Cтраница 2
В настоящее время промышленностью выпускаются спектрофлуориметры. В приборе Перкина - Элмера [12] использован вращающийся сектор для последовательного быстрого пропускания света сначала через один, а затем через другой раствор; два потока флуоресценции проходят через систему спектрофотометра к одному фотоумножителю, и разность в интен-сивностях усиливается и записывается как функция частоты. [16]
С другой стороны, чувствительность спектрофлуориметра лимитируется в принципе лишь максимальной интенсивностью возбуждающего света, но не точностью, с которой можно измерить интенсивность света. [17]
![]() |
Общая схема сггектрофлуориметра. [18] |
На рис. 44 показана схема типичного спектрофлуориметра. [19]
В приборах второго вида - спектрофлуориметрах - первичным и вторичным монохроматизирующими устройствами служат призменные или диффракционные монохроматоры; регистрацию спектров производят при помощи микроамперметров, самопишущих приборов или осциллографов. В упрощенных установках при измерении спектров излучения флуоресценции моно-хроматор помещают лишь на месте вторичного светофильтра, а возбуждение производят соответствующим осветителем со светофильтром, обладающим заданной областью пропускания. Для снятия спектров возбуждения монохроматор устанавливают вместо первичного светофильтра, а вторичный вообще исключают из схемы прибора. Регистрацию спектров в обоих случаях, производят теми же способами, как и в спектрофлуориметрах. [20]
Для измерения спектров замедленной флуоресценции используют спектрофлуориметр с вращающимся цилиндром с прорезями. Определяют зависимость интенсивности замедленной флуоресценции от интенсивности возбуждающего света, используя градуированные ослабитель-ные сетки. Измеряют кинетику затухания замедленной флуоресценции. [21]
![]() |
Хроматограмма, полученная при разделении азаренов. Разделение проводили на целлюлозе смесью ДМФ - вода. Обозначения цветов приведены в подписи к. [22] |
Детектирование путем непосредственного сканирования хроматограмм в спектрофлуориметре позволяет идентифицировать весь спектр токсичных соединений, в том числе ПАУ и азаарены - полициклические ароматические азотсодержащие соединения. [23]
![]() |
Скорректированный и нескорректированный спектры возбуждения хинина ( 0 1 мкг / мл в 0 05 М H2SO4. [24] |
Как показано на рис. 6 - 5, спектрофлуориметр не является двухлучевым прибором в том смысле, в каком этот термин используется в абсорбционной спектроскопии. Второй фотоумножитель служит только для корректировки изменений режима лампы. [25]
Хэррингтон и Мальмштадт [ 177а ] предложили сочетать спектрофлуориметр с перестраиваемым лазером на красителях, что оказалось крайне важным для практической аналитической химии. В конструкции имеется один монохроматор, выполняющий одновременно роль элемента настройки лазера на красителях и диспергирующей системы для получения спектров флуоресценции. При установке в монохроматоре стандартных дифракционных решеток была получена ширина полос генерации лазера на красителях, равная 1 нм, причем одновременно фотографировался спектр флуоресценции в интервале 100 нм с дисперсией 2 нм / мм. [26]
Чтобы измерить спектры возбуждения флуоресценции раствора с помощью однолучевого спектрофлуориметра, устанавливают монохроматор флуоресценции ( если необходимо, при широких щелях) на длину волны максимума полосы флуоресценции исследуемого вещества. Затем монохроматор возбуждения сканируют в определенном интервале длин волн при постоянных щелях и регистрируют изменение интенсивности флуоресценции в зависимости от длины волны или волнового числа возбуждающего света. Получаемый таким путем неисправленный спектр возбуждения зависит от характеристик используемого прибора н часто очень сильно отличается от истинного спектра. [27]
Для лабораторных и научных целей используются различные флуориметры и спектрофлуориметры. [28]
Наносить на ось ординат непосредственно единицы шкалы измерительного прибора спектрофлуориметра ( в частности микроамперы фототока фотоэлемента или фотоумножителя) не рекомендуется. В физических работах и в публикациях некоторых зарубежных авторов [37, 38] по оси абсцисс спектров флуоресценции часто откладывают волновые числа, упрощающие выполнение энергетических расчетов. [29]
Раствор из каждого поглотителя переносят очень быстро в пенопластовый сосуд спектрофлуориметра, добавляют небольшое количество серы и регистрируют сигнал хемилюминесценции. [30]