Свободная sh-группа

Cтраница 2

Аффинная хроматография S-пептида и S-белка, образованных в результате протеолитического расщепления бычьей панкреатической рибонуклеазы, обсуждалась в разд. Выделение пептидов, содержащих свободную SH-группу, рассматривалось в разд. [16]

Химический смысл превращения рибонуклеотидов в дезоксирибо-нуклеотиды сводится к элементарному акту-восстановлению рибозы в 2-дезоксирибозу, требующему наличия двух атомов водорода. Непосредственным источником последних оказался восстановленный термостабильный белок тиоредоксин, содержащий две свободные SH-группы на 108 аминокислотных остатков. Тиоредоксин легко окисляется, превращаясь в дисульфидную S-S - форму. Для его восстановления в системе имеется специфический ФАД-содержащий фермент тиоредоксинредуктаза ( мол. [17]

После снятия вещества сорбент оказывается в восстановленной, но неактивированной форме. При этом S-S - связь разрывается, а остатки тиопиридина снова блокируют свободные SH-группы сорбента и одновременно активируют их для повторного использования. [18]

Одним из вариантов восстановления является реакция сульфи-толиза. В присутствии Си2 при щелочном рН соединения, имеющие S-S - связи ( или свободные SH-группы), под влиянием солей сернистой кислоты превращаются в S-сульфонаты. [19]

Отравление белых крыс по 2 ч в день в течение 13 - 15 недель аэрозолем конденсации ТеО2 в концентрации 50 мг / м3 вызывает отставание в приросте массы тела, огрубение волосяного покрова, очаговое облысение, угнетение процессов возбуждения в коре головного мозга, увеличение хронаксии с последующим парезом задних конечностей и гибель 66 % животных. В крови - умеренная гипохромная анемия, снижение активности каталазы, уменьшение относительного содержания альбуминов, нарастание количества ( 5 -, к2 - и угл булинов, уменьшение свободных SH-групп. На вскрытии: увеличение относительной массы печени, почек, селезенки, легких; дистрофические изменения в печени, разрастание стромы; очаги вакуолизации в почках и повышенное кровенаполнение клубочков; в легких - отложение Те в кониофагах альвеолярного эпителия. [20]

Те и TeOj в концентрации 100 мг / м3 ( Сандрацкая; [ 12, с. Трехмесячная пероральная затравка Na Te по 5 или 10 мг / кг и Na2TeO4 по 25 или 50 мг / кг вызывает у крыс и кроликов выпадение волос, снижение активности холинэстеразы в крови и уровня свободных SH-групп, нарушение гликогеннои функции печени. Пероральная затравка Na2TeO3 в течение 7 месяцев дозами 0 005 - 1 мг / кг вызывает нарушение подвижности нервных процессов и функций печени, снижение уровня SH-групп, торможение активности холинэстеразы в крови и мозговой ткани, уменьшение содержания витамина С во внутренних органах. [21]

Наблюдается также увеличение реактивности некоторых химических групп в белке, которые до денатурации не обнаруживались или определялись в меньших количествах. Может происходить также освобождение групп белковых цепочек; так, например, в нативном р-лактоглобулине имеется 12 е-аминогрупп лизина, а после денатурации их обнаруживается 31; или, например, нативный яичный альбумин, предварительно обработанный гуанидином, дает более интенсивную окраску с раствором нитропруссида натрия в силу разрыва дисульфидных связей и увеличения количеств свободных SH-групп. [22]

Комбинация метода Эдмана и масс-спектрометрии в анализе структуры белка. [23]

Сульфгидрильные группы остатков цистеина играют важную роль в проявлении функциональной активности многих белков. В условиях, близких к физиологическим, они являются эффективными нуклеофильными реагентами, обладающими высокой реакционной способностью. Поэтому необходимо модифицировать свободные SH-группы белка на первом этапе изучения его структуры. [24]

С точки зрения легкости отщепления связывание белков через S - S - мостики, по-видимому, имеет преимущества главным образом при получении иммобилизованных ферментов. Поскольку относительно мало ферментов содержат свободные SH-группы, последние можно ввести Б молекулу тиолированием ( разд. В противоположность этому для сорбентов, приготовленных из стабильных низкомолекулярных соединений, предпочтительнее использовать прочные связи ( например, связывание с эпоксиакхивированными гелями), потому что их активность может быть регенерирована промывкой с денатурирующими реагентами, такими, как 6 М гуанидинхлорид ( разд. Прочная связь образуется также-между альдегидами и аминогруппами, если шиффово основание стабилизировать восстановлением борогидридом натрия. Присоединение аффинных лигандов к носителям, которые содержат активные сложноэфир-ные группы, также ведет к прочной связи. Однако при этом образуются также свободные карбоксильные группы, влияние которых необходимо исключить, что достигается повышением ионной силы раствора при аффинной хроматографии. Причина низкой стабильности заключается, вероятно, в том, что связь образуется не только с фенольным и имидазоль-ным кольцами остатков тирозина и гистидина, но также и с а-концевой и е-аминогруппами. Эти побочные реакции приводят к образованию триазеновых связей ( - N N - NH -), которые менее стабильны и легко гидролизуются. Аффинные лиганды, связанные азосвязью, можно освободить с помощью дитионита натрия. [25]

Значительное затруднение при расшифровке последовательности аминокислот может возникнуть, если в молекуле анализируемого белка присутствуют остатки цистеина или цистина. При окислении цистеина образуются S-S - мостики, которые не только являются причиной ошибочных выводов, но и препятствуют дальнейшему анализу, так как содержащие их белки и полипептиды весьма устойчивы к ферментативному расщеплению. Поэтому до проведения анализа рекомендуется избавляться от S-S - мостиков и предотвращать спонтанное окисление свободных SH-групп. Кроме того, следует иметь в виду возможность SH / S-S - обмена. [26]

ЛДбо в течение 45 дней приводило крыс к замедлению роста; в крови снижалось количество гемоглобина и эритроцитов, свободных SH-групп; угнеталась иммуно - биологическая реактивность; в надпочечниках уменьшалось содержание аскорбиновой кислоты. [27]

У белых крыс концентрация 12 3 мг / л ( экспозиция 24 - 30 мин) вызывает легкий наркоз, но в течение 24 ч наступает гибель. Вдыхание 0 77 мг / л в течение 8 - 16 ч переносится без последствий. При введении в желудок в дозе 120 мг / кг обнаружено увеличение печени и надпочечников, снижение содержания витамина С в надпочечниках и свободных SH-групп в печени. У кошек концентрации 2 1 и 4 1 мг / л во время 4-часового вдыхания вызывают лишь легкое раздражение слизистых оболочек и сонливость, но при 4 1 мг / л через 12 ч - смерть. [28]

Концентрация 25 000 мг / м3 при 2 - ч экспозиции вызывает у мышей боковое положение, 80 000 мг / м3 - гибель. Р-450 и свободных SH-групп, свободного холестерина в печени; в сыворотке крови - снижение активности ацетилхолинэстеразы, карбоксилэстеразы, содержания альбумина, общего белка и общего этерифицированного холестерина; сделан вывод о гепато-токсическом действии О. Обнаружена взаимосвязь между концентрацией О. [29]

После 5 введений 0 1 от ЛДво нарушалось окислительное фосфорилирование, резко снижалось потребление кислорода тканью печени и количество свободных SH-групп в сыворотке крови, повышался уровень аскорбиновой кисл. Изменения со стороны крови были выражены слабо и носили нестойкий характер. [30]

Страницы: 1 2 3