Cтраница 2
В настоящей главе рассматриваются вопросы технологии: 1) неочищенных сырых препаратов, представляющих собой высушенную вместе с отрубями культуру гриба, либо высушенную целиком биомассу мицеллия или культуральную жидкость, содержащую фермент; 2) так называемых очищенных технических препаратов, активность которых повышена в 25 - 40 раз и которые получают чаще всего, выделяя фермент ( и сопутствующие ему примеси) осаждением их из экстрактов органическими растворителями, обычно спиртами. Будут даны сведения: а) о производстве сырых препаратов из плесневых грибов поверхностным способом; б) о выделении из них очищенных препаратов; в) обобщенной схеме производства ( ВНИИФСа) препаратов различных типов из плесневых грибов; г) о производстве некоторых ферментных препаратов глубинным способом; д) об аппаратуре, используемой в названных технологических процессах. [16]
Это позволяет избежать полного разделения ферментов и использовать в анализе сырые препараты. [17]
Валасек и Хаггинс [2411] обнаружили, что при обработке белков плазмы сырыми препаратами а-амилазы образуется пептид, обладающий гипертензивной активностью; этот пептид был назван веществом А. Позднее было показано [1077, 2411, 2412], что вещество А не образуется в присутствии ингибиторов а-амилазы. В то же время кристаллические препараты ос-амилазы, выделенные из различных источников, не всегда приводят к образованию вещества А. Эти результаты позволили предложить двухстадийный механизм процесса образования вещества А, в котором принимают участие не тодько ос-амилаза, но и протео-литические ферменты, присутствующие в качестве примесей в сырых препаратах амилазы. [18]
В этой связи следует упомянуть работы Цетлера [2672, 2673], который нашел, что сырые препараты вещества Р можно разделить с помощью электрофореза или хроматографии на несколько компонентов, каждый из которых обладает биологической активностью. [19]
Если к ацетоновому фильтрату после выделения второй порции препарата прибавить 1 л холодной воды, то в осадок выпадает около 5 г сырого препарата. [20]
Можно раствор и не фильтровать, однако наличие в нем нерастворимых примесей осложняет последующую стадию, так как затрудняет определение того момента, когда растворение сырого препарата можно будет считать полным. [21]
Суспензию 51 6 г диацетата в смеси 500 г ( 272 мл) концентрированной соляной кислоты, 450 мл воды и 80 мл спирта перемешивают и кипятят с обратным холодильником в течение 45 мин. Сырой препарат очищают быстрой перегонкой с водяным паром. При этом применяют эффективный холодильник длиной 100 см и тщательно охлаждают приемник. В течение получаса собирают приблизительно 3500 мл дестиллата; последний по охлаждении фильтруют и о-нитробензальдегид сушат в эксикаторе над хлористым кальцием. Выход о-нитробенз-альдегида составляет 23 7 г ( 74 % теоретич. [22]
После того как весь бром будет прибавлен, перемешивание продолжают в течение 4 - 5 мин. Сырой препарат подвергают очистке, для чего растворяют его в минимальном количестве кипящего метилового спирта ( 800 - 1 000 мл) и охлаждают раствор в течение 4 час. После этого выделившиеся кристаллы отсасывают и сушат в течение суток в вакуум-эксикаторе в отсутствие света. Выход вещества, получающегося в виде бесцветных игольчатых кристаллов, составляет 110 - 120 г ( 52 - 57 % теоретич. [23]
Сырой препарат растворяют в 150 мл кипящего хлороформа и раствор фильтруют через стеклянную вату, пользуясь воронкой, обогреваемой горячей водой. Фильтрат собирают в коническую колбу емкостью 250 мл и охлаждают в течение 15 мин. В результате получают практически бесцветные игольчатые кристаллы, количество которых составляет 45 г ( 59 % теоретич. [24]
Широким фронтом ведутся поиски микроорганизмов, которые могли бы быть активными продуцентами целлюлазы. Сырые препараты фермента были получены более чем из 100 видов микроскопических грибов и многих видов бактерий. Наиболее изученными продуцентами, у которых исследованы как условия биосинтеза целлюлаз, так и их свойства, являются, по мнению специалистов, следующие: Myrothecium verrucaria, Trichoderma viride, Tr. [25]
Следы более маслянистых побочных веществ, образующихся в виде небольших примесей, очевидно, при конденсации чистого хлораля или с одной молекулой хлорбензола, осложняют процесс получения ДДТ, особенно его смачивающихся порошков. Очистка сырого препарата осуществляется дополнительным промыванием горячей водой или холодным спиртом. Перекристаллизация из горячего спирта дает очень чистый продукт, но одновременно и значительно удорожает его. Поэтому ее проводят в особых случаях, например, при получении аэрозолей ДДТ; вязкие примеси, нерастворимые в применяемых для этой цели растворителях, закупоривают выходные отверстия аэрозольных баллонов. [26]
Бутилнитрит образует желтый маслянистый слой, всплывающий на поверхность водного раствора. Этот слой отделяют и сырой препарат трижды промывают порциями по 60 мл раствора, содержащего 45 г хлорида натрия и 5 г бикарбоната натрия в 180 мл воды. Препарат просушивают над безводным сульфатом натрия. [27]
В настоящей главе рассматриваются вопросы технологии: 1) неочищенных сырых препаратов, представляющих собой высушенную вместе с отрубями культуру гриба, либо высушенную целиком биомассу мицеллия или культуральную жидкость, содержащую фермент; 2) так называемых очищенных технических препаратов, активность которых повышена в 25 - 40 раз и которые получают чаще всего, выделяя фермент ( и сопутствующие ему примеси) осаждением их из экстрактов органическими растворителями, обычно спиртами. Будут даны сведения: а) о производстве сырых препаратов из плесневых грибов поверхностным способом; б) о выделении из них очищенных препаратов; в) обобщенной схеме производства ( ВНИИФСа) препаратов различных типов из плесневых грибов; г) о производстве некоторых ферментных препаратов глубинным способом; д) об аппаратуре, используемой в названных технологических процессах. [28]
Охаб [78] разделил на силикагеле трихомицин, фумагиллин, натамицин, нистатин, амфотерицин А и амфотерицин В. Третий компонент с Rf 0 36, о наличии которого в сырых препаратах кандидина сообщили Боровский и др. [80], в очищенных препаратах обнаружить не удалось. Количественное разделение достигается денситометрированием in situ кандигексина при 340 нм и кандидина при 360 нм. [29]
Фармакологические испытания показали, что вещество А отличается от брадикинина, вещества Р, вещества Z, вазопрессина и пепситензина. Очевидно, вещество А очень близко Пеи5 - ангио-тензину II, особенно если принять во внимание, что сырые препараты а-амилазы способны превращать ангиотензин I в ангио-тензин II. [30]