Трансгенная мышь
Cтраница 3
В 1980 г. Верховный суд США вынес определение, что изобретение, которое включает что-либо, созданное под солнцем руками человека, является охраноспособным. В 1988 г. было запатентовано первое животное, полученное с помощью методов генной инженерии, - трансгенная мышь. Изобретение заключалось в клонировании химерного гена LTR MMTV-туе в плазмиде, введении линеаризованной плазмид-ной ДНК в мужской пронуклеус оплодотворенных одноклеточных мышиных яйцеклеток, идентификации потомков, экспрессирую-щих ген туе, и получении линий трансгенных мышей. У животных одних линий ген туе экспрессиро-вался в различных тканях, у животных других экспрессия ограничивалась одной или несколькими тканями. [31]
Прогресс в области технологий ДНК, проект по изучению генома человека и более глубокое понимание роли мутаций в возникновении рака способствуют разработке новых ге-нотоксических анализов, которые, вероятно, будут включены в стандартные процедуры скрининга. Среди них следует упомянуть использование трансгенных клеток и грызунов. Трансгенные системы - это системы, в которых гены одного вида вводятся в клетку организма. Например, трансгенные мыши используются в опытах по определению мутации в любом органе или ткани животного на основе введения бактериального гена в организм мыши. Сегодня можно проводить анализ фактических мутаций, индуцируемых в трансгенах трансгенетических грызунов либо в натив-ных генах, таких как prt, либо в генах-мишенях внутри Salmonella, что позволяет выяснить природу мутаций, вызываемых химическими веществами. [32]
Один из первых успешных экспериментов по созданию трансгенных животных был осуществлен на мышах. В геном мыши был встроен ген, кодирующий гормон роста крысы, соединенный с сильным промотором, который стимулировался, если в рационе мышей присутствовали тяжелые металлы. В результате такие трансгенные мыши росли в 2 - 3 раза быстрее, чем их сородичи, не несущие чужого гена и достигали примерно в 2 раза больших размеров. [34]
Уже создано несколько видов трансгенных растений, обладающих признаками, которые детерминируются генами, введенными в них генноинженерными методами. К числу таких признаков относятся: способность синтезировать инсектициды; устойчивость к вирусным инфекциям и гербицидам; измененные сроки созревания плодов; измененная окраска цветков; повышенная пищевая ценность семян и самонесовместимость. Исследования трансгеноза у животных только начинаются, так что пока трудно предсказать, какие генетические признаки будут наследоваться видом-реципиентом. К настоящему времени выведены линии трансгенных мышей, которые используются как модельные системы для изучения механизма возникновения рака, муковисцидоза, болезни Альцгеймера и других заболеваний человека. [35]
Трансген с мутацией АРР-717 был создан на основе кДНК АРР встраиванием между экзона-ми 6и7 7и8 8и9 модифицированных интро-нов. Интроны вводились потому, что, согласно данным эксперимента, содержащие их трансгены транскрибируются более эффективно, чем трансгены без интронов. Вся она была названа мини-геном PDAPP. Интересно, что ни у стареющих мышей, несущих PDAPP-мини-ген, ни у трансгенных мышей АРР-670 / 671 нейрофибрилляр-ные клубочки не обнаруживались. [36]
Были получены линии трансгенных мышей, несущих кДНК CFTR под контролем регулятор-ных последовательностей гена Р - казеина. Как и ожидалось, в молоке трансгенных самок содержался CFTR-белок, связанный с мембранами глобул жира. CFTR был гликолизирован и легко экстрагировался из жировой фракции молока. Остается только выяснить, является ли он аутентичным белком. В клетках молочных желез трансгенных мышей в период лактации синтезируется множество белков, представляющих интерес для медицины. Но чтобы иметь возможность получать CFTR, другие трансмембранные белки и различные белки человека в больших количествах, соответствующие трансгенные конструкции необходимо встраивать в геном более крупных млекопитающих - коровы, овцы или козы. [37]
Страницы: 1 2 3