Полинуклеотидфосфорилаза

Cтраница 1

Полинуклеотидфосфорилаза до сих пор не получена в чистом виде и нет информации о аминокислотных остатках, формирующих ее активный центр. [1]

Полинуклеотидфосфорилаза может быть отнесена к деполиме-разам РНК. Фермент катализует обратимый процесс, в ходе которого полирибонуклеотид реагирует с неорганическим фосфатом; при этом образуется рибонуклеотиддифосфат. Более детально этот вопрос рассматривается в гл. [2]

Дальнейшее уточнение центральной догмы с учетом возможности репликации РНК. [3]

Полинуклеотидфосфорилаза не требует матрицы и не синтезирует полимер со специфической нуклеотидной последовательностью. Цепь РНК необходима ей лишь в качестве затравки, которая просто обеспечивает наличие свободного З - гидроксильного конца, к которому могут присоединяться дополнительные остатки. Реакция протекает как в присутствии всех четырех исходных мономеров, так и в присутствии только одного из них. Нуклеотидный состав образующегося полимера отражает относительное соотношение в среде 5 -дифосфатов-пред - шественников. Поэтому маловероятно, чтобы в естественных условиях полину-клеотидфосфорилаза выполняла функцию РНК; скорее она участвует в деградации РНК. [4]

Дальнейшее уточнение центральной догмы с учетом возможности репликации РНК. [5]

Полинуклеотидфосфорилаза - очень ценный инструмент исследования, поскольку ее можно использовать для получения в лабораторий многочисленных РНК-подобных полимеров с различной нуклеотидной последовательностью и разным содержанием оснований. [6]

При действии полинуклеотидфосфорилазы на индивидуальные нуклео-зиддифосфаты или на смеси разных нуклеозиддифосфатов образуются гомо-или гетерополирибонуклеотиды ( см. стр. [7]

Биологическая функция полинуклеотидфосфорилазы неизвестна. Маловероятно, чтобы этот фермент участвовал в синтезе различных типов клеточной РНК, так как, во-первых, при характерных для внутриклеточной реды концентрациях рибонуклеозиддифосфатов и неорганического фосфата положение равновесия реакции сдвинуто в сторону фосфоролиза, а не в сторону поликонденсации и, во-вторых, первичные структуры затравки и продукта различны. Последний аргумент особенно важен, так как специфичность нуклеотидных последовательностей разцичных типов клеточной РНК может быть обеспечена ( как и в случае ДНК) только управляемым синтезом. [8]

После открытия полинуклеотидфосфорилазы ферменты, катализирующие реакцию получения полирибонуклеотидов из рибо-нуклеозидтрифосфатов, были найдены в клетках различных растений, животных, бактерий и вирусов. Помимо полирибонуклеиновой кислоты, продуктом такой реакции является также неорганический пирофосфат. Для проведения синтеза необходимы: фермент РНК-полимераза, все четыре нуклеозидтрифос-фата, двухвалентный ион Mg или Мп, соединение, содержащее сульфгидрильные группы, и затравка. В тех случаях, когда затравкой служит ДНК, частоты 16 возможных ближайших соседей в затравке и синтезированном полирибонуклеотиде оказываются очень близкими. [9]

Реакция, катализируемая полинуклеотидфосфорилазой, легко обратима. Фермент расщепляет РНК из самых различных источников, хотя s - PHK, по-видимому, устойчива к его действию. [10]

Было показано, что полинуклеотидфосфорилаза из Azotоbacfer vinelandii и Escherichia coli может также катализировать обменные реакции между нуклеозиддифосфатами и неорганическим фосфатом. [11]

При полимеризации смеси нуклеозиддифосфатов под действием полинуклеотидфосфорилазы образуются полинуклеотиды, в которых распределение различных мономерных единиц близко к статистическому. Задача получения полирибонуклеотидов известного строения со специфической нуклеотидной последовательностью пока не решена, хотя возможность получения таких соединений с помощью РНК-полимеразной реакции с использованием в качестве матрицы соответствующих полидезоксирибонуклеотидов не вызывает сомнений. [12]

Фермент, осуществляющий эту реакцию, был назван полинуклеотидфосфорилазой. [13]

Последовательное отщепление нуклеотидов может быть осуществлено также с помощью полинуклеотидфосфорилазы ( см. стр. Продуктами катализируемой этим ферментом реакции олигорибонуклеотида с фосфорной кислотой являются нуклеозид-5 - дифосфаты. [14]

Наиболее удобным методом синтеза гомополирибонуклеотидов является полимеризация нуклеозид-5 - дифосфатов, катализируемая полинуклеотидфосфорилазой. В зависимости от условий реакции удается получить полимеры с мол. [15]

Страницы: 1 2 3