Cтраница 3
До настоящего времени основным и официально принятым во всех странах методом испытания лекарственных средств на наличие пирогенных примесей является метод, основанный на троекратном измерении температуры тела кролика после внутривенного введения исследуемого препарата. Повышение температуры на 0 6 С или более, согласно требованию фармакопеи, считается доказательством наличия пирогенов. [31]
Вода с низкой электропроводностью ( дистиллированная или деиони-зированная) может быть чистой с химической точки зрения, но представлять большую микробиологическую опасность, потому что может сорбировать микробы из насосов, водопроводных труб, ионообменных колонок. Некоторые грамотрицателъные бактерии могут размножаться в воде, предназначенной для приготовления лекарств для инъекций, выделяя токсические липосахариды, пирогены, которые сохраняются после стерилизации и вызывают пирогенные реакции при инъекции. Вода должна регулярно подвергаться микробиологическому контролю. [32]
Этот раздел охватывает главным образом случаи применения ионитов, не вытекающие из ионообменных свойств смол. Часто можно экспериментально установить, что иониты полезны для удаления загрязнений из раствора - окрашивающих веществ, тяжелых металлов, пирогенов. Эти случаи применения ионитов нередко являются результатами наблюдений при обычных ионообменных процессах. [33]
Пирогены, растворимые в воде, нерастворимы в спирте и ацетоне, устойчивы к воздействию повышенной температуры. Нагревание в автоклаве при 120 С в течение 20 минут приводит к гибели бактерий и их зародышей, но не уничтожает пирогены. Чувствительность пирогенов к высокой температуре различна. Изменение рН водного раствора практически не влияет на термолабильность пирогенов. В сухом состоянии их полное разложение происходит только при температуре 200 С в течение 30 мин; стерилизация сухим воздухом при 160 С в течение 2 ч не гарантирует полной апирогенности. Повышение температуры позволяет сократить время, необходимое для уничтожения пирогенов. [34]
Специальные статьи Фармакопеи оговаривают условия проведения этого испытания, поскольку факторы - химический ( корм), физический ( изменение температуры окружающей среды), физиологический ( возбуждение животных при анальном измерении температуры) - могут повлиять на результат испытания. И даже при самом строгом соблюдении требований к проведению испытаний невозможно избежать случайных ошибок, связанных с индивидуальной чувствительностью животных к пирогену и препарату, различными климатическими условиями, времени постановки опыта и т.п. Все это может отразиться на показателях температуры, измеряемой с точностью до 0 1 С. [35]
В последнее время заметное распространение получает метод испытания лекарственных средств на пирогенность in vitro с использованием лизата амебоцитов краба Лимулюс. Этот метод имеет ряд преимуществ перед фармакопейным: он чувствительнее в 5 - 10 раз, ответ получается быстрее, возможно количественное определение пирогена. Кроме того, с его помощью возможен контроль препаратов, которые нельзя испытать на кроликах. Одним из недостатков этого метода является его специфичность в отношении эндотоксина граммотрица-тельных бактерий, т.е. опасность не уловить наличие в лекарственных средствах пирогенов другого происхождения. [36]
Известно, что пирогеньт имеют полисаха-ридный характер. Ряд авторов предложил использовать для их обнаружения реакцию обесцвечивания перманганата калия: вода подкисляется серной кислотой, нагревается до кипения в присутствии определенного количества раствора перманганата калия, при этом определяется строгая зависимость между обесцвечиванием раствора и присутствием пирогенов. Однако такой раствор будет обесцвечиваться при наличии любых восстановителей независимо от присутствия пирогенов. Таким образом, вышеописанный метод может найти применение только для чистой воды и для растворов устойчивых неорганических соединений. [37]
Пирогены, растворимые в воде, нерастворимы в спирте и ацетоне, устойчивы к воздействию повышенной температуры. Нагревание в автоклаве при 120 С в течение 20 минут приводит к гибели бактерий и их зародышей, но не уничтожает пирогены. Чувствительность пирогенов к высокой температуре различна. Изменение рН водного раствора практически не влияет на термолабильность пирогенов. В сухом состоянии их полное разложение происходит только при температуре 200 С в течение 30 мин; стерилизация сухим воздухом при 160 С в течение 2 ч не гарантирует полной апирогенности. Повышение температуры позволяет сократить время, необходимое для уничтожения пирогенов. [38]
Вирусы, имеющие размер, намного меньший, чем размер бактерий, создают более низкие концентрации в анализируемой воде и будут свободно проходить через микрофильтры, если последние не обработаны кислотой или другими реагентами, вводящими положительный заряд на поверхность фильтра. Последующее вымывание вирусов достигается за счет увеличения рН, что способствует уменьшению взаимодействия в системе вирус - мембрана. Положительные поверхностные заряды обусловливают сообцию пирогенов, возбуждающих лихорадку эндотоксинов фрагментов стенок бактериальной клетки. Однако необходимо иметь в виду, что поверхностные заряды могут быть быстро нейтрализованы любым противоположно заряженным растворенным веществом или суспендированной частицей. [39]
Известно, что пирогеньт имеют полисаха-ридный характер. Ряд авторов предложил использовать для их обнаружения реакцию обесцвечивания перманганата калия: вода подкисляется серной кислотой, нагревается до кипения в присутствии определенного количества раствора перманганата калия, при этом определяется строгая зависимость между обесцвечиванием раствора и присутствием пирогенов. Однако такой раствор будет обесцвечиваться при наличии любых восстановителей независимо от присутствия пирогенов. Таким образом, вышеописанный метод может найти применение только для чистой воды и для растворов устойчивых неорганических соединений. [40]
Такая предварительная обработка ( включает в себя фильтрацию, коагуляцию и хлорирование. Таким образом, выбор между деионизацией с помощью ионообменных смол или дистилляцией зависит от м ногих факторов: от состава сырой воды, желаемой чистоты или качества обработанной воды, места расположения установки и топливной экономики. На практике часто применяют ионный обмен для обработки воды, содержащей менее 600 мг / л всех растворенных твердых тел, при которой не требуется особая стерильность и пирогены не принимаются в - расчет. Бывают также случаи успешной обработки с помощью ионного обмена воды, содержащей 1000 мг / л твердых веществ. [41]
Парэнтеральное введение раствора, содержащего пирогены, вызывает у человека лихорадку. Исключение их из процессов, в которых используется ионообмен, очень хорошо достигается асептичяостью операций и еще лучше - удалением грубых примесей, как это описано выше: пирогены лучше удалять на катионитах. Синтетический цеолит декальсо в Na - ( JopMe [76], сульфосмола IR-100 в Н - форме вместе с слабоосновным ионитом ( деацидит) или без него [67, 69] применялись для адсорбции пирогенов из плазмы и растворов протеинов крови. [42]
Такая предварительная обработка ( включает в себя фильтрацию, коагуляцию и хлорирование. Таким образом, выбор между деионизацией с помощью ионообменных смол или дистилляцией зависит от м ногих факторов: от состава сырой воды, желаемой чистоты или качества обработанной воды, места расположения установки и топливной экономики. На практике часто применяют ионный обмен для обработки воды, содержащей менее 600 мг / л всех растворенных твердых тел, при которой не требуется особая стерильность и пирогены не принимаются в - расчет. Бывают также случаи успешной обработки с помощью ионного обмена воды, содержащей 1000 мг / л твердых веществ. [43]
Парэнтеральное введение раствора, содержащего пирогены, вызывает у человека лихорадку. Исключение их из процессов, в которых используется ионообмен, очень хорошо достигается асептичяостью операций и еще лучше - удалением грубых примесей, как это описано выше: пирогены лучше удалять на катионитах. Синтетический цеолит декальсо в Na - ( JopMe [76], сульфосмола IR-100 в Н - форме вместе с слабоосновным ионитом ( деацидит) или без него [67, 69] применялись для адсорбции пирогенов из плазмы и растворов протеинов крови. [44]
После связывания PGE с рецепторами в клетках увеличивается содержание цАМФ, а в случае PGF - цГМФ, что обусловливает разнонаправленность их эффектов. PGE индуцируют аллергические реакции, a PGF их подавляют. PGEj является мощным пирогеном. Терапевтический эффект аспирина связан с подавлением синтеза простагландинов, так как аспирин ингибирует циклооксигеназу. [45]