Аминокислотный анализ

Cтраница 2

Важное место в аминокислотном анализе антибиотиков-полипеп-тидов занимает определение конфигурации аминокислот, входящих в их состав. Еще в 1969 г. Bodanszky и Perlman [71] отмечали, что в гидролиза-тах полипептидных антибиотиков наряду с L-аминокислотами обнаружено более 15 различных D-изомеров аминокислот. Здесь задача состоит в том, чтобы, во-первых, определить конфигурацию всех входящих в антибиотик аминокислот и молярное соотношение между антиподами одной аминокислоты, если она присутствует в количестве трех и более остатков, и, во-вторых, идентифицировать местоположение в пептидной цепи различных антиподов одной и той же аминокислоты. [16]

Помимо того, что аминокислотный анализ существенно важен для изучения пищевых продуктов, определение аминокислотного состава является основным элементарным исследованием при изучении химии белка. У многих авторов имеется тенденция к переоценке значения аналитических данных; тем не менее точный анализ может дать сведения о степени чистоты, минимальном молекулярном весе и суммарном распределении полярных и неполярных групп в молекуле белка. [17]

Утверждая, что результаты аминокислотного анализа являются неутешительными, Бейли [70] отразил точку зрения большинства исследователей, занимающихся анализом белков. Аминокислотный анализ представляет собой необходимую предварительную стадию всякого всестороннего исследования структуры и функции белков. Однако подобно другим аналитическим исследованиям аминокислотный анализ оказывается полезным только в сочетании с результатами других исследований. Химики, занимающиеся изучением белков, со времени Риттхаузена [68] ( 1872 г.) до Викери [69] ( 1946 г.) придерживались довольно естественной точки зрения о том, что знание аминокислотного состава даст возможность объяснить свойства белка, так как последние должны быть интегральной функцией входящих в их состав аминокислот. В настоящее время признано, что свойства боковых цепей белка не являются простыми функциями свойств свободных аминокислот, а представляют собой в действительности весьма сложные функции, зависящие от многих факторов, в частности от относительного расположения боковых цепей в главной пептидной цепи и в свернутой молекуле натив-ного белка. [18]

Метод электрохроматографии удобен для быстрого качественного аминокислотного анализа. [19]

Если основываться только на данных аминокислотного анализа, то нужно учитывать все следующие возможности аминокислотной последовательности: Gly-L-Phe-L-Pro, Gly-L-Pro-L-Phe, ь - Phe-Gly-L-Pro, L-Phe - t - Pro-Gly, ь - Pro-Gly-L-Phe и L-Pro-L-Phe-Gly. Этот простой пример прекрасно иллюстрирует громадное число вероятных структур и проблемы идентификации в ГЖХ. Это происходит вследствие того, что дложны быть известны данные по удерживанию всех дипептидов, которые могли бы получиться из этих комбинаций, чтобы подтвердить, что в выбранных условиях хроматографирования все они успешно разделились бы. Идентификация правильна лишь в том случае, если могут быть исключены все остальные комбинации. [20]

Титруемые группы рибонуклеазы. [21]

Легко видеть, что данные аминокислотного анализа и данные титрования совпадают. Особый интерес представляет поведение фепольной группы тирозина. [22]

При изучении небольших пептидов подходящим методом аминокислотного анализа, например с помощью автоматического аминокислотного анализатора, можно достаточно определенно установить состав пептида, лишенного своей концевой группы. [23]

За немногими исключениями, все методы аминокислотного анализа требуют предварительного гидролиза белка. Чувствительность каждой аминокислоты к гидролизу изменяется не только с условиями гидролиза, но и в зависимости от сопутствующих белку веществ. Например, было показано, что цистин и цистеин могут разрушаться при кислотном гидролизе в присутствии углеводов, но не распадаются в отсутствие последних. [24]

При создании аминокислотных анализаторов были использованы все достижения аминокислотного анализа. Хроматография аминокислот на ионитах по существу осталась без изменений; необходимо было только обеспечить подачу элюента с постоянной скоростью. Потребовалось также преобразовать нингидриновый метод детектирования в непрерывный процесс, что было достигнуто путем модификации двух хорошо известных методов. Несколько позднее для проведения анализа был использован автомат для серийных колориметрических анализов, созданный фирмой Technicon. [25]

Однако этот метод целесообразно использовать лишь тогда, когда аминокислотный анализ можно провести достаточно точно и быстро. [26]

Использование стандартной ВЭЖХ-техники предпочтительно в тех случаях, когда аминокислотный анализ не является основной задачей лаборатории и работы этого типа выполняются эпизодически, а также если необходимо определение только некоторых из веществ этой группы. Наиболее подходящими вариантами являются обращенно-фазовая и ион-парная ВЭЖХ. Для повышения чувствительности детектирования перед анализом аминокислоты могут быть переведены в УФ-поглощающие производные. В некоторых случаях неплохие результаты получаются при детектировании свободных аминокислот в области 200 - 215 нм. [27]

Степень покрытия поверхности сорбентов водородами С и Сщ. [28]

В эту группу входят сорбенты для ионообменной хроматографии, аминокислотного анализа, ионной хроматографии, разделения энантиомеров и для других специфических задач. Имеющаяся информация об этих сорбентах носит весьма поверхностный характер. В качестве матрицы в этой группе сорбентов используют как силикагель с полимерным покрытием, так и макропористые полимеры с привитыми ионогенными группами. [29]

Аминокислотный анализатор Biotronik LC 7000. [30]

Страницы: 1 2 3 4