Cтраница 3
Для экстрагирования окрашенного соединения автор рекомендует пользоваться бутилацетатом вместо эфира, так как при этом не происходит разогревания раствора и не повышается давление в делительной воронке. Экстрагирующий раствор приготовляют следующим образом. Жидкости дают отстояться, водный слой сливают и отбрасывают. Экстрагирующий раствор не устойчив и должен приготовляться каждые 24 часа. [31]
Колонка 6 заполнена стеклянными шариками диаметром 0 1 мм, но может быть также использован очищенный песок. Рубашка 10 предназначается для нагревания: колонки или паром при помощи сосуда для кипячения и обратного холодильника, или циркулирующей водой. Предусмотрено также нагревание экстрагирующего раствора в сосуде 3, выход из которого закрывается притертым плунжерным затвором. [32]
Сначала в Е дают рвотным орешкам пропитаться экстрагирующим веществом. Затем начинается циркуляция последнего. Эти свинцовые трубочки ведут в промывной сосуд, выше д а которого они оканчиваются. Когда V открыт, экстрагирующий раствор проходит через эти трубочки вниз и из них через разбавленную серную кислоту поднимается на поверхность последней, причем отдает ей свое содержание алкалоидов. [33]
В присутствии бария сульфат свинца смывают обратно в колбу струей горячей воды, употребляя возможно меньшее ее количество. Споласкивают также под складкой фильтра. Прибавляют 10 мл соляной кислоты и выпаривают раствор почти досуха. Затем приливают 25 мл экстрагирующего раствора ( см. ниже, сноска 2J, кипятят и продолжают прибавлять этот раствор до растворения сульфата свинца, употребляя на это не более 75 мл. Затем фильтруют через тот же фильтр и промывают остаток сульфата бария горячей водой. [34]
В присутствии бария сульфат свинца смывают обратно в колбу струей горячей воды, употребляя возможно меньшее ее количество. Споласкивают также под складкой фильтра. Прибавляют 10 мл соляной кислоты и выпаривают раствор почти досуха. Затем приливают 25 мл экстрагирующего раствора ( см. ниже, сноска 3), кипятят и продолжают прибавлять этот раствор до растворения сульфата свинца, употребляя на это не более 75 мл. Затем фильтруют через тот же фильтр и промывают остаток сульфата бария горячей водой. [35]
Клеточный материал гомогенизуют в стеклянном капилляре диаметром 400 мкм. При использовании раствора грас-буфера, имеющего рН 7 4, содержащего 0 1 % Тритона Х-100, экстрагируется 72 % суммарного белка. Как показали радиометрические измерения, в результате электрофореза 92 % этого белка переходит в полиакриламидный гель. Если кроме Тритона Х-100 к экстрагирующему раствору добавлять 0 1 % натрийдодецилсульфат, то в раствор переходит 92 % суммарного белка. Более 90 % этого материала при электрофорезе переходит в гель. Образец гомогенизуют, вводя в раствор с клетками прикрепленную к отрезку тефлоновой трубки петлю из стальной проволоки толщиной 28 - 70 мкм. Гомогенизацию ведут 1 - 3 минуты, наблюдая за ее ходом в микроскоп. Раствор центрифугируют 5 - 10 мин в гематокритной центрифуге при скорости вращения 11000 об / мин. При такой обработке получается прозрачная надосадочная жидкость. [36]
Избыток соли должен устранить влияние электролитических загрязнений экстракта на результаты измерения. Первый экстрагирующий раствор состоял из смеси этилового спирта с ацетоном и хлористым натрием; было установлено наличие закономерной зависимости электропроводности раствора от содержания воды ( в пределах 0 - 10 %) в этиловом спирте. Наилучшие результаты ( с точки зрения чувствительности и линейности) были получены для смеси из 70 % этилового спирта и 30 % ацетона. Проводимость экстрактов измерялась мостом переменного тока; при частотах 60 и 1 000 гц были получены весьма близкие результаты. В описанных измерениях поддерживались постоянными скорость и длительность ( 8 - - 10 мин) перемешивания раствора мешалкой ( снабженной электроприводом), температура раствора, количество и гранулярный состав NaCl. С помощью одного из экстрагирующих растворов ( 70 % этилового спирта 30 % ацетона 4 - 3 г NaCl) определялась влажность воздушно-сухой почвы; навеска почвы весом 20 г обрабатывалась 100 г раствора. Большинство экспериментальных точек расположено в непосредственной близости от средней прямой; имеются, однако, и значительные отклонения, вызванные, по мнению авторов работы, проводимостью ионов водорода и гидроксильных групп, различными величинами рН образцов лочв, а также наличием твердых частичек почвы между электродами и осаждением этих частичек на рабочей поверхности электродов. [37]
Помещают 12 5 г просеянной ( 2 мм) воздушно-сухой почвы и половину чайной ложки активированного угля дарко 0 - 97 в коническую колбу на 50 мл и добавляют 25 мл экстрагирующего раствора. В случае растительных материалов перемешивают 5 г свежей измельченной растительной ткани или 1 г сухой измельченной растительной ткани, 200 мл экстрагирующего раствора и половину чайной ложки угля в течение 5 мин. Разбавляют 2 5 мл почвенного экстракта или 5 0 мл растительного экстракта до 15 мл экстрагирующим раствором. Добавляют 7 5 мл раствора бруцина ( 1 % - ный раствор в концентрированной серной кислоте, приготовляемый непосредственно перед употреблением) осторожно по стенкам пробирки. Немедленно перемешивают содержимое палочкой с плоским концом. Через 15 мин измеряют оптическую плотность с синим светофильтром, имеющим максимум пропускания при 425 ммк. Приготовляют калибровочную кривую для концентрации азота в пределах от 0 00001 до 0 0002 %, проводя стандартные растворы через все стадии анализа. Все стандартные растворы, а также и запасные растворы нитрата разбавляют экстрагирующим раствором. Для приготовления запасного раствора растворяют 0 091 г нитрата натрия в 1 л экстрагирующего раствора. [38]
Помещают 12 5 г просеянной ( 2 мм) воздушно-сухой почвы и половину чайной ложки активированного угля дарко 0 - 97 в коническую колбу на 50 мл и добавляют 25 мл экстрагирующего раствора. В случае растительных материалов перемешивают 5 г свежей измельченной растительной ткани или 1 г сухой измельченной растительной ткани, 200 мл экстрагирующего раствора и половину чайной ложки угля в течение 5 мин. Разбавляют 2 5 мл почвенного экстракта или 5 0 мл растительного экстракта до 15 мл экстрагирующим раствором. Добавляют 7 5 мл раствора бруцина ( 1 % - ный раствор в концентрированной серной кислоте, приготовляемый непосредственно перед употреблением) осторожно по стенкам пробирки. Немедленно перемешивают содержимое палочкой с плоским концом. Через 15 мин измеряют оптическую плотность с синим светофильтром, имеющим максимум пропускания при 425 ммк. Приготовляют калибровочную кривую для концентрации азота в пределах от 0 00001 до 0 0002 %, проводя стандартные растворы через все стадии анализа. Все стандартные растворы, а также и запасные растворы нитрата разбавляют экстрагирующим раствором. Для приготовления запасного раствора растворяют 0 091 г нитрата натрия в 1 л экстрагирующего раствора. [39]