Cтраница 4
Неподвижная фаза-сефадеко LH-20, элю-ент - хлороформ, скорость подачи элюента - I мл / мин, детектор - спектрофотометр. [46]
Наиболее распространен элюентный режим хрома-тографирования, позволяющий получать в чистом виде все компоненты пробы. В жидкостной хроматографии применяют также изократический и градиентный режимы подачи элюента. В изократическом режиме состав элюента в течение анализа не изменяется, в градиентном режиме состав элюента меняется по определенной программе. [47]
В качестве элюента используют н-гексан. После внесения в первую колонку ( 150x4 мм) гексанового экстракта и подачи элюента в приемник в течение шести минут поступает суммарная фракция ПАУ. [48]
При создании аминокислотных анализаторов были использованы все достижения аминокислотного анализа. Хроматография аминокислот на ионитах по существу осталась без изменений; необходимо было только обеспечить подачу элюента с постоянной скоростью. Потребовалось также преобразовать нингидриновый метод детектирования в непрерывный процесс, что было достигнуто путем модификации двух хорошо известных методов. Несколько позднее для проведения анализа был использован автомат для серийных колориметрических анализов, созданный фирмой Technicon. [49]
Элюент должен подаваться в колонку при высоких давлениях, непрерывно и без пульсаций. Для аналитических работ ( внутренний диаметр колонок до 5 мм) насосы должны обеспечивать подачу элюента со скоростью 10 мл / мин при давлении примерно 300 - 400 атм. Для препаративных работ необходимы большие расходы жидкости. Для подачи подвижной фазы можно использовать: 1) плунжерный насос с длинным ходом поршня и постоянной подачей элюента; 2) плунжерные насосы с коротким ходом поршня и мембранные поршневые насосы с пульсирующей подачей элюента и постоянной частотой хода поршня; 3) поршневые насосы с коротким ходом поршня с меняющейся частотой хода поршня; 4) беспоршневые насосы, в которых используется газ. [50]
Так как сорбция в этом случае проходит по всему объему набухших частиц крахмала, скорость подачи элюента должна быть достаточно низкой, чтобы между сорбентом и подвижной фазой / сп ев ал о устанавливаться равновесие. [51]
Каждое вещество при одних и тех же хроматографических условиях имеет свое время удерживания. Это положение является основой идентификации ( качественного анализа) компонентов разделяемой смеси по временам удерживания при жестком соблюдении постоянства условий эксперимента: состава элюента, расхода элюента ( объемная скорость подачи элюента), использования одной и той же колонки при минимальном колебании температуры окружающей среды, сравнимых количеств вещества в хроматографическом пике анализируемой смеси и стандарта. [52]
Площадь пика делят вертикальными линиями на участки, соответствующие смещению ленты за время сбора одной фракции. Так, при скорости подачи элюента 30 мл / ч, скорости смещения ленты самописца 75 мм / ч и объеме фракций 1 мл расстояние между двумя вертикальными прямыми составляет 2 5 мм. Величину поглощения определяют в точке пересечения кривой элюирова-ния с вертикальной линией. Однако эти данные не пересчитывают на лейцин, поскольку в условиях анализа на аминокислотном анализаторе построение стандартной лейциновой линии является сложной задачей. Поэтому найденные величины поглощения суммируют, вычитают среднее значение фона, умноженное на число фракций, и в итоге получают число, соответствующее площади данного пика. [53]
Выбор подвижной фазы для таких сорбентов довольно сложен, поскольку полимер не должен набухать в этой среде, так как деформация пустот приводит к снижению селективности. Очень полезным элюентом оказалась смесь ацетонитрила с 4 - 6 % воды и 2 - 8 % концентрированного аммиака. Сильное влияние на результаты разделения оказывает скорость подачи элюента, и обычно скорости потока должны быть очень низки. [54]
Колонка должна свободно пропускать элюент и иметь минимальный холостой объем. Естественно, необходимо следить за тем, чтобы нижний ее конец не забивался частицами геля. В верхнем конце колонки должен быть удобный ввод для подачи элюента. Вполне возможно создать недорогую модель, удовлетворяющую всем этим требованиям. Такая стандартная колонка рациональной конструкции ( К 15 / 30) в рабочем состоянии изображена на фиг. Различные варианты упрощенной модели ( длина 20 - 250еж, диаметр 5 - 50 мм), подобные изображенной на фиг. [55]
Сборники с постоянными интервалами времени просты по устройству, надежны в работе и вполне достаточны для выполнения большинства аналитических разделений. Главное возражение, которое может быть выдвинуто против сборников этого типа, состоит в том, что объем фракций изменяется с изменением скорости протекания раствора. При разделениях, в которых трудно поддерживать постоянство скорости протекания, лучше пользоваться насосом, обеспечивающим постоянную скорость подачи элюента, чем применять сложные устройства, гарантирующие сбор равных фракций элюата независимо от изменения скорости протекания. В большинстве сборников с равными интервалами времени приемники помещаются в отверстиях или гнездах, расположенных по периферии поворотного столика, который через определенные промежутки времени поворачивается таким образом, что каждый приемник по очереди оказывается под выпускным отверстием колонки. Повороты обычно осуществляются с помощью груза, висящего на нити, которая обвязана вокруг обода, жестко соединенного с поворотным столиком. Повороты регулируются электромагнитом, действующим от часового механизма или реле времени. [56]
Весьма важный узел жидкостного хроматографа представляет система подготовки и подачи элюента. В систему подготовки элюента входят резервуар с элюентом, в котором должна быть предусмотрена возможность дегазации растворителя в вакууме, при нагревании или ультразвуком [18], а также соответствующие фильтры для удаления воды и взвешенных твердых частиц из органических растворителей. Система подачи элюента должна обеспечить, во-первых, беспульсационный поток жидкости через колонну и детектор. Пульсация или монотонное изменение скорости потока элюента приводит к невоспроизводимости удерживаемых объемов, а это в свою очередь затрудняет качественный и количественный анализ. Кроме того, пульсация потока элюента искажает работу детектирующих систем, что также отражается на погрешности измерений и чувствительности анализа. Система подачи элюента должна обеспечить, во-вторых, возможность изменения в сравнительно широких пределах скоростей потока ( в пределах двух порядков); в-третьих, возможность работы при высоких давлениях, необходимых для сокращения времени разделения, и, в-четвертых, возможность работы в режиме градиентного элюирования. [57]