Cтраница 3
Следует иметь в виду, что рассматриваемые неподвижные фазы при повышенных температурах ( иногда уже при 70 С) разлагаются с образованием формальдегида и муравьиной кислоты. Поэтому колонки с данными фазами необходимо предварительно термически кондиционировать ( см. гл. Кроме того, рекомендуется тщательная осушка газа-носителя, так как молекулы воды как бы сшивают молекулы полиэтиленгликоля за счет образования водородных связей и изменяют свойства неподвижной фазы. Не должен присутствовать в газе-носителе и кислород, окисляющий полимеры оксидов алкиленов. [31]
Присутствие этих примесей чаще всего не влияет на процесс разделения, однако, они оказывают вредное действие на неподвижную фазу, находящуюся в колонке. Кислород и водяной пар при температурах выше 100 С разлагают полигликоли, полиэфиры и некоторые силиконовые фазы, что приводит к изменению термостойкости и хроматографиче-ских свойств неподвижных фаз. [32]
Проба растворенного вещества, введенная в верхнюю часть заполненной хроматографической колонки, занимает конечную длину колонки, образуя зону. Этот эффект размывания полосы всегда имеет место и, конечно, снижает разделяющую способность. Поэтому важно знать, каким образом конструкция системы, ее геометрия, свойства неподвижной фазы, а также условия проведения процесса влияют на размывание полосы. Далее мы рассмотрим эти эффекты на количественной основе и сделаем выводы, которые дадут нам возможность планировать и осуществлять хроматографические разделения с необходимой разделяющей способностью. [33]
В качестве неподвижных фаз рассматривают р, р - оксидипропионитрил. В этом случае элюент необходимо предварительно насыщать неподвижной фазой, чтобы эффективность колонки быстро не ухудшалась. Они приобретают способность к адсорбции. Протравленные и модифицированные октадецилсилильными группами колонки и: кварца, мягкого и боросиликатного стекла получают свойства обращенной неподвижной фазы. Полистирольные или полисилсжсано-вые неподвижные фазы становятся неэкстрашруемыми после проведения сшивки их макромолекул. Пропустив через колонку кати-онный или неионогенный детергент, можно динамически модифицировать силикагель, получив гидрофобную неподвижную фазу. [34]
Матрицей называют твердую основу неподвижной хроматогра-фнческой фазы. Она имеет вид сплошных или пористых гранул; последние часто представляют собой пространственную сетку линейных полимеров. Для придания материалу матрицы необходимых для хроматографии свойств его модифицируют. Модификация может представлять собой химическое присоединение ( присадку) ионо-генных групп, гидрофобных молекул, биологически активных веществ или фиксацию путем адсорбции тонкого слоя растворителя. Хотя особенности хроматографического процесса определяются в основном характером модификации, физико-химические параметры матрицы могут существенно влиять на свойства неподвижной фазы. К таким параметрам относятся следующие: размеры и форма гранул п их пор; диапазон разброса этих размеров; механическая прочность материала матрицы; характер его смачивания и набухания в элюен-те; химическая стойкость и инертность в условиях хроматографи-ческой элюции; реакционная способность, обеспечивающая возможность химической модификации матрицы. [35]
Подвижная фаза в жидкостных хроматографических системах выполняет двоякую функцию. С одной стороны, она ( подобно подвижной фазе в газовой хроматографии) служит для транспорта десорбированных молекул по колонке. С этой точки зрения химические свойства подвижной фазы не играют существенной роли, более важны их физические параметры: вязкость, летучесть и др. С другой стороны, в отличие от газохро-матографических систем, подвижная фаза в жидкостной хроматографии играет активную, химическую по существу роль. Молекулы подвижной фазы взаимодействуют с другими компонентами системы: молекулами разделяемых веществ и молекулами неподвижной фазы. Фактически константы сорбцион-ного равновесия в системе определяются характером подвижной фазы ничуть не менее, чем характером сорбента. Более того, во многих случаях компоненты подвижной фазы способны к прочной сорбции, что приводит к образованию на поверхности слоя, существенно изменяющего свойства неподвижной фазы. Поэтому вторая, и более важная, функция подвижной фазы сводится к регулированию констант равновесия, величин удерживания. Возможности регулирования удерживания с помощью подвижной фазы необычайно широки. Нередко заменой одного растворителя другим можно изменить коэффициент емкости в 1000 - 10000 раз. Слишком малые значения k непригодны, так как з этой области резко возрастает вероятность взаимного перекрывания пиков. Наоборот, при слишком больших константах сорбции и k разделение требует значительного времени, к тому же увеличивается риск не обнаружить более прочно сорбирующиеся компоненты смеси. [36]
Подвижная фаза в жидкостных хроматографических системах выполняет, как правило, двоякую функцию. С одной стороны, она ( подобно подвижной фазе в газовой хроматографии) обеспечивает перенос десорбированных молекул по колонке. С этой точки зрения химические свойства подвижной фазы не играют существенной роли, более важны их физические параметры, такие как вязкость, летучесть и др. С. Молекулы подвижной фазы взаимодействуют с другими компонентами системы: молекулами разделяемых веществ и молекулами неподвижной фазы. Фактически константы сорбцион-ного равновесия в системе определяются характером подвижной фазы ничуть не менее, чем особенностями сорбента. Более того, во многих случаях компоненты подвижной фазы способны к прочной сорбции, что приводит к образованию на поверхности сорбента слоя, существенно изменяющего свойства неподвижной фазы. Поэтому вторая и более важная функция подвижной фазы сводится к регулированию констант равновесия, к регулированию удерживания. Нередко заменой одного растворителя на другой можно изменить коэффициент емкости в 1000 - 10 000 раз. Слишком малые значения k непригодны, так как в этой области резко возрастает вероятность взаимного перекрывания пиков. Наоборот, если константы сорбции и k слишком велики, для разделения требуется много времени, к тому же увеличивается риск не обнаружить более прочно сорбирующиеся компоненты смеси. [37]