Агароза
Cтраница 1
Агароза очень гидрофильна, а ее полимерные нити еще в большей степени, чем нити целлюлозы, склонны к образованию водородных связей. Благодаря этому горячий 2 - 6 % - ньтй раствор агарозы застывает в виде жесткого и очень крупнопористого геля. При температуре около 100 гель агарозы плавится, поэтому его нельзя автоклавировать; в случае необходимости гель приходится стерилизовать раствором диэтилпирокарбоната. Модификация агарозы может происходить также по гид-роксильным группалг. [1]
Агароза имеет характерный спектр 13С - ЯМР, насчитывающий 12 сигналов в соответствии с числом атомов С в дисахаридном повторяющемся звене полимера. [2]
Агароза - носитель в гель-хроматографии, аффинной хроматографии, гелевом электрофорезе, иммунодиффузии и иммуноэлектрофорезе. [3]
Агароза ( поли-р-галактопиранозил - 3 6-ангидро-а - ь-галактопираноза) также часто используется в качестве носителя для иммобилизации. [4]
Агароза, согласно Араки [17], является линейным полисахаридом, который построен из D-галактозы и 3 6-ангидро - Ь - галактозы и не содержит ионогенных группировок. Правда, в последнее время предложены два новых метода ее получения. Хьертен [19] для осаждения кислых примесей из раствора агара применил цетилпиридинийхлорид. [5]
Агароза со связанным конканавалином А производится также фирмой Pharmacia как кон А - сефароза. Конканавалин А связан с сефарозой 4В бромциановым методом, и его содержание составляет - 8 мг в 1 мл набухшего геля. [6]
 |
Спектры солюбилизированной агарозы. [7] |
Агароза, будучи растворена в воде, прозрачна для всех длин-волн 350 нм, но слегка поглощает в интервале 240 - 350 нм. Это поглощение прямо пропорционально концентрации агарозы и поэтому может быть исключено, если измерение производят относительно подходящего раствора сравнения. С в течение 2 ч) агароза имеет значительный пик поглощения при 280 нм, обусловленный, по-видимому. [8]
Агароза - это полисахарид, входящий в состав агар-агара. [9]
Агароза - очень гидрофильный материал с крупными порами и весьма жесткой матрицей, каркас которой образуют пучки линейных молекул полимера, связанных водородными связями. Модификация происходит также по гидроксилам полисахарида, но лишь на поверхности пучков каркаса и поэтому - с относительно малой плотностью расположения ионогенных групп. Сшитые агарозы фирмы Pharmacia ( типа Sepharose CL) обладают повышенной химической и тепловой устойчивостью и еще большей жесткостью, чем обычная агароза. [10]
Агарозу ( 30 мг) расплавляют в 2 5 мл фосфатного буфера ( рН 7 2), охлаждают до 42 С и смешивают с 0 3 мл сенсибилизированных эритроцитов и 0 1 мл комплемента. [11]
Поскольку агароза для хроматографии представляет собой водный гель, о набухании ее говорить не приходится. Но следует помнить о том, что агарозу нельзя сушить ввиду необратимой деструкции геля. Агароза для хроматографии поставляется в виде суспендированных в воде сферических гранул диаметром 60 - 200 мкм, которые в таком виде и следует хранить. При кратковременном обсыхании колонки, заполненной агарозой, пока гранулы не начали терять находящуюся в них жидкость, хроматографпческне характеристики сорбента еще могут быть восстановлены. Связанные с агарозой остатки сульфокнслоты ( до 0.5 % по массе) могут сорбировать щелочные белки. Эта сорбция подавляется в присутствии 0 02 М NaCi или другой соли. Гранулированную агарозу для гель-фильтрации и синтеза аффинных сорбентов выпускают следующие фирмы: Pharmacia - под торговым названием Sepharo - se, Bio-Rad - под названием Bio-Gel A, LKB ( Швеция) и 1BF ( Франция) - под названием Ultrogel А. Подробные сведения об этих матрицах, а также о готовых аффинных сорбентах на их основе приведены в гл. [12]
Гель агарозы, используемый как носитель для определения молекулярной массы и / или разделения биополимеров методами хроматографии или электрофореза. [13]
Гель агарозы, который также используется в качестве носителя для гель-хроматографии, поступил в продажу совсем недавно. [14]
Гели агарозы [ 5АС ( аголель) - 10, 8, 6, 4 и 2 ] с пределами исключения молекулярной массы 25 - 104 - 15 - 107 поставляются также фирмами Seravac Labs. [15]
Страницы: 1 2 3 4