Cтраница 4
Поэтому мы можем предположить, что при равновесии между газовой фазой и раствором доля R молекул находится в газовой фазе, тогда как доля ( 1 - R) находится в неподвижной фазе. Так как равновесие является динамическим процессом, это также означает, что в среднем молекула проводит долю R своего времени в газовой фазе и долю ( 1 - R) своего времени в неподвижной фазе. Поэтому средняя скорость молекул равняется Ru. Конечно, все молекулы не перемещаются с одинаковой скоростью; некоторые движутся быстрее, чем другие. Профиль зоны является статистическим распределением времен пребывания этих молекул в колонке. В первом приближении этот профиль имеет гауссову форму. [46]
Количество образца, загружаемого в гелевую колонку, влияет на степень разрешения компонентов этого образца тремя взаимосвязанными способами, как и при других методах фракционирования на колонке. Объем самого образца прибавляется к элюирующему объему колонки, характерному для каждого компонента образца. Далее концентрация каждого компонента влияет на ширину пика элюирования этого компонента. Это влияние становится более выраженным при увеличении размера молекул. Другое ограничение на концентрацию образца накладывает вязкость полимерного раствора - это так называемое вязкое контактирование. Чем более резко меняется вязкость на задней границе зоны образца, тем менее устойчивой становится эта граница. Разрежение, создаваемое вязким течением образца, вынуждает далее растворитель просачиваться через некоторые слабые точки в колонке, при этом распределение скоростей в потоке жидкости становится весьма неоднородным до тех пор, пока не произойдет значительного уширения границы. В работе, посвященной фракционированию гемоглобина и соли на высокомолекулярных декстранах, Флодин [1] показал, что удовлетворительное разделение происходит при вязкостях ниже 4 сантипуаз. Если вязкости превышали указанный предел, разделение нарушалось, и при вязкости 11 8 сантипуаз профиль зоны сильно искажался и зона расширялась. [47]