Надосадочная жидкость
Cтраница 2
Из надосадочной жидкости получают рабочую фракцию бентонита центрифугированием при 8500 g в течение 30 минут. Полученный осадок промывают 1 раз 0 1 М ЭДТА рН 7 0 и три раза бидистиллятом. [16]
И надосадочной жидкости содержатся ну кл сот иды, которые освободились при гидролитическом расщеплении РНК - Надосадочную жидкость сливают, соединяют ее с промывными водами, полученными в псршш этапе. [17]
Приготовление надосадочной жидкости суспензии: содержание флакона ( 5 мл) тщательно перемешивают, вносят в центрифужную пробирку и центрифугируют в течение 10 мин со скоростью 4000 - 6000 об / мин. [18]
 |
Колонка с ДЭАЭ ( диэтиламиноэтил целлюлозой для очистки аргиназы. [19] |
Сливают надосадочную жидкость, определяют в ней общую и удельную активность аргиназы ( см. работу 24) и используют для дальнейшей очистки. [20]
После декантации надосадочная жидкость сохраняет 100 % ферментативной активности. [21]
Затем из надосадочной жидкости центрифугированием осаждают рибосомы. [22]
В такой надосадочной жидкости присутствуют эндогенные свободные аминокислоты, поэтому аминокислоты, добавляемые извне, обычно мало влияют на наблюдаемый интенсивный обмен между пирофосфатом и АТФ. В результате очистки активирующих ферментов тем или иным способом эндогенные аминокислоты удаляются и тогда становится возможным продемонстрировать зависящий от аминокислот обмен между пирофосфатом и АТФ. [23]
Для протягивания надосадочной жидкости через фильтрующий тигель применяют частичный вакуум; при этом время фильтрования сокращается. [24]
После центрифугирования надосадочную жидкость сливают, а осадок нуклеопротеида промывают уксусной кислотой. Для этого в пробирку наливают 3 % - ную уксусную кислоту до метки 5 мл; осадок размешивают стеклянной палочкой и, уравновесив пробирки, отделяют центрифугированием. Повторяют промывку описанным способом еще 2 - 3 раза. [25]
NaOH, надосадочную жидкость декантируют, а осадок заливают раствором Г или Д при работе в двухбуферной и раствором Е при работе в трехбуферной системе. После 30 мин уравновешивания жидкость декантируют, а смолу вновь суспендируют в данном растворе. После очередной декантации смолу смешивают с двумя объемами раствора и вливают в колонку, как описано выше. Важно заполнять колонку в растворе высокой молярности. После того как столбик смолы в колонке достигает 50 см, для окончательной упаковки через колонку в течение 20 мин пропускают раствор высокой молярности. Затем повторяют пропускание растворов, начиная со стартового, и этот цикл обработки проделывают еще 3 раза. Следует иметь в виду, что из-за различий в молярности продолжительность каждого цикла занимает по крайней мере 20 мин. [26]
Еще не остывшую надосадочную жидкость декантируют. Если 3fa жидкость имеет интенсивную окраску, то обработку щелочью повторяют до получения бесцветного раствора. Слабая желтая окраска вполне допустима. Далее смолу декантируют в 10-кратном объеме дистиллированной воды до нейтральной реакции. Таким путем удаляют из смолы ионы металлов, примеси органических веществ и денатурированные белки, сорбированные ионитом. [27]
Это типично для надосадочных жидкостей, поступающих из метантенка или после обезвоживания ила. Компьютерное моделирование позволяет найти оптимальные решения для управления подобными рециркулирую-щими потоками. [29]
К 1 мл надосадочной жидкости прибавляют 3 мл энзимо-хромогенного реактива, перемешивают и точно через 20 мин измеряют оптическую плотность раствора в кювете с толщиной слоя 10 мм при длине волны 625 нм против контрольной пробы, где вместо надосадочной жидкости взята вода. Время с момента прибавления энзимо-хромогенного реактива до измерения оптической плотности должно быть одинаковым для всех проб. [30]
Страницы: 1 2 3 4