Cтраница 3
Пластины оставляют на 5 - 10 мин на воздухе для удаления избыточного брома и обрызгиванием равномерно пропитывают их раствором фермента. Выдерживают 30 мин в сосуде в атмосфере насыщенного водяного пара, после чего тотчас обрызгивают раствором субстрата и рассматривают в свете УФ-лампы. Через 1 - 2 мин ингибиторы обнаруживаются в виде темных пятен на сильно флуоресцирующем сине-зеленом фоне. По мере ослабления флуоресценции в результате окисления индоксила в индиго фон окрашивается в синий цвет, на котором выделяются белые пятна, образованные ингибитором. [31]
Роль восстановителя состоит не только в предотвращении мешающего влияния ряда катионов, но и в устранении окисления морина. В этой работе было указано, что медь, серебро и марганец каталитически ускоряют это окисление, а раствор станнита натрия стабилизирует флуоресцентное свечение. Еще лучшая стабилизация достигается при применении58 станнита натрия и комплексона III. Поэтому при использовании шкалы эталонов, приготовленной одновременно с растворами проб, такое ослабление флуоресценции практического значения не имеет. Максимальная яркость флуоресценции растворов развивается в течение 5 мин. [32]