Cтраница 3
Были изолированы дигинатин, гиталоксин, феродиген, дигифолеин, дигипурпурин, идентифицированы гликозиды и сапонины, стероидные сапонины. Описаны методы бумажной хроматографии для различных производных терпенов, азуленов и проазуленов, природных каучука и смол, некоторые липофильные вещества, тритерпеноидные кислоты. [31]
АЯ 0), но такая же ситуация может возникнуть и при переходе из жидкой неполярной фазы. В таком случае липофильное вещество в действительности больше любит воду, чем неполярную среду, но без взаимности: неприязнь воды происходит из-за необходимости создания полости для приема молекулы липофильного вещества, что требует слишком большой работы. Здесь мы подходим к важному понятию гидрофобного эффекта ( см., например, [24, 26, 27]) как проявления взаимодействий, связанных с перестройкой структуры воды. [32]
Зейбольд и Эгле сочли эти результаты доказательством того, что практически весь хлорофилл в листьях находится в нефлуоресцирующем состоянии ( вероятно, связан с белком); малая же доля пигмента растворена в липоидной фазе и поэтому способна флуоресцировать. Они полагали, что при высушивании фракция хлорофилла, обычно присутствующая в липоидной фазе, переводится в водно-коллоидное состояние, тогда как при нагревании хлорофилл сначала экстрагируется из липоидной фазы в коллоидно-белковую фазу, что приводит к исчезновению флуоресценции, но позднее возвращается в липофильное вещество ( в связи с денатурацией белков и плавлением липоидов) и вследствие этого опять начинает флуоресцировать. [33]
В настоящее время предполагается наличие различных форм ( механизмов) прохождения веществ через цитоплазматическую мембрану. Оно может происходить вследствие простой диффузии веществ через поры мембраны по концентрационному градиенту или прохождения растворенного вещества через поры мембраны с потоком растворителя. Липофильные вещества могут диффундировать в клетку благодаря растворению их в ли-пидной фазе мембраны. [34]
В набухшем состоянии имеют гелевую структуру, при высушивании образуется ксерогель. Обладают сильно выраженными гидрофильными свойствами. На сефадексах избирательно адсорбируются некоторые липофильные вещества, особенно ароматические и гетероциклические. Декстраны неустойчивы также к действию окислителей, вызывающих появление в геле карбоксильных групп. Сефадексы подвержены бактериальному действию при длительной работе или хранении во влажном состоянии, поэтому необходимо введение антисептиков: 0 02 % азида натрия или 0 001 % мертиолата или насыщение буферного раствора хлороформом. Термостойкость сефадексов в сухом состоянии составляет 120 С. Возможна стерилизация их в автоклаве; 30 мин при 100 - 120 С, но только в нейтральной среде. [35]
Водные улитки представляют большую опасность, так как в них проходит одна из фаз развития Schistoso-та - возбудителя широко распространенного в тропических странах заболевания людей бильгарциоза. Как и все водные животные, улитки должны быть приспособлены к тесному контакту с водой, чтобы извлекать из нее достаточное количество кислорода. Поэтому они очень чувствительны к липофильным веществам, находящимся в воде даже в минимальных концентрациях. Именно к таким веществам относится большинство химикатов, применяемых в борьбе с водными улитками. Исключение составляет лишь сульфат меди, который до сих пор применяют в больших количествах как обычный пестицид для уничтожения и наземных и водных улиток. В воде, содержащей 2 - 3 мг / л иона меди, через 24 часа погибают почти все улитки. Даже при существующих ценах на медь лишь немногие органические моллюскициды могут конкурировать с медным купоросом, но ряд факторов сдерживает успешное его применение. Медный купорос токсичен для рыб и водной растительности, в частности для водорослей, и, таким образом, может нарушать биологическое равновесие в реках. В жесткой щелочной воде он быстро инактивируется, осаждаясь в виде основного карбоната меди и адсорбируясь частицами ила. [36]
Кутикула покрывает всю листовую поверхность и подустьичную полость ( поверхность мезофильных и палисадных клеток внутри листа, открытую для доступа воздуха) в виде сплошной пленки и является главным препятствием на пути проникновения пестицидов в лист. Она характеризуется отрицательным зарядом и способна поглощать воду. Кутикула имеет липоидный матрикс, и через нее могут проникать липофильные вещества. Эктодесмы кутикулы являются одним из возможных путей проникновения гидрофильных соединений. [37]
Подготовка образца: Помехи обуславливаются ( главным образом) рядом компонентов матрицы образца. В животных тканях содержится большое количество белков. Образцы экстрагируются этилацетатом; получаемый экстракт пропускается через патрон для твердофазного экстрагирования, заполненный аминофа-зой. Липофильные вещества удаляются из патрона несколькими промывками гексаном. [38]
Установлено, что скорость проникновения в клетку органических веществ возрастает с удлинением углеводородной цепи в молекуле, с увеличением числа метиловых, этиловых и фениль-ных групп. С введением в молекулу гидроксильных или аминных групп скорость проникновения ее падает. Скорость проникновения органических веществ в клетку зависит от их растворимости в липидах. Легко проникают в клетку липофильные вещества. [39]
При подборе растворителей для распределительной хроматографии всегда следует иметь в виду обе жидкие фазы. При разделении методом распределительной хроматографии полярных соединений неподвижной фазой служит вода, а подвижной - не смешивающийся с ней менее полярный органический растворитель, к которому добавляют воду. Для разделения гидрофобных веществ применяют распределительную ТСХ с обращенной фазой. В этом случае слой пропитывают липофильными веществами. Подвижной фазой служат полярные органические растворители, которые обыч-ло насыщают неподвижной фазой. [40]
Большинство применяемых в настоящее время химических методов анализа являются неспецифичными. Для подобных разделений требуется, однако, большое количество анализируемой смеси. Поэтому колоночная хроматография используется главным образом для обогащения инсектицидных фракций, которые идентифицируются затем - как указали Мюллер, Эрнст и Шох [30] - методом хроматографии на бумаге или методом ХТС. Поскольку инсектициды в большинстве случаев представляют собой сильно липофильные вещества, требуется нмпрегнирование бумаги. [41]
Итак, кутикула является главным препятствием на пути молекул пестицида, проникающих в лист. Она характеризуется отрицательным зарядом, обусловленным диссоциацией входящих в ее состав карбоксильных групп. Этот заряд кутикулы можно нейтрализовать органическими или неорганическими катионами; последние вызывают дегидратацию кутикулы и улучшают ее проницаемость. Липидный матрикс кутикулы делает ее проницаемой для липофильных веществ. [42]
Преодолев кутикулу и кутикулярные слои покровной ткани, молекулы пестицида встречают новую преграду в виде целлюлозных слоев клеточной оболочки. Несмотря на значительные расстояния между фибриллами целлюлозы, вполне достаточные для диффузионного проникновения веществ, дальнейшее поступление токсикантов чаще всего происходит, по-видимому, через эктодесмы. Межфибриллярные пространства клеточной оболочки, заполненные во-сками или другими липофильными веществами, являются очень удобным путем для проникновения в протопласт липофильных соединений. Если макрополости клеточной оболочки заполнены водой либо водными растворами и ограничены гидрофильными группами молекул целлюлозы, то возникает дополнительный удобный путь для проникновения гидрофильных веществ. Франке [59] считает, что проникновение гербицидов и других веществ через клеточную оболочку всецело обязано диффузии. [43]
Липофильные вещества также оказывают защитное действие на хлорофилл. Визнер [21] еще в 1874 г. отметил, что одинаковая степень выцветания хлорофилла получается: в течение 3 мин. Шотар [20] наблюдал, что окрашенные хлорофиллом масла сохраняют свою окраску неизменной в течение месяца на свету и на воздухе. По Штерну [34, 35], защищенные липоидами водные растворы хлорофилла также фотостабильны. Так как липофильные вещества скорее защищают, чем тушат флуоресценцию хлорофилла, они, повидимому, не оказывают влияния на коротко живущее флуоресцентное состояние пигмента, но влияют на долго живущее активное состояние. [44]
Нельзя сказать, что ассоциация хлорофилла с белками сама по себе может оказывать защитное действие на флуоресценцию. Правда, препараты природного хлоропластина, видимо, флуоресцируют. Хотя Смит [47] и назвал водные белковохлорофильные экстракты из листьев шпината нефлуоресцирующими, однако Ноак [9], Штоль и Виде-ман [45] и Фишман и Мойер [58] обнаружили, что они слабо флуоресцируют и флуоресценция сохраняется также в преципитатах, приготовленных из таких экстрактов путем высаливания. Однако флуоресценция хлоропластина, невидимому, должна быть приписана присутствию 30 % липофильного вещества. Искусственные комплексы, содержащие только хлорофилл и белки, не флуоресцируют. Согласно Ноаку, адсорбаты хлорофилла на глобине иногда слабо флуоресцируют; однако Зейбольд и Эгле [51] предполагают, вероятно не без основания, что это нужно приписать присутствию загрязнений липоидного характера. [45]