Cтраница 1
Приготовление насадки, заполнение колонки и приведение хроматографа в рабочее состояние проводят так, как описано в методе 124 и на стр. [1]
Приготовление насадки, заполнение колонки и калибровка колонки по чистым веществам производится согласно описанию, изложенному на стр. [2]
Приготовление насадки: 100 г твердого носителя оставляют на сутки в концентрированной НС1, затем промывают дистиллированной водой до рН 7 0 и сушат при температуре 200 С в течение 3 - х часов. Затем обрабатывают 5 % - ным раствором КОН в метаноле, выдерживают 2 5 часа, промывают дистиллированной водой до рН 7 0 и снова сушат 3 часа при 200 С. [3]
Приготовление насадки методом фронтального анализа требует меньше рабочего времени, чем при непосредственном добавлении насадки; заполнение и слив жидкости устраняет необходимость перемешивания насадки на начальных стадиях испарения растворителя. [4]
Обычно приготовление насадок проводится одним из двух основных методов: а) испарением или б) фильтрацией. В соответствии с первым из них смесь твердого носителя с раствором неподвижной фазы осторожно перемешивают до полного испарения растворителя. В методе фильтрации носитель смешивают с избытком раствора и затем раствор отфильтровывают. Третьему методу, по которому носитель смешивают непосредственно с неподвижной фазой, исследователи уделяют меньше внимания, поскольку он менее удобен и при его использовании труднее обеспечить равномерное распределение неподвижной фазы. [5]
Обычно приготовление насадок проводится одним из двух основных методов: а) испарением или б) фильтрацией. В соответствии с первым из них смесь твердого носителя с раствором неподвижной фазы осторожно перемешивают до полного испарения растворителя. В методе фильтрации носитель смешивают с избытком раствора и затем раствор отфильтровывают. Третьему методу, по которому носитель смешивают непосредственно с неподвижной фазой, исследователи уделяют меньше внимания, поскольку он менее удобен и при его использовании труднее обеспечить равномерное распределение неподвижной фазы. [6]
При приготовлении насадки рекомендуется также использовать для растворения неподвижной фазы относительно высококипящие растворители, а не хлористый метилен, метанол и ацетон. Растворители с более низкой температурой кипения часто улетучиваются чрезмерно быстро и при использовании подогрева частицы носителя могут растрескиваться. Особенно важна летучесть растворителя, если используется метод фильтрации, поскольку более летучий растворитель часто испаряется с верхней поверхности слоя насадки и не проходит вглубь. [7]
При приготовлении насадки по методу фильтрации носитель смешивают с раствором неподвижной фазы известной концентрации и избыток раствора отфильтровывают. После фильтрования на носителе остается определенное количество раствора. Здесь важно то, что концентрация раствора не меняется; этот факт проверен многократно. Если измерить объем раствора до и после фильтрации, то количество неподвижной фазы, удержанное носителем, можно вычислить с помощью простого уравнения баланса. [8]
При приготовлении насадки не рекомендуется использовать центробежный вакуумный испаритель, так как при вращенш носитель может распыляться, а НЖФ может распределяться по поверхности. [9]
При приготовлении насадки не рекомендуется ксполюовгт центробежный вакуумный испаритель, так как при вращении носитель может распыляться, а НЖФ может распределяться по поверхност. [10]
При приготовлении насадки рекомендуется также использовать для растворения неподвижной фазы относительно высококипящие растворители, а не хлористый метилен, метанол и ацетон. Растворители с более низкой температурой кипения часто улетучиваются чрезмерно быстро и при использовании подогрева частицы носителя могут растрескиваться. Особенно важна летучесть растворителя, если используется метод фильтрации, поскольку более летучий растворитель часто испаряется с верхней поверхности слоя насадки и не проходит вглубь. [11]
При приготовлении насадки по методу фильтрации носитель смешивают с раствором неподвижной фазы известной концентрации и избыток раствора отфильтровывают. После фильтрования на носителе остается определенное количество раствора. Здесь важно то, что концентрация раствора не меняется; этот факт проверен многократно. Если измерить объем раствора до и после фильтрации, то количество неподвижной фазы, удержанное носителем, можно вычислить с помощью простого уравнения баланса. [12]
Далее, при приготовлении насадок очень важно осторожно обращаться с носителем, свести до минимума возможность разрушения его частиц. Если в процессе приготовления частицы носителя разрушаются, появляются необработанные и не покрытые неподвижной фазой поверхности, которые могут вызывать интенсивную адсорбцию и сильное расширение задних фронтов хроматографических пиков. [13]
Во-первых, при приготовлении насадки не следует пользоваться стеклянной посудой; используйте полиэтиленовые ( или из другого полимерного материала) стаканы, колбы и воронки, которые помогают избежать образования статического электрического заряда, обычного для тефлона. Во-вторых, прежде чем наносить неподвижную фазу на носитель, его нужно охладить до 10 С, а испаряя растворитель, не следует прибегать к подогреву. [14]
Далее, при приготовлении насадок очень важно осторожно обращаться с носителем, свести до минимума возможность разрушения его частиц. Если в процессе приготовления частицы носителя разрушаются, появляются необработанные и не покрытые неподвижной фазой поверхности, которые могут вызывать интенсивную адсорбцию - и сильное расширение задних фронтов хроматографических пиков. [15]