина. Ряд других ферментов, например папаин, субтилизин, проназа и другие бактериальные протеиназы, также используется для неполного гидролиза белков. В результате полипептидная цепь расщепляется на мелкие пептиды, содержащие иногда всего несколько аминокислот, которые отделяют друг от друга сочетанными электрофоретическими и хроматографическими методами, получая своеобразные пептидные карты. Далее определяют чередование аминокислот в каждом индивидуальном пептиде. Завершается работа воссозданием первичной структуры полной полипептидной цепи на основании определения последовательности аминокислот в отдельных пептидах. [6]
Ферментативные методы расщепления полисахаридов используются в настоящее время достаточно широко и позволили достигнуть значительных успехов, например, в исследовании крахмалоподобных полисахаридов ( см. стр. Как и в случае всех остальных методов установления строения полисахаридов, ферментативный гидролиз оказывается особенно ценным в сочетании с другими приемами изучения полисахаридной структуры. К сожалению, трудность выделения ферментов часто препятствует их широкому применению, а чрезвычайно скудные сведения о детальном механизме ферментативного действия часто не позволяют предвидеть направление расщепления. [7]
Ферментативные методы расщепления рацематов основаны на способности культур микроорганизмов или изолированных ферментов в процессе реакций окисления, восстановления или гидролиза проводить различие между оптическими антиподами стероидов или полупродуктов их синтеза. Как правило, в случае рацемических стероидов микроорганизмы проявляют абсолютную специфичность по отношению к природным энантиомерам. Так, в рацемическом соединении ( 282) гидроксилируется, в соединении ( 283) дегидрируется, а в соединении ( 284) восстанавливается только d - энан-тиомер. [8]
Ферментативными методами определяют ныне тысячи веществ, преимущественно органических, в химической, пищевой, фармацевтической промышленности, в медицине и биохимии. Анализируемое вещество является здесь либо участником реакции, протекающей в присутствии фермента, либо активатором, либо, наоборот, замедлителем ( ингибитором) данной реакции. [9]
Разработаны ферментативные методы, пригодные для анализа образцов биологического происхождения. Для определения окса-латов в плазме крови применен специфический фермент оксалат-декарбоксилаза. [10]
Бурно развиваются ферментативные методы анализа. Материальной основой для них служит большой набор ферментов, с недавнего времени появившихся в продаже в очищенном и стандартизованном виде. Их выделяют из биологических материалов, главным образом из мутантов микробов и грибов. [11]
Разработаны также ферментативные методы ступенчатого расщепления белка. Некоторые ферменты расщепляют макромолекулу белка специфически - только в местах нахождения определенной аминокислоты. Так получают продукты ступенчатого расщепления - пептоны и пептиды, последующим анализом которых устанавливают их аминокислотный состав. [12]
Почти все ферментативные методы определения стерической однородности применимы только к чистым соединениям, так как лишь в этом случае можно быть уверенным в том, что примеси не ингибируют фермент. [13]
Наряду с ферментативными методами в практику белковой химии широко вошли химические методы расщепления по аминокислотным остаткам определенного типа. [14]
![]() |
Определение аминокислотной последовательности пептидов с помощью днпептидиламинопептидазы I ( принцип домино.| Ионизация молекул электронным ударам. [15] |