Трансгенная мышь

Cтраница 1

Трансгенные мыши с таким набором генов антител человека синтезировали человеческие антитела к некоторым антигенам; кроме того, были созданы гибридомы, продуцирующие человеческие моноклональные антитела. Однако разнообразие человеческих антител, продуцируемых такими трансгенными мышами, было невелико вследствие ограниченности набора вариабельных сегментов Н - и к-цепей. Чтобы решить эту проблему, создали YAC с большим числом генов вариабельных участков Н - и к-цепей гемоглобина человека. [1]

Схематичное изображение генов к - и Н - цепей иммуноглобулинов человека. А. Строение гена к-цепи иммуноглобулина в клетках зародышевой линии. Штриховая линия - промежуточные домены, здесь не показанные. Ген функциональной к-цепи, например Ук8 - 1к4 - Ск, образуется в В-клетках в результате нескольких перестроек соответствующих ДНК-доменов. Представленная здесь комбинация - лишь одна из 500 возможных. Б. Строение гена Н - цепи иммуноглобулина в клетках зародышевой линии. Штриховая линия - промежуточные домены, здесь не показанные. Ген функциональной Н - цепи, например VH33 - DH26 - JH4 - Coc, образуется в В-клетках в результате ряда перестроек соответствующих доменов. Представленная здесь комбинация - лишь одна из 140 000 возможных. На рисунке показан только один Су-домен, хотя на самом деле их четыре ( Cyl, Су2а, Су2Ь и СуЗ. [2]

Трансгенные мыши могут служить модельными системами для изучения болезней человека и тест-системами для исследования возможности синтеза продуктов, представляющих интерес для медицины. [3]

Трансгенных мышей получали микроинъекцией в пронуклеус оплодотворенной яйцеклетки или трансфекцией ES-клеток с помощью YAC, несущих несколько родственных генов или один большой ген. [4]

Генетическая конструкция, называемая мини-геном PDAPP, с помощью которой можно моделировать развитие болезни Альцгеймера у трансгенных мышей. 1 - 10 - экзоны кДНК белка-предшественника амилоида, А-С - введенные интроны. Регуляторными элементами являются промотор гена р-фактора роста из тромбоцитов и сигнал полиаденилирования вируса SV40. [5]

Трансгенных мышей использовали также в качестве модельных систем для изучения экспрессии генов, кодирующих трансгенные продукты, которые секретируются в молоко. Так, для изучения функций белка, нарушения в котором приводят к муковисцидозу ( CFTR), и для разработки подходов к лечению муковисци-доза ( CF) необходимы большие количества аутентичного CFTR-белка. [6]

Для создания трансгенных мышей, способных синтезировать множество различных человеческих антител, необходимо инактивиро-вать мышиные гены Н - и L-цепей, а затем встроить в хромосомную ДНК мыши YAC, содержащую гены Н - и L-цепей каждого человеческого гена иммуноглобулина. [7]

Как получают трансгенных мышей. [8]

Схематическое изображение нейрона коры головного мозга человека с указанием некоторых гистологических особенностей, характерных для болезни Альцгеймера. У синапсов образуются сениль-ные бляшки, содержащие амилоидные скопления и обломки клеток, В теле нейрона накапливаются ней-рофибриллы, включающие агрегаты из белков цито-скелета и других белков. Происходят и другие изменения, здесь не показанные. [9]

Было получено множество трансгенных мышей, несущих полноразмерный ген АРР или его часть под контролем нейроспецифичного промотора. [10]

Генетическая конструкция кДНК CFTG - ген р-казеина козы. Полноразмерная кДНК CFTR встроена между экзонами 2 ( ЕХ2 и 7 ( ЕХ7 гена Р - казеина козы. Сохранены промотор, терминатор и экзо-ны 1, 8 и 9 ( ЕХ1, ЕХ8 и ЕХ9 гена казеина. [11]

Были получены линии трансгенных мышей, несущих кДНК CFTR под контролем регулятор-ных последовательностей гена Р - казеина. Как и ожидалось, в молоке трансгенных самок содержался CFTR-белок, связанный с мембранами глобул жира. [12]

Получение линии трансгенных мышей с использованием ретровирусных векторов. Эмбрион, обычно находящийся на стадии 8 клеток, инфицируют ре-комбинантным ретровирусом, несущим трансген. Самки, которым был имплантирован эмбрион ( суррогатные матери, производят на свет трансгенное потомство. Для идентификации мышат, несущих трансген в клетках зародышевой линии, проводят ряд скрещиваний.| Получение линий трансгенных мышей методом микроинъекций. Яйцеклетки выделяют из самок-доноров, у которых была индуцирована гиперовуляция и проведено спаривание с самцами. Трансгенную конструкцию инъецируют в мужской пронуклеус оплодотворенной яйцеклетки. Яйцеклетки имплантируют в суррогатную мать, которая производит на свет трансгенных мышат - основателей трансгенных линий. [13]

В настоящее время для создания трансгенных мышей чаще всего используют метод микроинъекций ДНК. [14]

Недавно появилось сообщение о том, что уже получена трансгенная мышь, экспрессирующая нативные формы Н - и L-цепей иммуноглобулинов человека. [15]

Страницы: 1 2 3