Cтраница 2
Каутский, Гирш и Флеш [27] нашли и Франк и Ливингстон [56] подтвердили, что некоторые вещества, фотоокисление которых сенсибилизируется хлорофиллом, например изоамиламин и аллилтиомочевина, не вызывают никакого ослабления флуоресценции хлорофилла. По сообщению Каутского, растворы хлорофилла в ацетоне, насыщенном изоамиламином, ярко флуоресцируют; растворы хлорофилла в чистом изоамиламине не только флуоресцируют, но также обнаруживают красное послесвечение, длящееся до 0 01 сек. Это говорит о том, что сенсибилизация реакции между аллилтиомочевиной ( или другими подобными ей окисляющимися субстратами) и кислородом не может быть приписана взаимодействию возбужденной молекулы хлорофилла во флуоресцирующем состоянии с кислородом или субстратом окисления. [16]
К испытуемому кислому раствору соли галлия в объеме - 5 мл прибавляют 5 мл 4 % - ного раствора бифталата калия и, если необходимо, 10 % - ный раствор КОН до достижения рН 2 5 - 3 5 Затем прибавляют 1 мл 20 % - ного раствора солянокислого гидроксиламина, 1 мл 0 05 % - ного раствора оксихино-лина в 0 5 % - ной СН3СООН и, используя флуоресцентную лампу, титруют 0 001 М раствором комплексона III, прибавляя его со скоростью, соответствующей скорости ослабления флуоресценции до полного ее исчезновения, что легко наблюдать сравнением титруемого раствора с предварительно оттитрованным раствором галлия. [17]
С другой стороны, в конденсированной фазе выход флуоресценции обычно, если не всегда, меньше единицы. Это ослабление флуоресценции средой обусловлено несколькими причинами. Присутствие большого числа посторонних молекул может сделать частично или полностью необратимыми оба вышеупомянутых процесса замедления флуоресценции - рассеяние энергии электронного возбуждения внутри поглощающей свет молекулы ( внутренняя конверсия) и превращение энергии возбуждения в химическую энергию. [18]
В атом случае в области больших длин волн наблюдается флуоресценция, яркость которой уменьшается с уменьшением длины волны. Параллельно с ослаблением флуоресценции квантовый выход разложении N02 растет от нуля в области больших длин воли до значения т) - 2 в области малых длин волн. [19]
Параллельно с ослаблением флуоресценции квантовый выход реакции разложения NO2 растет от нуля в области больших длин волн до значения г 2 - в области малых длин волн. Так, при одинаковых, коэффициентах поглощения в области спектра вблизи А 4360 и К 3660 А в первой, более длинноволновой области, происходит возбуждение молекулы NO2 при равенстве нулю квантового выхода, а во второй - фотодиссоциация при полном отсутствии флуоресценции, в результате чего квантовый выход равен максимальной величине 2 ( см. стр. [20]
Как показано на рис. 8.9 ( II и IV), при сканировании по отражению излучения ртутного источника с длиной волны 254 нм и по ослаблению флуоресценции при той же длине волны получаются пики одинаковой высоты. Однако по сравнению с методом отражения метод ослабления флуоресценции характеризуется более высоким уровнем фона, связанного с неоднородным распределением индикатора в слое сорбента. Именно поэтому, несмотря на одинаковые высоты пиков, отношение высоты пиков к уровню фона в методе отражения выше, чем в методе ослабления флуоресценции. Даже при измерении отражения на ВЭТСХ-пластинках с флуоресцентным индикатором фон значительно больше электрических помех фотометра. [21]
В этих условиях наблюдается пропорциональная зависимость между ослаблением флуоресценции и количеством сульфид-ионов в растворе. Измерение интенсивности флуоресценции проводят при 530 нм, сравнивая флуоресценцию испытуемого и стандартного растворов. [22]
Для косвенного флуоресцентного определения может быть использовано описанное выше гашение флуоресценции. В этом случае конец титрования определяется по кривой ослабления флуоресценции. На рис. 95 приведена кривая титрования флуоресцирующего цирконий-моринового комплекса ионами фтора. [23]
Выявленная до настоящего времени реакционная способность родаминов шире, чем трифенилметановых красителей: все анионные комплексы, реагирующие с последними, образуют соединения и с родаминами, в то время как для ряда элементов, реакционноспособных по отношению к родаминам ( германий, теллур и др.)) реакции с трифенилметановыми красителями пока не найдены. Экстракционно-фотометрические методы анализа - не единственная область аналитического применения основных красителей; последние были использованы также для осаждения и соосаждения микрограммовых количеств некоторых элементов и для фотометрического определения элементов в водной фазе ( по поглощению коллоидных растворов комплексной соли красителя или по ослаблению флуоресценции раствора, обусловленному расходованием части реагента на образование малорастворимой комплексной соли); рассмотрение этих направлений выходит за пределы нашей задачи. [24]
В методе ослабления флуоресценции применяют фотометр, снабженный только одной ртутной лампой и фильтром. Таким образом, для измерения поглощения в УФ-области, очень важной для анализа органических веществ, пригодны только несколько длин волн выше 254 нм. Метод ослабления флуоресценции проигрывает в селективности и чувствительности при определении веществ, максимум поглощения которых находится в УФ-области. Это связано с тем, что в описываемом методе возбуждающее излучение обычно не подстраивают к максимуму поглощения определяемого вещества. На рис. 8.9 ( I, II) показано, как получить оптимальную высоту пика, изменяя длину волны излучения спектрофотометра. [25]
Отсюда следует, что тушение флуоресценции определяется отношением ттуш / Трад. При ослаблении флуоресценции в 103 раз регистрировать отдельные молекулы уже нельзя, хотя концентрационная чувствительность еще остается высокой. В связи с сильным тушением флуоресценции при возбуждении вращательно-колебательных переходов и недостаточной чувствительностью приемников ИК-излучения использование флуоресценции в ИК-области спектра малоэффективно. [26]
В этом случае в области больших длин волн наблюдается флуоресценция, яркость которой уменьшается при уменьшении длины волны. Параллельно с ослаблением флуоресценции квантовый выход реакции разложения N02 растет от нуля в области больших длин волн до значения т) - 2 в области малых длин волн. [27]
При наличии в положении 2 аминогруппы несвязывающие и возбужденные л - орбитали перекрываются в меньшей степени. Поэтому сила осцилляторов п - я - переходов понижается и флуоресценция, обусловленная л - - л - переходами, становится доминирующим процессом. Дополнительное введение заместителей в положение 6, особенно кислородсодержащих, сопровождается ослаблением флуоресценции при низких температурах и появлением фосфоресценции. [28]
Роль восстановителя состоит не только в предотвращении мешающего влияния ряда катионов, но и в устранении окисления морина. Еще лучшая стабилизация достигается при применении58 станнита натрия и комплексона III. Поэтому при использовании шкалы эталонов, приготовленной одновременно с растворами проб, такое ослабление флуоресценции практического значения не имеет. Максимальная яркость флуоресценции растворов развивается в течение 5 мин. [29]
Как показано на рис. 8.9 ( II и IV), при сканировании по отражению излучения ртутного источника с длиной волны 254 нм и по ослаблению флуоресценции при той же длине волны получаются пики одинаковой высоты. Однако по сравнению с методом отражения метод ослабления флуоресценции характеризуется более высоким уровнем фона, связанного с неоднородным распределением индикатора в слое сорбента. Именно поэтому, несмотря на одинаковые высоты пиков, отношение высоты пиков к уровню фона в методе отражения выше, чем в методе ослабления флуоресценции. Даже при измерении отражения на ВЭТСХ-пластинках с флуоресцентным индикатором фон значительно больше электрических помех фотометра. [30]