Определение - аминокислотная последовательность
Cтраница 1
Определение аминокислотной последовательности представляет собой более сложную задачу, решение которой требует выполнения нескольких этапов; как правило, их реализация осуществляется параллельно. [1]
Определение аминокислотной последовательности осуществляется по принципу собирания мозаики. [2]
Определение аминокислотной последовательности проводится для всех пептидов, образовавшихся под действием трипсина. После этогб сразу же возникает новая проблема-определить, в каком порядке трипсиновые фрагменты располагались в первоначальной полипептидной цепи. [4]
Определение аминокислотной последовательности представляет собой более сложную задачу, решение которой требует выполнения нескольких этапов; как правило, их реализация осуществляется параллельно. [5]
Определение аминокислотной последовательности - задача очень трудоемкая. Однако ее можно было бы значительно облегчить, если бы удалось выработать приемы для фрагментации длинных пептидных цепей на относительно небольшие пептиды, содержащие от 10 до 15 аминокислотных остатков, и на другой ряд более длинных пептидов, с тем чтобы можно было установить места перекрывания небольших пептидов. Такая идеальная возможность редко встречается. Практически проблема решалась несколькими путями. История изучения инсулина, рибонуклеазы и гемоглобина отражает три различных подхода. [6]
Для определения аминокислотной последовательности рибосомальный белок L32 был расщеплен на фрагменты двумя различными методами ( А, Б) и для полученных фрагментов методом Эдмана была определена первичная структура. [7]
Для определения аминокислотной последовательности применяют частичный гидролиз, используя ферменты ( такие, как пепсин, трипсин, химотрипсин) или химические реагенты, достаточно специфичные по их расщепляющей способности. Однако анализ таких гидролизатов дает неполную информацию относительно последовательности аминокислот. Дополнительная информация может быть получена путем анализа С - и М - концевых аминокислот. Большая часть последовательности может быть установлена путем получения различной величины пептидов с перекрывающимися аминокислотными остатками при использовании целого ряда ферментативных и химических методов. [8]
Для определения аминокислотной последовательности важны только те ионы, которые содержат N-концевую часть цепи, и они, как правило, встречаются наиболее часто. [9]
 |
Схема реакц. камеры секвенатора. [10] |
При определении аминокислотной последовательности пептидов находит применение также масс-спектрометрия. В этом случае используется способность ионизнров. [11]
Ввиду общего значения проблемы определения аминокислотной последовательности в пептидах и белках ниже будут рассмотрены принципы применения масс-спектрометрии в области пептидных производных. Следует отметить несколько последних обзоров [7] по этой быстро развивающейся области ( см. также разд. [12]
Выяснение первичной структуры белков включает ступенчатое определение аминокислотной последовательности большого числа олигопептидов, образующихся в результате серии специфических или неспецифических расщеплений молекул. Обычные методы, используемые для определения аминокислотной последовательности в олигопептидах, требуют затрат большого количества труда и времени. В последние несколько лет внимание исследователей было привлечено к использованию масс-спектро-метрической техники для определения последовательности аминокислотных остатков в N-ацилолигопептидах и были получены многообещающие результаты. Небольшое количество вещества, необходимое для получения масс-спектра, быстрота измерения, а также возможность интерпретации данных с помощью ЭВМ - таковы преимущества этого метода по сравнению с другими, широко используемыми в настоящее время. [13]
Мы теперь знаем принципиальную схему определения аминокислотной последовательности полипептидных цепей. [15]
Страницы: 1 2 3 4