Разностный спектр
Cтраница 4
Если в результате изменения структуры происходит только сдвиг простого спектра, имеющего один максимум, разностный спектр имеет вид производной этой кривой с максиму-мом и минимумом вблизи средних точек, соответствующих подъему и спуску кривой исходного спектра. Если имеет место изменение интенсивности и уширение полосы поглощения, то определить характер разностного спектра не столь просто. Разностные спектры могут возникать в результате изменения температуры, при ферментативном гидролизе белка или при различных изменениях в составе растворителя, например при добавлении кислоты, основания, мочевины, соли или неводных растворителей. Большая часть этих реагентов сдвигает спектр поглощения в коротковолновую область. [46]
При добавлении мочевины к воде показатель преломления среды увеличивается. Учитывая это, объясните, почему при добавлении малых количеств мочевины к водному раствору ри-бонуклеазы в ее разностном спектре наблюдается небольшой сдвиг при 285 ммк в красную область спектра, а при увеличении концентрации мочевины до 5 М - резкий сдвиг в голубую область. [47]
NaOD в D2O; б - 10 М NaOD в D2O после воздействия видимого света; в - разностный спектр в чисто спиновой области, приписанный сольватированному электрону. [48]
Работу выполняют так же, как предыдущую. Разрешение г елос, отвечающих гидратированному и дегидратированному состояниям кобальт ( II) силикагеля, вполне отчетливо, так что нет необходимости в построении разностного спектра. [49]
Был снят разностный спектр раствора белка, имевшего поглощение 2 0 при 280 нм, и такого же раствора, содержащего, кроме того, аллостерический модификатор в заданной концентрации, В спектральной области 260 - 300 нм выявилась серия положительных и отрицательных полос. Когда эксперимент повторили с раствором белка, имевшим поглощение 3 0 при 280 нм, в который было добавлено соответственно в 1 5 раза больше аллостерического модификатора, высота максимумов и глубина минимумов на разностном спектре возросла значительно меньше, чем в 1 5 раза. [50]
 |
Распределение белков по компонентам ЦПЭ /, / /, / / /, IV. а, Ь. [51] |
Эти переносчики обладают характерными полосами поглощения в видимой и в близкой ультрафиолетовой областях спектра. Разностные спектры позволяют изучать кинетику их окисления и восстановления. Были применены различные способы удаления из митохондрий специфических ферментов и тем самым сохранения лишь определенных звеньев процесса. [52]
Межатомные расстояния можно определить более точно, если проследить за временной зависимостью ЯЭО. На рис. 2.12 показано влияние переноса поляризации с насыщением ( TOE) между метильной группой и ароматическим кольцом в HPr-протеине, который является компонентой фосфоенолпируватзависимой системы фосфотрансферазы. Разностный спектр позволяет селективно оценить эффект Овер-хаузера. Величина наблюдаемых эффектов часто может составлять несколько процентов, т.е. относительно мала. Для получения хорошего значения отношения сигнал / шум необходимо провести большое число накоплений. Небольшие нестабильности в работе прибора могут вносить искажения в разностную картину, и часто именно этим объясняется необходимость построения циклического эксперимента, причем попеременно проводится, например, 16 экспериментов в режимах on-resonance и off-resonance, а соответствующие спады свободной индукции накапливаются отдельно. [53]
Страницы: 1 2 3 4