Нингидриновый реактив

Cтраница 2

Пробу ( 0 5 мл), если необходимо, разбавляют буфером еще до 2 мл и смешивают с 2 мл нингидринового реактива. [16]

Петри; 7) NaHCO3; 8) 5 % - ная PbNO3 или РЬ ( СН3СОО) 2; 9) реактив Сальковского; 10) реактив Эрлиха; 11) нингидриновый реактив; 12) реактив Несслера; 13) гумусная почва; 14) свежие листья люпина или засушенные листья других бобовых; 15) рыбная, мясная мука или кусочки мяса, рыбы. [17]

Цакапать культуральный раствор на фильтровальную или хро-матографическую бумагу микропипеткой с оттянутым носиком ( 10 - 20 капель в одну точку), подсушить над вентилятором, капнуть реактива Сальковского, Эрлиха или нингидринового реактива. Реактив Эрлиха дает с индольными производными пурпурное окрашивание. [18]

Два метода синтеза аминокислот. [19]

Удобной цветной реакцией на аминокислоты является взаимодействие с нингидрином ( рис. 12.5); продукт реакдки сильно сопряжен и поэтому интенсивно окрашен. Нингидриновый реактив используют для обнаружения аминокислотных пятен при хроматографии на пластинках или на бумаге, а также для колориметрического количественного определения аминокислот. [20]

Элюирующие буферные растворы отводятся из запасных бутылей через приспособление для деаэрации и нагнетаются через ионообменные колонки с постоянной скоростью. Нингидриновый реактив подается насосом в оттекающий поток в точке А, смесь элюата с нингидрином проходит по спирали из тефлона через кипящую водяную баню для развития окраски, образующейся при взаимодействии аминокислот с нингидрином. Величины экстинкции окрашенного раствора непрерывно измеряются в фотометрической установке с самопишущим прибором, / - масло; 2 - присоединение к водяной бане ( 50); 3 - давление воздуха 25 см; 4 - ионообменные колонки; 5 - резервуар для нингидрина; 6 - азот; 7 - воздух; S - масло; 9 - хронометр для соленоида; 10 - указатель уровня; / / - полка, расположенная выше деаэратора на 20 см; 12-деаэратор; 13 - кран, регулируемый соленоидом; 14-насос 1; 15 - насос 2; 16 - насос 3; 17 - многоходовой кран; 18 - резервуар для буфера; 19 - нагреватель; 20 -змеевик из тефлона; 21 - фотометр; 22 -сток к сливу; 23 - измерительные приборы; 24 - измеритель скорости тока; 25-воздушное давление 10 см; 26 - счетчик времени; 27 - регистрирующий аппарат-самописец. [21]

Наряду с нингидриновым реактивом существуют и другие реагенты, дающие цветные продукты с некоторыми аминокислотами. Это свойство избирательного окрашивания часто используют в хроматографии для идентификации отдельных аминокислот. Так, для определения соединений с гуанидиновой группой ( аргинин) используют реакцию Сакагуши. [22]

По этому методу смесь пептидов наносится в центре листа хроматографической бумаги, проводится электрофорез в буфере с рН 3 6 или 6 5, полученная полоса обрабатывается парами надмуравьиной кислоты для перевода остатков полуцистина в цистеиновую кислоту, и затем повторно проводится электрофорез в тех же условиях, но в перпендикулярном направлении. При проявлении полученной карты нингидриновым реактивом пептиды, содержащие цистеиновую кислоту, обнаруживаются за пределами диагонали. [23]

Реакция окрашивания идет по описанной схеме для всех аминокислот, кроме пролина, который является иминокислотой. Однако пролин тоже реагирует с нингидриновым реактивом, образуя достаточно окрашенный продукт с неявно выраженным максимумом поглощения при 440 нм. В связи с этим современные аминокислотные анализаторы оснащаются денситометрами, регистрирующими поглощение раствора ( после реакционной спирали) одновременно на двух длинах волн: 570 и 440 нм. [24]

Метод определения остатков акрекса и каратана, предложенный М. А. Клисенко и А. М. Шмигидиной ( ВНИИГИНТОКС), основан на выделении органическим растворителем, его отгонке и хроматографировании в тонком слое силикагеля КСК с цинковой пылью. Пятна обнаруживают восстановлением продуктов до аминосоединений, проявляющихся нингидриновым реактивом. [25]

NaOH и содержимое их высушивают в вакууме в течение ночи. После этого в пробирки вливают по 1 мл уксусной кислоты и по 1 мл нингидринового реактива. Содержимое пробирок нагревают на водяной бане при 100 в течение 1 часа, в пробирки добавляют по 1 мл уксусной кислоты и охлаждают до комнатной температуры. После этого розовую жидкость переносят в другие пробирки и остатки пигмента экстрагируют из бумаги ледяной уксусной кислотой. Определение оптической плотности проводят на спектрофотометре при 515 М х или на фотоэлектроколориметре ФЭК-М при синем светофильтре по сравнению с контролем. Для приготовления контрольных растворов используют кусочки бумаги, вырезанные из тех же участков хроматограмм, что и определяемые пятна пролина. После подогревания пробирок устойчивая розовая окраска сохраняется лишь в течение часа, поэтому колориметрирование необходимо проводить в течение этого времени. [26]

Распределение аминокислот и других важных аминосоединений показано на фиг. В 18 случаях нанесенные на бумагу аминокислоты обнаруживались при спектрофотометрическом определении при помощи модифицированного нингидринового реактива ( см. стр. Для глицина и серина после хро-матографирования в обратном направлении вырезанного участка хроматограммы, проявленной растворителем П - Э - ФФ, были получены фотометрические отсчеты, составляющие соответственно 82 и 75 % величин, найденных при прямом анализе образцов. [27]

Метод основан на экстракции пестицида из исследуемой пробы органическим растворителем, отгонке растворителя, хроматогра-фировании пробы в тонком слое силикагеля КСК с цинковой пылью. Обнаружение зон локализации препаратов на пластинке производится при нагревании восстановлением их до аминосоединений и проявлением последних нингидриновым реактивом. Метод специфичен для определения акрекса и кара-тана. Другие нитрофенолы определению не мешают. [28]

Прибор и бумажный диск для круговой хроматографии. [29]

В ряде случаев для сохранения окраски уже проявленную хроматограмму опрыскивают вторым реагентом или вводят соответствующее соединение в первоначальный раствор реагента-индика тора. Например, при детектировании пятен аминокислот нингидри-ном образуются пурпурные пятна, выцветающие при комнатной температуре в течение одного дня. Если в исходный нингидриновый реактив ввести ацетат кадмия или после детектирования нингидри-ном опрыскать пятна раствором ацетата никеля, окраска сохраняется пять лет. [30]

Страницы: 1 2 3