С-концевой остаток

Cтраница 1

С-концевой остаток не является аргинином или лизином. На практике, однако, часто встречаются некоторые отклонения вследствие медленного расщепления некоторых арги-ниновых и лизиновых связей, приводящего к тому, что дочерние и слаборасщепляющиеся исходные крупные пептиды могут отделяться друг от друга при дальнейшем фракционировании. Если триптическии гидролиз длится многие часы, то вследствие имеющегося в препарате трипсина даже незначительного, примесного количества химотрипсина могут появиться следовые количества лишних пептидов. Другая трудность заключается в том, что еще нет уверенности в абсолютной воспроизводимости самого метода пептидных карт. Поэтому очень важно делать одновременно пептидные карты сравнения. [1]

С-концевой остаток может быть освобожден из получаемого продукта расщепления путем гидролиза кислотой или щелочью. Существенным недостатком метода является загрязнение укороченного пептида исходным веществом, регенерируемым - из ацилпроиз-водного мочевины при гидролизе. [2]

С-концевой остаток аланина в инсулине не имеет существенного значения для проявления гипогликемического действия, хотя С-концевой остаток аспара-гина, невидимому, важен для этой функции. Кроме того, Гаррис [ 151з ] сообщил о полученных им результатах, доказывающих, что С-концевой остаток лейцина лизоцима не играет существенной роли для проявления активности. В очень интересном исследовании действия карбоксипептидазы на вирус табачной мозаики Гаррис и Найт [ 151з ] наблюдали, что треонин выделяется специфически в количестве, составляющем около 7 % от общего его содержания в вирусе и соответствующем приблизительно 3 400 остаткам на моль. Повидимому, С-концевая группа треонина не имеет существенного значения для проявления активности вируса, так как препарат вируса после обработки полностью сохраняет свою инфекционную способность до тех пор, пока не выделится весь имеющийся треонин. Более того, детреонизированный вирус, так же как и ацилированный, дает производные, содержащие С-концевой треонин, а полиглициновое производное вируса образует производные, не отличимые от природного вируса. [3]

С-концевого остатка серина этого пептида образует сложноэфирную связь с карбоксильной группой остатков лизина или аргинина в гликопротеине. Тетрадекапептид может также быть расщеплен in vitro с образованием ангиотензина I. Ни тетрадекапептид, ни декапептид не проявляют гипертензивных свойств. [4]

Определение степени рацемизации синтетического Asp - p - амида Уа15 - ангиотензина II ферментативными методами ( Риникер и Швицер. [5]

Карбоксипептидаза отщепила только С-концевой остаток фенилаланина, а лейцинаминопеп-тидаза ( свободная от пролидазы) - первые пять аминокислот. [6]

При этом название С-концевого остатка имеет окончание ин, остальных - пл. Символами L и В ( по системе Фишера) или соответственно S и R ( по системе Кана - Ипгольда - Прелога) обозначают конфигурацию асим-метрпч. [7]

При этом название С-концевого остатка имеет окончание иш, остальных - ил. Символами L и D ( по системе Фишера) или соответственно S и R ( по системе Кана - Ингольда - Прелога) обозначают конфигурацию асим-метрич. [8]

Замена в окситоцине С-концевого остатка глицина на сар-козин [ 5агэ - окситоцин ( XXXVIII) ] [469] приводит к снижению активности соответственно в 12, 8 и 50 раз при испытаниях на матке крысы ( in vitro), на выделение молока у кроликов и на снижение кровяного давления у птиц. По сравнению с N-Me - Туг2 - - окситоцином ( XII) N-метилирование пептидной связи Leus - Gly9 в рассмотренном случае не столь резко повлияло на биологическую активность. [9]

Наконец, карбоксипептидаза поджелудочной железы может специфически отщеплять С-концевой остаток. Будучи простым и удобным, этот ферментативный метод мог быть применен к пептидам и белкам. Однако его ограничения совершенно очевидны. Сродство карбоксипептидазы к С-концевым связям зависит от химической природы С-концевого остатка и, возможно, также от природы второго соседнего остатка. Таким образом, должны быть сделаны следующие заключения: а) карбоксипептидаза может не отщепить аминокислоту, даже если в молекуле пептида действительно имеется С-концевой остаток; б) возможно почти одновременно отщепление первой и второй аминокислоты; в) в случае белков, содержащих более чем одну полипептидную цепь, вторая аминокислота первой цепи может выделиться прежде, чем первая аминокислота прочих цепей. [10]

Газофазный секренатор АП-03 ( НТО АН СССР, г. Ленинград.| Схема реакционной камеры газофазного секвенаторе. [11]

Гидролиз пептидов с помощью карбоксипептидаз является основным способом определения С-концевого остатка и С-концевой аминокислотной последовательности. При исследовании структуры пептидов и белков используются карбоксипептидазы А, В, С и Y. Карбоксипептидазы А ( СРА) и В ( СРВ) выделяют из поджелудочной железы крупного рогатого скота, карбоксипептидазу С ( СРС) - из кожуры и листьев цитрусовых, карбоксипептидазу Y ( CPY) - из пекарских дрожжей. [12]

Неспособность карбоксипептидазы переваривать белок еще не указывает на отсутствие С-концевого остатка. Подобная устойчивость к действию карбоксипептидазы может быть обусловлена структурой белка. Устойчивыми являются также С-концевые амидные остатки и D-формы любых аминокислот. Так же, как и в случае лейцинаминопептидазы, для получения однозначных результатов белок должен быть высокой степени чистоты, а карбоксипептидаза свободна от примеси эндопептидаз. [13]

Схема активного центра фермента карбоксипептидазы ( по данным Липс-комба, Рика, Хартсака, Кешо и Бетджа. [14]

В результате этих взаимодействий, которые закрепляют в двух точках С-концевой остаток субстрата, пептидная связь в случае, если С-концевая аминокислота представляет собой L-изомер, оказывается направленной на каталитический центр фермента, представленный ионом цинка и оксигруппой тирозина. Поляризация связи СО ионом цинка облегчает нуклеофильную атаку молекулы воды на электрофильный атом С. Участие оксигруппы тирозина обеспечивает синхронное протекание разрыва трех связей и образования трех новых связей в циклическом шестицентровом активированном комплексе. [15]

Страницы: 1 2 3