Cтраница 4
После облучения пробы подкисляют 10 % - ной уксусной кислотой ( по лакмусовой бумажке) и сливают в пробирки емкостью в 20 - 25 мл. Чашечки дважды споласкивают водой, которую сливают в те же пробирки. Затем к каждой пробирке прибавляют точно 5 мл хлороформа. Пробирку, хорошо заткнув ее притертой стеклянной пробкой или чисто вымытой ладонью, энергично переворачивают 20 раз для извлечения люмифлавина. Затем оставляют стоять на 10 минут. Как правило, хлороформный слой состоит из двух различных слоев, чистого хлороформа и над ним эмульсии. Отслоение хлороформа происходит не до конца и в делительной воронке, почему, сняв шариковой пипеткой избыток водного слоя, содержимое пробирки центрифугируют и затем уже переводят в делительную воронку, из которой хлороформ сливают в пробирку из белого нефлюоресцирующего стекла, диаметром равную пробиркам со стандартом. Стандарты должны содержать 0 1 / 0 2, 0 3, 0 4, 0 5, 0 6, 0 7, 0 8, 0 9, 1 0, 1 5, 2 0, 2 5, 3 0 ( ir витамина В2 в 5 мл хлороформа, подвергнутых одинаковой с анализом обработке. Затем сравнивают флюоресценцию исследуемого раствора со стандартами под черной лампой. [46]