Cтраница 4
Трехгорлую колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой, специальной пробкой и вводом вакуум / аргон, вакуумируют с помощью масляного насоса и заполняют аргоном, повторяя эти операции трижды. С помощью шприца в колбу вводят диизопропиламин, осушенный пропусканием через короткую колонку с основным оксидом алюминия, степень активности 1 ( 1 68 мл, 1 21 г, 12 0 ммоль) и ТГФ ( перегнанный над бензофенонкетилом в аргоне, 40 мл) и смесь охлаждают до - 30 С. Бутиллитий ( - 1 5 М в гекса-не, 12 0 ммоль) добавляют по каплям в течение 2 мин, и образующуюся смесь перемешивают 45 мин при - 30 С. Раствор охлаждают до - 78 С и по каплям в течение 2 мин добавляют раствор циангидринацеталя [1] ( 2 02 г, 12 0 ммоль) в гексаметаполе ( перегнанном над гидридом кальция в аргоне) ( 10 мл); в процессе прибавления раствор становится красным. Когда прибавление закончено, раствор продолжают перемешивать еще 1 ч при - 78 С. [46]
OC ] D - 21 ( с 0 94 в хлороформе), растворяют в 400 мл 1 2-диметоксиэтана, высушенного перегонкой над алюмогидридом лития. К раствору прибавляют боргидрид лития и для образования диборана приливают раствор 10 г эфирата трехфтористого бора в 40 мл 1 2 - диметоксиЭтана порциями по 5 мл в течение 1 5 час. После каждого прибавления закрытую склянку встряхивают, вначале осторожно, а затем энергично, чтобы разрушить образующийся гель. В процессе прибавления приливают дфполнительно 200 мл растворителя, если реакционная смесь становится слишком густой. Смесь оставляют на ночь, а затем выливают в 1500 мл ледяной воды, нейтрализуют до слабощелочной реакции и упаривают при 40 и остаточном давлении 20 мм до густой пасты. Полученный раствор диализуют ( стр. [47]
В колбу Кьельдаля вносят 50 - 100 г измельченного биоматериала и прибавляют 75 мл смеси, состоящей из равных объемов концентрированных серной и азотной кислот и воды. Колбу закрепляют в штативе в вертикальном положении. Под колбой устанавливают асбестовую сетку так, чтобы она находилась на расстоянии 1 - 2 см от дна колбы. После этого колбу нагревают на небольшом пламени газовой горелки до просветления жидкости, затем колбу опускают на асбестовую сетку и нагревают более сильно, при этом в колбу из делительной воронки по каплям прибавляют азотную кислоту. В процессе прибавления азотной кислоты следует избегать обильного выделения бурых паров оксидов азота. Разрушение биоматериала проводят до тех пор, пока жидкость в колбе не станет светлой и прекратится выделение белых паров. [48]
В трехгорлую колбу, снабженную мешалкой и термометром, помещают 100 мл уксусного ангидрида и несколько миллиграммов о-ман-нозы и добавляют 8 капель 70 % - ной хлорной кислоты. К полученному желтому раствору при перемешивании прибавляют 26 4 г о-маннозы. Прибавление проводят порциями в течение 20 мин, поддерживая температуру 40 - 45 С. После этого реакционную массу выдерживают 60 мин при - 25 С, охлаждают до 15 С и прибавляют по каплям 17 2 мл трехбромистого фосфора, следя за тем, чтобы температура смеси оставалась в интервале 20 - 25 С. Приливают 9 2 мл воды, выдерживают смесь при - 25 С еще 90 мин и медленно прибавляют к ней охлажденный до 5 С раствор 80 г тригидрата ацетата натрия в 100 мл воды. Температура смеси в процессе прибавления должна оставаться в интервале 35 - 40 С. [49]