Cтраница 3
Для того чтобы устранить это нежелательное явление, к выводу из смачиваемого капилляра припаивают так называемый вспомогательный, или тормозящий, капилляр длиной около 10 м ( рис. 3.14), из-которого теперь вытекает смачивающий раствор. При нанесении толстой пленки раствора неподвижной фазы рекомендуется горизонтальная ориентация витков смачиваемого капилляра [25, 160], так как в противном случае пленка раствора может стекать-в нижние витки капилляра. [31]
В случае динамического метода используют растворы неподвижной фазы, причем толщина наносимой пленки может варьироваться в широких пределах скоростью пропускания раствора через колонку ( в пределах от десятой доли до 100 см / с), его вязкостью и поверхностным натяжением. Отсюда, в частности, вытекает возможность реагирования толщины пленки путем выбора природы растворителя. [32]
Описаны экспресс-методы приготовления сорбентов для на-садочных колонок. Например, носитель вместе с раствором неподвижной фазы в летучем растворителе помещают на фильтр Шотта и пропускают через этот фильтр поток нагретого воздуха. Иногда рекомендуется использовать вакуумную сушку сорбента после нанесения на него неподвижной фазы. [33]
А с помощью вакуума; объем раствора в 1 5 разе превышает объем инертного носителя. После загрузки открывается вентиль 5, раствор неподвижной фазы поступает в колонну снизу и выходит в сборник Б, откуда через вентиль 6 отбирается для регенерации. Оставшийся в колонне раствор сливается через вентиль 8, после чего колонна продувается сжатым воздухом - вначале холодным, а затем нагретым примерно до 100 для удаления остатков хлороформа из колонны. [34]
Предварительно заполненная носителем колонка полностью заполняется раствором неподвижной фазы в летучем растворителе. Раствор удаляется из пустот слоя насадки с помощью медленного противотока сухого воздуха или азота. Оставшийся растворитель затем испаряется этим же потоком газа. [35]
Обычно используемые в ГЖХ твердые диатомитовые носители имеют умеренно развитую поверхность ( 1 - 2 м5 / г), которая хорошо смачивается неподвижными фазами различной природы; сорбенты можно приготавливать различными способами. Фронтальные методы приготовления сорбента состоят в пропускании раствора неподвижной фазы через слой носителя, который расположен или на стеклянном фильтре, или непосредственно в колонке. Количество нанесенной на носитель неподвижной фазы рассчитывают как разность концентрации неподвижной фазы в исходном и в прошедшем через носитель растворе. При изменении концентрации раствора неподвижной фазы меняется количество неподвижной фазы, остающееся на носителе. [36]
Наиболее распространенным методом нанесения неподвижной фазы на носитель является метод испарения растворителя. По этому методу взвешенное количество носителя суспендируют в растворе неподвижной фазы в легколетучем растворителе, например, в дихлорметане. Летучий растворитель удаляется испарением, в то время как смесь осторожно перемешивается для обеспечения равномерного распределения. Когда материал становится сыпучим, приступают к заполнению колонки. Колонки заполняют одним из двух способов. [37]
В первом из них хроматографическую пластинку прямо погружают в раствор неподвижной фазы в низко-кипящем растворителе. Некоторые авторы считают этот способ неудовлетворительным, поскольку он не обеспечивает проникания раствора в поры сорбента, и при последующем элюировании хро-матограммы неподвижная фаза может вымываться системой растворителей. Согласно этим авторам, лучшие результаты дает им-прегнирование раствором неподвижной фазы с использованием обычной техники хроматографирования. По-видимому, оба способа имеют одинаковое право на существование; выбор между ними определяется типом используемого сорбента и его свойствами. [38]
В ЖХ для нанесения на носитель жидкой неподвижной фазы применяется метод испарения растворителя, широко используемый в ГХ. Материал для заполнения колонок приготовляется путем суспендирования носителя в растворе неподвижной фазы в летучем растворителе, например дихлорметане. Летучий растворитель удаляется испарением, в то время как смесь осторожно перемешивается током сухого воздуха или азота до тех пор, пока полностью не высохнет. С хрупкими диатомитами эту операцию следует проводить особенно аккуратно. Осколки частиц, разрушающихся при перемешивании, образуют пыль, которая снижает проницаемость и разрешение колонки. [39]
Материал для заполнения колонок может быть также приготовлен методом фильтрации растворителя, популярным у некоторых хроматографистов. По этой методике избыточное количество 5 - 10 % - ного раствора неподвижной фазы в летучем растворителе наливается на носитель, находящийся в колбе. Чтобы удалить воздух из носителя, раствор несколько раз вакуумируется; обезгаженный раствор гарантирует полноту смачивания носителя раствором. Избыток раствора отфильтровывается, и носитель высушивается при осторожном перемешивании в токе азота или воздуха или при мягком нагреве. Хотя, используя этот метод, можно получить насадку удовлетворительного качества, определить с достаточной точностью истинное количество неподвижной фазы, нанесенной на носитель, не представляется возможным. Кроме того, пока эта процедура не будет проводиться с необходимой тщательностью, трудно получить насадку с воспроизводимым количеством неподвижной фазы. [40]
Обычно приготовление насадок проводится одним из двух основных методов: а) испарением или б) фильтрацией. В соответствии с первым из них смесь твердого носителя с раствором неподвижной фазы осторожно перемешивают до полного испарения растворителя. В методе фильтрации носитель смешивают с избытком раствора и затем раствор отфильтровывают. Третьему методу, по которому носитель смешивают непосредственно с неподвижной фазой, исследователи уделяют меньше внимания, поскольку он менее удобен и при его использовании труднее обеспечить равномерное распределение неподвижной фазы. [41]