Cтраница 1
Агаровые пластинки заливают 0 5 % - ным раствором метиленовой синей в 20 % - ном водном глицерине. Последний раствор сливают, избыток жидкости удаляют, далее делают отпечатки на фильтровальной бумаге. [1]
Агаровую пластинку получают из 2 г агар-агара, 0 1 г натриевой соли фосфата фенолфталеина и 30 мл 0 02 М ацетатного буферного раствора с рН 5 2 для случая кислой фосфатазы или 30 мл гликоко-лового буферного раствора с рН 9 2, содержащего 0 58 % хлористого натрия, для случая щелочной фосфатазы; в раствор добавляют воду до объема 100 мл. После нагревания в автоклаве горячий раствор наливают на стеклянную пластинку и охлаждают. Хрома-тограмму помещают на эту пластинку и оставляют в течение 4 - 12 час при комнатной температуре. После этого бумагу осторожно снимают, чтобы не разрушить слой агара, и опрыскивают 0 1 и. [2]
Готовую агаровую пластинку закрепляют в приборе для электрофореза и покрытые гелем фитили фильтровальной бумаги погружают в буферный раствор, заполняющий ванны. [3]
Высушенную агаровую пластинку на 15 мин погружают в раствор I, затем 15 мин отмывают дистиллированной водой и окрашивают раствором II до появления легкого фиолетового оттенка. После этого препарат 10 мин промывают проточной водопроводной водой и высушивают при 37 С. [4]
Окрашивание агаровых пластинок не только делает полосы преципитации более заметными, но и повышает точность анализа за счет дополнения его специфическими цветными реакциями. Специальные методы окрашивания позволяют, кроме того, более подробно изучать белки и липопроте-иды. [5]
Инокуляцию агаровой пластинки проводят по-разному, через 18 - 20 часов после разливки среды по чашкам Петри. [6]
Перед окрашиванием агаровые пластинки обрабатывают 10 мин 10 % - ной уксусной кислотой. [7]
В середине агаровой пластинки вырезают лунку для внесения исследуемого образца, а на расстоянии 3 мм от лунки, по обе стороны от нее, делают две параллельные канавки. [8]
Для приготовления агаровых пластинок используют предметные стекла. Предварительно их обезжиривают, тщательно промывают водой и высушивают. Стекла нумеруют, укладывают на строго горизонтальную поверхность и на каждое осторожно наливают пипеткой с широким концом 4 мл агара. Пузырьки воздуха в агаре необходимо вывести пипеткой на края стекла. Когда агар застынет и образуется твердый гель, в нем посередине вырезают лунку ( щель) для нанесения исследуемого раствора. Приготовленные пластинки укладывают в электрофоретичес-кую камеру. Агаровое плато соединяют с буферным раствором бумажными мостиками из фильтровальной бумаги. В щель каждой пластинки вводят сыворотку крови, предварительно разведенную буферным раствором. [9]
После этого агаровую пластинку помещают во влажную камеру и оставляют до образования полос преципитации, которые появляются в геле через 2 - 5 дней. [10]
Сначала готовят агаровую пластинку, в которой затем вырезают полоски геля и, удалив их, освободившееся место заполняют суспензией сефадекса. После этого проводят гель-фильтрацию в образованных таким образом слоях сефадекса. [11]
Для этого агаровую пластинку заливают растворами генцианвиолета или кристаллвиолета, которые применяются для окраски бактерий по Граму. Затем этот раствор заменяют на 3 мин. Поверхность агара высушивают фильтровальной бумагой, и после этого делают отпечатки на листах фильтровальной бумаги. Зоны подавления получаются темно-фиолетовыми на бесцветном фоне. [12]
Камеру с агаровыми пластинками закрывают крышкой и включают ток. Если напряжение, измеренное на краях агаровой пластинки, достигает 45 В, то электрофоретическое разделение белков закончится уже через 45 - 60 мин. [13]
Хроматограммы накладывают на агаровые пластинки, засеянные тест-культурой. После двухчасовой инкубации в термостате Хроматограммы удаляют с поверхности агара и последний заливают 2 % - ным раствором красной кровяной соли. После 5-минутной обработки этот раствор заменяют на 1 % - ный раствор железоаммиачных квасцов, который затем сливают через 5 мин. Бактериальный налет на поверхности агара окрашивается в темно-зеленый цвет. Зона подавления при этом не окрашивается. [14]
Примерно в середине агаровой пластинки вырезают две круглых лунки диаметром около 5 мм на расстоянии 2 - 3 см одну от другой. Лунка, расположенная ближе к катоду, предназначена для раствора антигена, а лунка, расположенная в анодной части геля - для иммунной сыворотки. [15]