Нуклеаз

Cтраница 3

Межнуклеотидные связи в ДНК и РНК можно химически расщепить с помощью гидролиза. Их можно гидролизовать и ферментами, которые называются ну-клеазами. Некоторые нуклеазы способны расщеплять связи между двумя соседними нуклеотидами, расположенными внутри цепи ДНК или РНК; такие нуклеазы называют эндонуклеазами. Нуклеазы другого класса могут катализировать гидролиз только связи концевого нуклеоти-да-или у 5 - или у 3 -конца молекулы; эти ферменты относятся к экзонуклеазам. Дезоксирибонуклеазы, специфически расщепляющие определенные межнуклео-тидные связи в ДНК, и рибонуклеазы - ферменты, специфичные к РНК, найдены во всех живых клетках. Они секретируют-ся, в частности, поджелудочной железой в кишечный тракт, где принимают участие в гидролизе нуклеиновых кислот в процессе пищеварения. Ниже мы увидим, что различные типы эндонуклеаз представляют собой важный биохимический инструмент для контролируемого расщепления ДНК и РНК на меньшие фрагменты при определении их нуклео-тидной последовательности. [31]

Возможно, функция марганца состоит в регуляции активности ферментов. Например, известно, что глутаминсинтетаза ( гл. Многие нуклеазы и ДНК-полимеразы при замещении Mg2 на Мп2 изменяют свою специфичность. Каково значение этих различий in vivo, сказать пока трудно, но о них следует помнить. [32]

Реакция мето-п-толуолсульфоната 1-цикле - гексил-3 - [ 2 - ( морфолинил-4 - этил ] - карбодиимида с уриди. [33]

Схема реакции с урацилом приведена на рис. 11.8. Затем замещенную нуклеиновую кислоту гидролизуют панкреатической РНК-азой. Так как модифицированные остатки ури - диловой кислоты устойчивы к ферментативному гидролизу, то расщепляются только фосфодиэфирные связи, смежные с остатками цитидиловой кислоты. После завершения гидролиза нуклеазу удаляют бентонитом или восстанавлением мер-каптоэтанолом и гидролизом протеолитическим ферментом проназой. [34]

Метод предполагает получение высокополимерных ДНК и РНК, свободных от белков. Под действием водонасыщенного фенола на ну-клеопротеиды осуществляется их депротеинизация, причем при различных значениях рН для дезокси - и рибонуклеопротеидов. Обработка фенолом инактивирует нуклеазы, что позволяет получать нуклеиновые кислоты в нативном состоянии. [35]

Наиболее перспективными и наиболее широко распространенными ферментами медицинского назначения на мировом фармацевтическом рынке в настоящее время являются протеолитические ферменты. Помимо протеаз, основную массу выпускаемых за рубежом ферментных препаратов составляют амилазы, липазы, целлюлазы и лекарственные формы на их основе, главным образом используемые для противовоспалительной и заместительной терапии. В меньших объемах выпускаются нуклеазы, L - аспарагиназа, коллагеназа, эластаза, бета-галактозидаза. Широко практикуется выпуск комплексных препаратов, включающих несколько ферментов с другими лекарственными средствами. [36]

Формирование единого кода протекает на фоне избытка субстратов, синтезированных в предбиол. После их исчерпания накапливаются остатки отмерших организмов. Для их утилизации необходимы белки, расщепляющие полинуклеотиды ( нуклеазы) и полипептиды ( протеазы), структура к-рых сходна - глобулы с ложбиной. Такие белки могут быть получены из первичного белка - репликазы. Набор последних различен в нуклеазах и протеазах, что и определяет их специфичность. Слова разрезать и поместить означают, что в запасной копии гена, кодирующего репликазу, заменяются неск. [37]

Структура ковалентного остова ДНК и РНК, в которой следующие друг за другом нукдеотидные единицы ( в ДНК эти нуклеотид-ные единицы закрашены соединяются между собой фосфодиэфирными мостиками. Обратите внимание на то, что остов, состоящий из чередующихся остатков пентозы и фосфатных групп, представляет собой сильно полярную часть молекулы, тогда как основания-это неполярные, гидрофобные компоненты молекулы. [38]

Гидролиз РНК TMV при помощи фосфоциэсгеразы змеиного яца ( Singer, Fraenkel-Conrat, 1963) подтвердил более ранние данные относительно 5 -концевого положения аценозина в этой РНК ( Sugiyama, Fraenkel-Conrat, 1961; Whitfeld, 1962), но не позволил надежно идентифицировать четыре-пять оснований, примыкающих к этому концу. Несмотря на то что денатурированная ДНК чувствительна к нуклеазному действию таких ферментов, как SPDE, VPDE, ДНК-аза I E, coli и нуклеазы В, subtilis и L. ДНК препятствует трудность получения молекулярно-гомогенных препаратов поли - и оли-гоцезоксирибонуклеогицов. Однако в принципе соображения, изложенные в этом разделе относительно РНК, можно отнести также и к ДНК. [40]

Аспарагиназу уже в течение многих лет применяют для лечения некоторых форм лейкоза. Механизм фармакологического действия основан на том, что лейкозные клетки не вырабатывают аминокислоту аспарагин, а получают ее из плазмы крови. Экзогенная L-аспарагиназа разрушает аспарагин в крови, и в условиях дефицита этой аминокислоты синтез белка в лейкозных клетках прекращается, что приводит к их гибели. В комплексной терапии рака используют различные нуклеазы, разрушающие нуклеиновые кислоты раковых клеток, однако до настоящего времени не решен вопрос адресной доставки ферментного препарата в опухолевые клетки. Как уже отмечалось, применение ферментов как лекарственных препаратов ограничено их иммуногенностью, аллергенностью и крайне малым временем нахождения в организме человека и животных. В этом отношении гораздо перспективнее применение иммобилизованных ферментов, которые более стабильны, обладают пролонгированным действием, меньшей иммуногенностью. Наиболее распространенным методом получения растворимых иммобилизованных ферментов является их ассоциация с гидрофильными полимерами, например с декстраном. Еще одним перспективным подходом применения ферментов в медицине является их микрокапсулирование, а также включение в липосомы. В этом случае ферменты защищены от действия эндогенных протеиназ, а сами липосомы, состоящие из фосфолипидных пузырьков, легко утилизируются в организме. [43]

Схема предполагаемого участия нуклеазы Rec BCD ( экзонуклеазы V в инициации гомологичной рекомбинации. [44]

Рекомбинация не заканчивается образованием полухиазмы. Эта структура должна быть еще соответствующим образом разрезана. Как это осуществляется у бактерий, до сих пор не вполне ясно. Возможно, за это ответственны те же нуклеазы рекомбинации, которые принимают участие в инициации обмена, например нуклеаза RecBCD. Возможно, существуют специализированные ферменты, специфически разрезающие структуру Холидея. [45]

Страницы: 1 2 3 4