Cтраница 2
Рассчитывают число SH-групп в пересчете на моль восстановленного глутатиона. [16]
Полоса поглощения SH-группы имеет относительно малую интенсивность. Однако с повышением полярности меркаптанов интенсивность поглощения SH-группы увеличивается. [17]
Для окисления SH-групп чаще всего применяют такие реагенты, как порфириндин, - тетратионат натрия и йодозобензойная кислота. [18]
При титровании SH-групп к раствору добавляют ионы серебра или двувалентной ртути, которые образуют с исследуемым веществом растворимые меркаптиды. При соблюдении строго определенных условий через ячейку протекает только небольшой остаточный ток, пока не окажутся блокированными все SH-группы; тогда конечная точка титрования проявляется в возникновении диффузионного тока, обусловленного избытком титрующего реактива. На график наносят значения силы тока как функцию добавленного объема реактива; точка пересечения экстраполированных ветвей кривой представляет конечную точку титрования. При титровании простых веществ кривая имеет острый перегиб. В тех же случаях, когда титруемые вещества являются более сложными молекулами, например белки, удаление из растворов ионов тяжелого металла происходит медленно и кривая к концу титрования постепенно переходит в прямую линию. [19]
Для определения SH-групп используют и другие реактивы. Аллисон и Сесил [17], используя капельный ртутный индикаторный электрод, детально изучили титрование гидроокисью меркурифенила. Они считают, что этот реактив более специфичен для определения SH-групп, чем комплекс Ag-трис. Это заключение основано на частном примере денатурированного гемоглобина, который в присутствии избытка комплекса серебра связывает не 6 атомов Ag на молекулу белка, как это следует из теоретического расчета, а больше; при титровании гидроокисью меркурифенила получается не больше 6 SH-групп на молекулу. [20]
Наличие двух рядом расположенных SH-групп приводит при ее взаимодействии с тиоловыми ядами к образованию такого же нетоксичного комплекса, какой формировался при использовании унитиола и других подобных антидотов. Так, если ДМЯ вводилась не позднее чем через 2 ч после отравления абсолютно смертельными дозами мышьяковых ядов, то выживало от 80 до 100 % подопытных животных. Если ее вводили в организм на 15 мин до отравления, то выживало 100 % животных. ДМЯ имеет большую терапевтическую широту и лишена какого-либо нежелательного побочного действия. При се применении отмечена бблыная скорость выведения мышьяка из организма отравленных животных, чем под влиянием унитиола. Как положительное свойство ДМЯ следует отметить, что она включает активный метаболит - янтарную кислоту, активирующую ряд ферментных процессов при интоксикации тиоловыми ядами. Все это по-еволило рекомендовать ДМЯ в качестве антидота, кото - Зрый в лечебной практике получил новое название - сукцимер. [21]
Перед трифторацетилированием SH-группы исследуемого белка карбоксиметилируют или окисляют надмуравьиной кислотой. После внесения последней порции этилтиотрифторацетата рН понижают до 6 и удаляют мочевину и избыток реагента, диализуя смесь против дистиллированной воды или 1 % - ного раствора бикарбоната аммония. В результате трифтораце-тилирования е-аминогруппы остатков лизина блокируются трифто-рацетильными группами, и поэтому они не могут быть протониро-ваны. Далее модифицированный белок подвергают ферментативному гидролизу, следя за тем, чтобы рН не превысил 8 2, так как в более щелочной среде трифторацетильные группы отщепляются. [22]
Реакцию модификации SH-групп Са-АТФазы препаратов ретику-лума НБД-хлоридом проводят в среде следующего состава: 100 мМ КС1, 1 мМ ЭГТА, 30 мМ имидазол ( рН 7 0), белок СР 0 2 - 0 3 мг / мл, 0 75 мМ НБД-хлорид, что обеспечивает - 50-кратный избыток тио-лового реагента по отношению к SH-группам белка. [23]
Кофермент А содержит активные SH-группы и катализирует реакции переноса ацильного остатка in vivo, в частности в биосинтезе жирных кислот. Пиридоксальфосфат катализирует реакции трансаминирования и декарбоксилирования аминокислот, в то время как тиаминпирофосфат участвует в метаболизме пентоз и в биохимических реакциях а-кетокислот. [24]
Органические соединения, содержащие SH-группы, могут реагировать с ионами меди ( II) различными способами. В некоторых случаях образуются нерастворимые в воде, обычно темно-окрашенные соли двухвалентной меди; так реагируют дитиокарб-аминаты ( стр. [25]
Установлено, что активная SH-группа, входящая в состав каталитич. [26]
Для количественного определения SH-групп часто берется избыток окислителя, остаток которого определяется после истечения определенного интервала времени путем йодометрического титрования или окисления аскорбиновой кислоты до дегидро-аскорбиновой. [27]
Подобно другим модификаторам SH-группы, иминоксильные производные полностью инактивируют фермент из мышц кролика. Однако при этом он еще сохраняет способность связывать нуклеотидные субстраты, хотя уже и не показывает эффект креатина. [28]
При взаимодействии с SH-группой Н и ОН отрывают с большой скоростью атом водорода. Кроме двойной связи Н может присоединяться к карбонильной, нитро - и циангруппе. Для ароматических соединений весьма характерно открытое отечественными учеными [48] присоединение ОН ( и Н) к бензольному кольцу. Направление атаки в значительной степени определяется природой заместителей в бензольном кольце. Например, при взаимодействии ОН с 4-нитрофенолом возникают в основном 1 2-дигидрокси - и 1 4-ди-гидрокси - 4-нитроциклогексадиенильные радикалы. [29]
Они связываются с SH-группами белков, нарушая их пространственную структуру. [30]