Агаровая пластинка

Cтраница 2

Изучение антимикробного спектра цефалоспоринов Р и N методом хроматографии на бумаге. [16]

Хроматограмма помещена на агаровую пластинку, засеянную сенной палочкой. [17]

Перед окрашиванием на высушенную агаровую пластинку наливают 10 % - ную уксусную кислоту и оставляют ее на 10 мин. Затем уксусную кислоту сливают и на 60 мин заливают препарат раствором амидового черного. После этого краситель сливают, а избыток его удаляют отмывающим раствором, меняя этот раствор каждые 15 мин, пока он не будет оставаться бесцветным. [18]

Реакцию проводят в агаровых пластинках с параллельными лунками, в которые вносят АГ, а в противоположные лунки - AT. Диффундируя из них навстречу друг другу, они взаимодействуют и образуют полосы преципитации. Поскольку реагенты диффундируют из лунок концентрически, появляется возможность провести сразу несколько реакций, разместив вокруг лунки с AT несколько лунок с разными антигенными растворами. И, наоборот, заполняя периферические лунки AT, а центральную АГ, можно исследовать набор антител в сыворотках разного происхождения. [19]

Через неделю на агаровых пластинках появляются очень мелкие колонии, видимые лишь под бинокулярным микроскопом и окруженные бурым железистым ореолом. [20]

После внесения исследуемых образцов агаровые пластинки помещают в камеру прибора для электрофореза. Контакт агарового геля с буферными ваннами прибора осуществляется с помощью полосок фильтровальной бумаги, смоченных буферным раствором. Бумажные фитили должны примерно на 15 мм покрывать гель на обоих концах агаровой пластинки. [21]

После 15 мин окрашивания агаровую пластинку отмывают дистиллированной водой. [22]

После окрашивания в течение 2 ч агаровые пластинки отмывают, дважды погружая на 15 мин в отмывающий раствор. [23]

Делая с помощью штампа на одной агаровой пластинке две лунки для внесения образца, мы получаем возможность одновременно анализировать два разных белка или две разных белковых смеси и сопоставлять их иммуноэлектрофоретические характеристики. Это имеет особое значение при анализе белков сыворотки крови, при котором в одну из лунок помещают исследуемую сыворотку, а в другую - нормальную сыворотку. [24]

Между двумя буферными ваннами располагается камера для закрепления агаровых пластинок, также изготовленная из плексигласа. По ее верхнему краю с двух сторон внутри есть выступ шириной 2 мм, на который укладывают предметные стекла с агаровым гелем. Расстояние между краями выступа составляет 76 мм. Камера для агаровых пластинок закрывается плексигласовой крышкой, которая защищает агар от высыхания во время электрофореза. [25]

После 30 мин окрашивания окрашивающий раствор сливают и агаровую пластинку заливают дифференцирующим раствором. Затем препарат обрабатывают отмывающим раствором, меняя его каждые 15 мин, пока не прекратится элюирование красителя. [26]

Чистоту культуры на всех этапах культивирования контролируют высевом на агаровые пластинки. [27]

При достаточно высокой концентрации реагентов полоса преципитации достигает соседнего сектора агаровой пластинки, в котором аналогично формируются полосы преципитации с участием другой антигенной системы. Характер взаимодействия полос преципитации двух сравниваемых систем различен, и как показал Оухтер-лони, определяется степенью сходства антигенов. На основании сравнительного анализа антигенов в РДП в агаровом геле выделяют три вида реакции. Реакция идентичности - полосы преципитации, образованные АГ и AT, плавно сливаются, что указывает на серологическое тождество сравниваемых антигенов. Реакция неидентичности - полосы преципитации, образованные антигенами и антисывороткой к ним, перекрещиваются, что свидетельствует о серологическом различии сравниваемых антигенов. Реакция частичной идентичности - полосы преципитации, образованные антигенами и анти-сывороткой к ним, сливаются, но полоса преципитации, образованная одной из этих систем АГ - - AT, дает отросток - шпору, являющийся непосредственным продолжением одной из полос преципитации. Этот тип реакции рассматривают как случай частичной идентичности антигенов, указывающий на то, что в одной из систем АП несет на себе два различных типа детерминантов, а АГ2, присутствующий в другой системе, имеет детерминанты только одной специфичности. [28]

Если после иммуноэлектрофореза исследуемой смеси белков в одну из параллельных канавок агаровой пластинки ввести раствор известного белка, а в другую - специфическую антисыворотку к этому белку, то в месте встречи диффундирующих антигенов и антител образуется продольная полоса преципитации. Если исследуемая смесь белков содержит компонент, идентичный известному белку, то соответствующая этому компоненту полоса преципитации по краям сольется с продольной полосой, демонстрируя феномен идентичности по Ухтерлони ( см. стр. [29]

Заслуживает внимания другой метод испытания: по - - 1 верхность агаровой пластинки инфицируют суспензией спор или частичками мицелия. [30]

Страницы: 1 2 3 4