Последовательность - элюирование
Cтраница 4
На рис. 2.6 приведены хроматограммы, полученные с L -, D - и DL-пролином. Изменение хиральности асимметрического реагента приводит к изменению последовательности элюирования энантиомеров, в присутствии же рацемического пролина разделения DL-nap не происходит. Чтобы провести количественное определение аминокислот, содержание которых измеряется пикомолями, их после разделения обрабатывали в дополнительной колонке фталевым альдегидом. Преимущество этого реагента заключается в том, что он не взаимодействует с пролином, тогда как с аминокислотами, содержащими первичные аминогруппы, образует интенсивно флуоресцирующие продукты. [46]
Молекулярная структура пробы определяет порядок в ряду элюирования в большей степени, чем свойства твердой неподвижной фазы и элюента. Знание состава пробы и структуры ее составных частей упрощает выбор системы и позволяет прогнозировать последовательность элюирования. [47]
Влияние активности слоя на величину Rr индивидуальных веществ представляет чисто академический интерес, однако играет существенную роль при разделении смесей. Часто изменение активности слоя влияет на селективность ТСХ-разделения, а в экстремальном случае - на последовательность элюирования или механизма сорбции. Изменение последовательности элюирования, т.е. коренное изменение селективности, встречается довольно часто, причем оно характерно для оксида алюминия, а не для силикагелей. Селективность весьма существенно влияет на разрешение, т.е. на хроматографический процесс, поэтому зависимость селективности от содержания влаги имеет первостепенное значение при выборе оптимальных условий для чувствительных к активности слоя разделений. [48]
Поскольку в исследованном интервале температур агрегатное состояние сквалана остается неизменным, соответствующая зависимость для него имеет обычный линейный характер. В случае же полиэтилен-гликоля в температурном интервале перехода его из жидкого состояния в твердое ( 36 - 56 С) происходят аномальные изменения сорбционной емкости, что выражается, в частности, в изменении последовательности элюирования парафиновых и ароматических углеводородов. При этом могут наблюдаться изменения сорбционной емкости в три и более раз. [50]
Элюирование определенными количествами различных растворителей ( бензол, смеси эфира с бензолом в различных соотношениях, эфир и, наконец, метиловый спирт) в установленной последовательности дает ряд фракций, которые вновь подвергают хроматографическому разделению. Последовательность элюирования всегда одинакова даже в том случае, когда элюирование одного какого-нибудь соединения затрудняется сопровождающими его примесями; так, андростерон всегда элюируется раньше 5-изоандростерона. Вообще А / В-транс ( алло) соединения элюируются раньше, чем А / В-цис ( нормальные) изомеры. Большинство этих веществ было выделено раньше. Три дикетона, № 8 - 10, не были ранее описаны. Вещество № Ю является первым примером выделения Д4 - 3-кетона. Эти вещества нерастворимы в воде. Известные методы спаривания путем этерификации гидроксильной группы серной или глкжуроновой кислотами явно неприменимы к этим дикетонам. [51]
Их применяют для разделения веществ самых различных классов, включая углеводороды, терпены, стероиды, спирты, фенолы, альдегиды, кетоны, перекиси, органические кислоты, амины, амиды, аминокислоты, пептиды, алкалоиды, сахара, нуклеиновые кислоты, неорганические ионы. Последовательность элюирования липидов следующая: углеводороды ( парафины - циклопарафины - нормальные моноолефины - моноолефины циклические и разветвленные - диолефины - ароматические углеводороды - полиолефины, каротины, скваланы) - сложные эфиры - холестериновые эфиры - алифатические альдегиды - триглицериды - высшие спирты - свободные жирные кислоты - хиноны - свободные стерины - диглицериды - моноглицериды - гликолипиды - липоаминркислоты-желчные кислоты - гли-церофосфатидные кислоты - производные инозита - фосфатидилэтаноламины - лизофосфатидилэтаноламины - лецитины - сфингомнелины - лизолецитины ( Н i r s с h J. [52]
Простые нуклеотиды являются эфирами фосфорной кислоты и пуриновых или пиримидиновых нуклеозидов, и поэтому им присущи амфотерные свойства. Фосфатная группа нуклеотидов является своего рода анионной рукой молекулы, которая и обеспечивает разделение этих соединений на ионообменных колонках. Последовательность элюирования нуклеотидов определяется как неионными взаимодействиями этих молекул с сорбентом, так и величиной рН раствора. [53]
Влияние активности слоя на величину Rr индивидуальных веществ представляет чисто академический интерес, однако играет существенную роль при разделении смесей. Часто изменение активности слоя влияет на селективность ТСХ-разделения, а в экстремальном случае - на последовательность элюирования или механизма сорбции. Изменение последовательности элюирования, т.е. коренное изменение селективности, встречается довольно часто, причем оно характерно для оксида алюминия, а не для силикагелей. Селективность весьма существенно влияет на разрешение, т.е. на хроматографический процесс, поэтому зависимость селективности от содержания влаги имеет первостепенное значение при выборе оптимальных условий для чувствительных к активности слоя разделений. [54]
Показано, что при разделении молекул на пористых полимерных сорбентах на основе стирола и дивинилбензола ( полисорб-1 и полисорб-4), модифицированных 10 % сквалана, наблюдается линейная зависимость логарифма исправленного удерживаемого объема lg VR от поляризуемости молекул и числа атомов углерода п в молекулах для гомологических рядов нормальных ал-канов, нормальных спиртов, кетонов. Элюирование непредельных и ароматических углеводородов происходит в соответствии с температурами кипения соединений. При этом последовательность элюирования углеводородов на модифицированном скваланом полисорбе-1 аналогична последовательности элюирования на немодифицированном сорбенте и на сорбенте полихром-1 10 % сквалана. [55]
 |
Влияние давления С02 на коэффициент разделения бензола при разных.| Влияние давленая на коэффициенты распределения алкилнафталинов. [56] |
Другой аспект зависимости lg К от давления показан на рис. 5 на примере разделения двух алкилнафталинов при использовании поли-этиленгликоля 6000 в качестве неподвижной фазы, а н-пентана в качестве подвижной. Влияние давления выражено более ярко, чем на рис. 4, особенно для 2-к-децилнафталина. Очевидно, можно изменить последовательность элюирования децил - и диметилпроизводных выбором другого давления. При давлениях выше 40 атм порядок разделения становится обратным. При более низких давлениях летучесть является определяющим фактором при разделении нафталинов на полярной жидкой фазе, однако при повышенных давлениях электростатическое взаимодействие преобладает над летучестью и разделение в корне меняется. [57]
 |
Влияние давления С02 на коэффициент разделения бензола при разных температурах.| Влияние давления на коэффициенты распределения алкилнафталинов. [58] |
Другой аспект зависимости lg К от давления показан на рис. 5 на примере разделения двух алкилнафталинов при использовании поли-этиленгликоля 6000 в качестве неподвижной фазы, а м-пентана в качестве подвижной. Влияние давления выражено более ярко, чем на рис. 4, особенно для 2-к-децилнафталина. Очевидно, можно изменить последовательность элюирования децил - и диметилпроизводных выбором другого давления. При давлениях выше 40 атм порядок разделения становится обратным. При более низких давлениях летучесть является определяющим фактором при разделении нафталинов на полярной жидкой фазе, однако при повышенных давлениях электростатическое взаимодействие преобладает над летучестью и разделение в корне меняется. [59]
Показано, что при разделении молекул на пористых полимерных сорбентах на основе стирола и дивинилбензола ( полисорб-1 и полисорб-4), модифицированных 10 % сквалана, наблюдается линейная зависимость логарифма исправленного удерживаемого объема lg VR от поляризуемости молекул и числа атомов углерода п в молекулах для гомологических рядов нормальных ал-канов, нормальных спиртов, кетонов. Элюирование непредельных и ароматических углеводородов происходит в соответствии с температурами кипения соединений. При этом последовательность элюирования углеводородов на модифицированном скваланом полисорбе-1 аналогична последовательности элюирования на немодифицированном сорбенте и на сорбенте полихром-1 10 % сквалана. [60]
Страницы: 1 2 3 4 5