Cтраница 2
Поступают так же, как с ауксотрофными мутантами. [16]
Успех и здесь был достигнут с помощью ауксотрофных мутантов. Саламон и Дэвис ( Salamon - Davis, 1953) выделили 5-дегидрошикимовую кислоту. [17]
![]() |
Мутагенное действие НГ на Pseudomonas aeruginosa. [18] |
Различные концентрации НГ по-разному влияют на выход ауксотрофных мутантов: оптимальной концентрацией для штамма В-586 является 50 ч / мл, а для штамма А-197-100 ч / мл. [19]
Для микробиологического получения аминокислот используют способность различных культур ауксотрофных мутантов синтезировать определенную аминокислоту, например глутаминовую или лизин. Количество аминокислот, производимых клеткой, в 10 - 100 раз превышает их расход на построение самих клеток. Эти аминокислоты выделяются в окружающую среду. [20]
Ингибирование фермента конечным продуктом реакции часто встречается у ауксотрофных мутантов при получении аминокислот. Для роста синтезирующего лизин мутанта в среде необходимо присутствие треонина, который сам мутант не синтезирует из-за блокировки гена соответствующего фермента. Однако вначале, пока в среде еще есть треонин ( конечный продукт), синтез лизина нарушается, так как треонин действует как ингибитор на первый фермент цепи синтеза лизина - аспартат-киназу. Надо отметить, что этот фермент имеет несколько изомеров, выполняющих одну и ту же функцию, но имеющих разные свойства. [21]
Прототроф - мутант, способный выжить на минимальной среде в противоположность ауксотрофным мутантам, которые нуждаются в добавлении к среде определенных веществ. [22]
Известны два способа микробиологического синтеза ИМФ, один - с использованием метаболического предшественника, нуклеозида, другой - использование ауксотрофного мутанта, поскольку известно, что инозиновая кислота - метаболический предшественник аде-ниловой ( АМФ) и гуаниловой ( ГМФ) кислот. [23]
![]() |
Биосинтез L-аргинина. [24] |
Синтез аргинина не идет, что приводит к снятию ингибировавая по принципу обратной связи со всех ферментов этого пути и накоплению избытка орнитина. Ауксотрофные мутанты находят применение и в тех случаях, когда необходимо синтезировать соединения, являющиеся конечными продуктами разветвленных цепей метаболических реакций. Так, L-аспартат является общим предшественником для L-лизина, L-треонина, Ь - метирнина и L-изолей-цина. [25]
![]() |
Выживаемость клеток Pseudomonas aernginosa после обработки НГ. [26] |
Наибольшее количество мутантов после обработки штамма В-586 возникает при концентрации НГ 50 ч / мп, в то время как у штамма А-197 - при концентрации 100 -у / мл. Ауксотрофные мутанты, возникшие при более низких концентрациях НГ ( 10, 20 ч / мл), ревертируют при последующих пересевах. [27]
Используют мутанты микроорганизмов, которые утратили некоторые ферменты синтеза одних аминокислот, но приобрели способность интенсивно синтезировать другие. Ауксотрофные мутанты отбирают на селективных средах после воздействия на бактериальные клетки ультрафиолетовым или рентгеновским излучением или же за счет химического мутагенеза. [28]
При посеве культур уколом в мягкий МПА мутанты отличаются между собой характером пигментирования. Ауксотрофные мутанты штамма А-197 преимущественно беспигментные ( 13) или с желто-зеленым ( 24), зеленым ( 11) и слабо желтым ( 6) пигментированием. Ауксотрофные мутанты штамма В-586 все пиг-ментообразующие: с желто-зеленым ( 9), зеленым ( 2), желтым ( 7) и, в отличие от штамма А-197, с серо-синим ( 4) и темно-синим ( 2) пигментированием. [29]
Белки синтезируются на рибосомах из отдельных аминокислот, образуемых самими микроорганизмами. Исключение составляют некоторые ауксотрофные мутанты, для которых необходимо присутствие в среде определенных аминокислот. Биосинтез аминокислот в клетке идет ферментативно из неорганического азота и различных соединений углерода, например продуктов аэробного или анаэробного разложения углеводов. [30]