Cтраница 1
Сырой препарат помещают в колбу емкостью 250 мл, снабженную капилляром, через который пропускают углекислый газ. Вещество подвергают тщательной фракционированной перегонке ( примечание 6) при давлении 135 мм. После того как оттопится большая часть этилового эфира акриловой кислоты, давление постепенно понижают и примерно при 70 ( 90 мм) сменяют приемник. Количество первой фракции, представляющей собой главным образом этиловый эфир акриловой кислоты, составляет 9 - 10 г. Затем давление понижают до 50 мм и акриловую кислоту отгоняют довольно быстро при 69 - 71 ( 50 мм) при открытом кране без возврата флегмы из обратного холодильника. [1]
Сырой препарат смывают в раствор 30 г едкого натра в 1 500 мл воды и смесь быстро нагревают почти до кипения. [2]
Сырой препарат из фасоли обыкновенной ( Phaseolus vulgaris) широко ис-польз. Семейство из 5 гетерогенных белков, каждый из которых состоит из изомерных некова-лентно связанных тетрамеров, построенных из субъединиц двух различных типов: L ( лейкоагглютинирую-щая активность) и R ( гемагглютини-рующая активность); все белки обладают различной биологической активностью. [3]
Сырой препарат растворяют в минимальном количестве бензола ( около 25 мл) и нерастворившуюся гидроокись отделяют фильтрованием. Безводный ацетилацетонат осаждают добавлением к фильтрату петролейного эфира. [4]
Сырой препарат разбавляют эфиром ( 50 мл), промывают 5 % - ным раствором соды ( 10 мл), а затем водой ( 10 мл) и сушат над безводным сернокислым натрием. После этого эфир отгоняют, а остаток перегоняют в вакууме. [5]
Сырой препарат перекристаллизовывают из 400 мл горячей воды и сушат на воздухе. [6]
Качество сырого препарата, удовлетворяющее этим требованиям, можно получить только при стабилизации режима конденсации ди-хлорфенола и монохлоруксусной кислоты, строгого контроля и постоянства рН среды при ведении процесса. [7]
Для приготовления чистой соли сырой препарат растворяют в 3 мл торячей воды и раствор быстро фильтруют в платиновый тигель. Фильтрат охлаждают льдом, кристаллы отфильтровывают и просушивают на фильтровальной бумаге. Препарат сушат в эксикаторе над серной кислотой и твердым едким кали и хранят без доступа влаги. В платиновом сосуде вещество сохраняется неограниченно долгое время, но стекло с течением времени подвергается его воздействию. [8]
![]() |
Технологическая схема выращивания поверхностной культуры и получения вытяжки. [9] |
Таким путем можно получить неочищенные, сырые препараты, обладающие, тем не менее, довольно значительной активностью и непосредственно используемые в некоторых отраслях промышленности. Так как первым этапом дальнейшей очистки ферментов и получения технических концентрированных препаратов является водная экстракция белка, то в схеме предусмотрена и экстракция, получение диффузионной вытяжки. [10]
Найдено, что весьма важно сушить сырой препарат немедленно после фильтрования; в противном случае, простояв несколько часов, он превращается в маслянистую жидкость, окрашенную в голубой цвет. [11]
Когда в приемнике соберется необходимое количество сырого препарата, приемник отпаивают и его содержимое подвергают фракционированию при пониженном давлении с помощью соответствующей колонки. Для этой цели удобно колбу припаять к колонке Подбильняка длиной 55 см, сделанной из восьмимиллиметровой трубки из стекла пирекс, в которой помещена стеклянная спираль. [12]
Опыт работы с С-специфичной нуклеазой из сырых препаратов щелочной фосфатазы показывает, что она пригодна для расщепления олигонуклеотидов и небольших нуклеиновых кислот. При фракционировании по длине цепи продуктов действия С-нуклеазы на такие большие нуклеиновые кислоты, как РНК TMV, не удается достигнуть такого разрешения, как в случае панкреатического или Т - РНК-азного гидролизатов. Причина этого не ясна. Возможно, не все связи, теоретически чувствительные к этому ферменту, гид-ролизуются, или же часть олигонуклеотидов, оканчивающихся цитидиловой кислотой, остается в виде промежуточных 2г 3 -циклофосфатов, а не З - фосфомоноэфиров. Любая из этих возможностей должна привести к усложнению смеси и, таким образом, ухудшить разрешение. В случае достаточно коротких олигонуклеотидов число возможных продуктов гидролиза ограничено и поэтому результаты легче интерпретировать. [13]
Если желательно получить чистый 9-хлоракридин, то сырой препарат растворяют в небольшом количестве кипящего спирта и приливают к нему 0 5 % - ный аммиак до тех пор, пока раствор не станет мутным. Затем прибавляют 0 5 г активированного березового угля; раствор быстро фильтруют и немедленно охлаждают в бане со льдом. [14]
Затем в полученном фильтрате растворяют вторую половину сырого препарата, раствор вновь охлаждают до 0 и твердое вещество отфильтровывают. Если фильтрат упарить до половины его объема и охладить до 0, то можно получить еще 32 - 37 г ( 6 - 7 %) менее чистого препарата ст. пл. [15]