Cтраница 1
Разделенные вещества на ТСХ могут быть обнаружены и идентифицированы колориметрическим или другими физико-химическими методами. [1]
Разделенные вещества элюируются из хроматографической колонки потоком газа-носителя, регистрируются детектором и фиксируются на хроматограмме в виде пиков. Полученная хроматограмма служит основой для качественного и количественного анализа смеси веществ. Метод газовой хроматографии применяется для анализа летучих веществ либо веществ, которые могут быть переведены в летучие с помощью специальных приемов и устройств в парообразное состояние. [2]
Разделенные вещества, попадая в пламя, частично де-сорбируются, частично разлагаются: полученные продукты сразу детектируют, поскольку источником локального нагрева в данном случае выступает сам детектор. На результаты детектирования влияет ряд параметров: размеры хроматограммы пластинки; толщина слоя сорбента; расположение хроматограммы в пламени; скорость перемещения хроматограммы в пламени. [3]
Если разделенные вещества обладают собственной окраской или флуоресцируют при облучении УФ-светом, то после хроматографического разделения их можно просто обнаружить. [4]
![]() |
Интегральные показания прибора, полученные с использованием различных фильтров. [5] |
Очень часто разделенные вещества, хотя и близкие по свойствам, имеют различные окраски, так что может быть подобран подходящий фильтр. Алкалоиды митрагины образуют соединения от красновато-фиолетовых до темных красновато-коричневых иветов, если их нагревать с хлоридом железа и хлорной кислотой. [6]
Чтобы идентифицировать разделенные вещества, элюированные с пластинки, применяя методы спектроскопии, используют приготовленные вручную стеклянные пластинки с нанесенным слоем силикагеля Merck Silica Gel HF254 или HR, так как эти адсорбенты, как было показано, почти не содержат органических загрязнений. [7]
Для идентификации разделенных веществ успешно применяется множество химических реакций с органическими реагентами. Такие реакции, хотя логически они осуществимы, имеют то неудобство, что зона при испытании уже больше не может быть приведена к своему первоначальному виду; с другой стороны, преимущество спектроскопического исследования компонентов смеси состоит в том, что химические реакции могут быть выполнены позднее, если это потребуется. [8]
Тогда зоны разделенных веществ с RJ 0 5 приблизятся к фронту ( R f 1), что означает отсутствие разделения. В этом случае получаемая из хромато-граммы как качественная, так и количественная информация становится ненадежной. Использование сэндвич-камеры с ненасыщенной газовой атмосферой в типично адсорбционной хроматографии позволяет проводить разделение в лучших условиях. Как известно, механизм рас-деления на тонком слое силикагеля большей частью является промежуточным между адсорбционным и распределительным. [9]
Обнаружение зон разделенных веществ на хроматограмме обычно производится опрыскиванием подходящими растворами, дающими цветные или люминесцентные реакции с открываемыми ионами. [10]
Для обнаружения разделенных веществ на слоях сефадекса его можно обработать непосредственно, как описано раньше; можно также прижать к слою полоску влажного фильтра и выдерживать 40 - 50 мин. Бумагу затем удаляют, сушат и опрыскивают реактивом для обнаружения. [11]
![]() |
Схема прибора Виланда и Фишера для электрофореза на бумаге.| Стеклянный пульверизатор для обрызгивания бумажных хроматограмм. [12] |
Для исследования разделенных веществ пользуются теми же качественными реакциями и количественными методами, которые описаны в соответствующих главах этой книги. Для проявления бумажных хроматограмм их обрызгивают специальными реактивами, состав которых приводится ниже при описании отдельных методов анализа. Для обрызгивания пользуются специальным пульверизатором. Обрызгивают равномерно и обильно, но не до такой степени увлажнения, чтобы раствор начал капать с бумаги. Обычно обрызгивание проводят под тягой. На рис. 237 изображен хорошо зарекомендовавший себя стеклянный пульверизатор. [13]
Количественное определение хроматографически разделенных веществ может быть выполнено двумя путями: либо вещество удаляется с адсорбента, а затем определяется, либо количественное определение производится непосредственно на слое сорбента. [14]
Универсальный способ детектирования разделенных веществ заключается в том, что при приготовлении пластинок к адсорбенту прибавляют неорганический фосфор и таким образом получают флуоресцирующие пластинки. Поскольку органические вещества чаще всего гасят флуоресценцию, то в ультрафиолетовом свете они обнаруживаются в виде темных пятен. Если вещества сами флуоресцируют, то под воздействием УФ-излучения они обнаруживаются в виде светлых пятен на темном фоне. [15]