Биогель

Cтраница 2

Такие гели, которые продаются под названием биогели, можно с успехом использовать в области рН 2 - 11; инертная матрица полиакрил амида позволяет свести адсорбцию полярных веществ к минимуму. [16]

Наиболее распространены гелевые фильтры на основе декст-рана: биогель, сефадекс, молселект. Они представляют собой гидрофильные гранулы полисахаридов с пространственно сетчатой структурой, нерастворимые в воде, но обладающие способностью набухать в воде. [17]

Имеющиеся в продаже гели ( сефадекс G, биогель Р) содержат небольшие количества свободных карбоксильных групп. Диссоциацию этих групп и обусловленный ими ионный обмен можно подавить, проводя хроматографирование элюентом с добавкой электролита, повышающего его ионную силу ц до 0 02 и выше. [18]

NaOH для тех матриц, которые, как сефадексы или биогели Р, не боятся такой обработки. Об удалении загрязнения верхнего слоя колонки было сказано выше. При тщательном уходе колонки для гель-фильтрации могут служить в течение нескольких месяцев, даже года. Разумеется, в промежутках между опытами колонку следует уравновесить буфером с растворенным в нем консервантом, например 0 02 % - ным раствором азида натрия. [19]

Хроматографические свойства различных видов биогеля характеризуют их водоемкостью WK; биогели ведут себя так же, как сефадексы, и величины Wк У них близки. [20]

Типы наполнителей ионообменных колонок. [21]

К категории мягких наполнителей относятся сефа-декс - гель декстрана, биогель - полиакриламид, полистирол и крахмал. [22]

Гель-хроматография амидов на полиакриламидах. [23]

Колонка: 97X0 5 см; гели: 1 - биогель Р-2, 100 - 200 меш ( полиакриламид), предел проницаемости 200 - 260 А, 2-биогель Р-6, 100 - 200 меш, предел проницаемости 1000 - 5000 А. [24]

Основания и нуклеозиды имеют высокое сродство к сефа-дексу [43] и биогелю [56]; лишь нуклеотиды элюируют-ся с G-10 и Р-2 раньше, чем соль. Они совершенно не проникают в фазу геля и появляются в элюате значительно раньше, чем можно было бы ожидать на основании их молекулярного веса. [25]

Хроматографию проводят на термостатированной колонке ( 2 5X ХЮО см) с биогелем А-15 ( 100 - 200 меш) ( Bio-Rad. В качестве образца наносят 0 4 - 0 8 мл рибосомального препарата с поглощением примерно 3 00 при 260 нм. Анализ элюата ведут, измеряя оптическую плотность при 260 нм. [26]

Следует отметить, что высокая обратимость сорбции ионов органических веществ ионообменными сефадексами и биогелями определяется не структурной устойчивостью ( она отсутствует), а малой энергией взаимодействия - отсутствием дополнительного, помимо электровалентного, взаимодействия. Очень важно, что структурно ( осмотически) устойчивые иониты получаются при большом содержании кроссагента, что приводит к удовлетворительным условиям их эксплуатации в колонках благодаря малой деформируемости при необходимом, ограниченном давлении в условиях прохождения раствора через колонку. [27]

Как видно из приведенных данных, диапазоны пористости и соответственно области фракционирования для этих биогелей примерно такие же, как у сефадексов. Биогелн серии Р поставляются в сухом виде, поэтому выше указаны также объемы упакованной набухшей матрицы. Матрицы этого типа имеют некоторые преимущества перед сефадексами. [28]

Рейдола [423, 424] использовал для электрофокусировки гранулированные гели, например сефадекс G-75 сверхтонкий или G-200 сверхтонкий фирмы Pharmacia и биогель Р-60 ( - 400 меш) фирмы Bio-Rad Laboratories. [29]

В таком же количестве раствора размешивают 8 г сефадекса G-75, 4 г сефадекса G-100, 4 г биогеля Р60 и 3 5 г биогеля РЗОО. Чтобы гель набух, его выдерживают 2 - 3 сут при 4 С, после чего непродолжительное время вакуумируют, используя водоструйный насос. С помощью устройства для нанесения сорбента фирмы Desaga ( системы Шталя) наносят слои толщиной 0 5 мм; если жидкой фазы было взято больше, как в данном случае, то поверхность слоя остается гладкой. Слои сушат на воздухе 5 - 15 мин и помещают в камеру с увлажненной атмосферой, где их можно хранить до 2 недель. Непосредственно перед употреблением пластинки обрабатывают соответствующим буферным раствором, лучше всего в течение ночи. [30]

Страницы: 1 2 3 4