Объем - элюирование
Cтраница 4
Вторая задача, которую нужно решить при количественной оценке результатов ЭХ нефтепродуктов, - это построение калибровочной кривой, связывающей объем элюирования с размером ( массой) молекул. Дня установления соотношения между этими показателями используют в основном три пути: определение объема элюирования эталонных соединений с известной молекулярной массой; определение объема элюирования и молекулярной массы узких фракций, препаративно выделенных методами ЭХ, ЖАХ или другими методами; сравнение молекулярно-массового распределения, полученного эксклюзионной хроматографией и другим методом, например ультрацентрифугированием. В качестве калибровочных параметров размеров молекул используют обычно длину молекул, молекулярный объем, молекулярную массу или гидродинамический объем молекул. [46]
Отклонения от линейности, наблюдаемые для циклических олигомеров найлона-6 6, объясняются их взаимодействием с растворителем. Если при расчете молекулярных масс отдельных олигомеров учесть вклад динйтрофенильных групп, то и в этом случае соблюдается линейная зависимость логарифма молекулярной массы от объема элюирования. [47]
Ниже приведены некоторые характерные результаты изучения поведения этих соединений при эксклюзионном разделении. Оэлерт [85, 86], изучая поведение трех групп соединений ( парафиновые моноароматические, катаконденсированные и периконденсированные полиароматические углеводороды), получил разные зависимости мольного объема Кмол от объема элюирования Ve. РМОЛ уменьшается с ростом Ve, хотя для катасоединений кривая имеет более крутой наклон. Периконденсированные углеводороды показывают обратную зависимость: Умол ( или М) увеличивается с Ve, Это указывает на преобладание адсорбции или распределения над эксклюзионным эффектом. Подобные же соотношения найдены для азот - и кислородсодержащих соединений. Введение алкильных заместителей уменьшает этот эффект и вызывает элюирование при более низком значении Ve, чем исходные неалкилированные соединения. Это связано, вероятно, с более высокой растворимостью алкилза-мещенных соединений и с экранирующим эффектом апкильной группы. Оба эти обстоятельства способствуют уменьшению адсорбции. [48]
Если ФР элементов недостаточно высок, чтобы использовать двухстадийный процесс, то возможности ламинарных методов для выбора условий колоночного метода разделения очень ограниченны. В этом случае оптимальные условия разделения должны отвечать следующим основным требованиям: максимальное значение ФР двух элементов, максимальная разрешающая способность колонки и удобные с практической точки зрения объемы элюирования, гарантирующие отсутствие взаимного загрязнения элементов. [49]
В соответствии с уравнением (5.5) он должен, по-видимому, быть пропорционален [77] M. Бено и сотрудники, а позднее и другие исследователи показали, что ( рис. 5.13) многие типы полимеров имеют один общий график зависимости logWb / ]) от объема элюирования. При использовании этого метода калибровки должны быть известны коэффициенты уравнения Марка - Хувинка. [50]
В тетраборатном растворе существует равновесие между бо-ратными анионами с различными зарядами. Увеличение температуры вызывает сдвиг равновесия в 0 1 М растворе в сторону образования анионов с одним отрицательным зарядом, которые являются более слабыми элюентами, чем ионы с более высоким зарядом. Поэтому объемы элюирования альдоновых кислот и муравьиной кислоты увеличиваются с увеличением температуры в противоположность тому, что происходит в метаборатных растворах. [51]
 |
Вид хроматограмм битума 40 / 50 в зависимости от природы растворителя. [52] |
Хейли [61] изучил влияние природы растворителя на молекулярную массу фракций, полученных при разделении окисленного битума и асфаль-тенов. В ряду толуол, хлороформ, метилен, хлорид, диоксан хлороформ одному и тому же объему элюирования соответствовали все меньшие значениям. Лишь в области малых масс ( около 1000) кривые сближаются. [53]
Выпускаемые промышленностью гели обычно классифицируют по их верхнему пределу проницаемости в ангстремах. Мейерхоффом / 22 /, показывают соотношения между объемом элюирования и молекулярным весом для одиночных и сборных колонок, заполненных полистирол-дивинилбензольными гелями различной пористости. Как следует из приведенных рисунков, четыре объединенные колонки дают приблизительно линейную зависимость логарифма молекулярного веса от объема элюирования в широком интервале молекулярных весов. [54]
 |
Представление ( с помощью треугольников изменения формы полосы с увеличением нагрузки. [55] |
Весь элюент из колонки был собран в фракции по 10 мл. Аликвоты из каждой фракции были проанализированы на содержание парабенов с использованием обращенно-фазной аналитической жидкостной хроматографии с УФ-детектированием. На рис. 1.20 построен график УФ-поглощения отдельных компонентов каждой фракции, показывающий индивидуальные, перекрывающиеся концентрационные профили в зависимости от объема элюирования. Штриховые кривые отражают общий процент каждого компонента, элюированного из колонки. [56]
В данной главе детально описывается определение констант диссоциации комплексов нуклеазы с ее ингибиторами по данным элюирования, а также использование этих же данных для определения констант диссоциации комплексов химотрипсина с синтетическими низкомолекулярными и с природными высокомолекулярными ингибиторами ( разд. Далее рассматривается определение констант диссоциации комплексов трипсина с низкомолекулярными ингибиторами по данным фронтального анализа ( разд. В заключение главы описывается прямое титрование белка S-рибонуклеазы S-пептидом, определение силы связывания дегидрогеназ и нукдеотидов, основанное на данных о концентрации хлорида калия, необходимой для элюирования, и взаимодействия связанных нуклеотидов и пептидов по отношению объемов элюирования последних. [57]
Страницы: 1 2 3 4