Cтраница 2
В 1932 г. Кребс и Хензелайт [ 33с ] предположили, что в срезах печени мочевина образуется в ходе циклического процесса, в котором орнитин превращается сперва в цитруллин и далее в аргинин. [16]
Хендлер и Бернхейм [105] установили, что метилирование гуанидиноуксусной кислоты до креатина в срезах печени крысы протекает в присутствии L-метионина вдвое скорее, чем в присутствии D-изомера. Однако а-кетокислота СН3 - S - СН2 - СН2 - СО-СООН, которая, по-видимому, образуется при ферментативном дезаминировании D - или L-метионина под действием соответствующей оксидазы была столь же эффективна, как и L-метионин. Это объясняется, вероятно, тем, что, прежде чем участвовать в метилировании. D-метионин превращается в кетокислоту, которая затем подвергается стереонаправленному переаминированию до L-ами-нокислоты. Такое предположение согласуется с тем, что трансметилирование с участием D-метионина не идет в присутствии бензойной кислоты, ингибирующей действие оксидазы D-аминоки слоты. [17]
В одной из них показано1494, что койевая кислота способна подавлять in vitro окисление срезами печени ряда d - амино-кислот, а также ксантина, / - фенилаланина и / - метионина. Кроме того, установлено, что она подавляет окисление d - аминокислот и / - фенилаланина срезами почки. [18]
Браунштейн и сотрудники [529] описали синтез глутатиона из глицина, цистеина и глутаминовой кислоты в срезах печени крысы; они наблюдали реальный прирост количества этого три-пептида в пробах в результате синтеза. Блох и сотрудники [530-536] обстоятельно изучили реакции, приводящие к синтезу глутатиона. В их ранних исследованиях критерием служило включение меченого глицина и глутаминовой кислоты в глута-тион. [19]
При гомогенизации ткани каталитическая активность теряется и не восстанавливается при простом добавлении метионина, хотя в цельных срезах печени крысы метионин ускоряет реакцию. К первому типу относятся реакции метилирования метионином гуанидиноуксусной кислоты до креатина и никотинамида до N-метилникотинамида. [20]
В дальнейшем Гардинер и Килби [43] сообщили некоторые данные о свойствах ингибитора холинэстеразы, образующегося под действием срезов печени. [21]
Одним из наиболее ранних биохимических сдвигов, описанных при дефиците селена и витамина Е у крыс, была неспособность гомогенатов и срезов печени поддерживать нормальный уровень дыхания после длительной инкубации in vitro. Селен оказался прекрасным катализатором восстановления цитохрома с тиола-мн, н в мышцах овец был описан селенопротеид, содержащий гем, близкий по своей структуре к цитохрому с. Все же для выяснения роли селена в дыхательной цепи митохондрий необходимо проведение дополнительных исследований. [22]
В 1954 г. Касида и др. [21 ] на основании исследования коэффициентов распределения и антихолинэстеразной активности пришли к выводу, что метаболит, образующийся в шпинате, идентичен тому, который возникает в срезах печени крыс. В 1955 г. Хит и др. [63] с помощью определения коэффициентов распределения и способности к гидролизу показали, что в клевере, в срезах печени и при окислении перекисью водорода образуется один и тот же продукт. [23]
В 1954 г. Олдридж [6] показал, что тщательно очищенный ТОКФ очень слабо угнетает холинэстеразу in vitro, но превращается в мощный антихолинэстеразный яд после инъекции кроликам или цыплятам или при инкубации со срезами печени крысы, мета - и пора - Изомеры ТОКФ не подвергались активированию. [24]
Более простым и приемлемым в эксперименте является метод выявления мутагенного эффекта при анафазном и мета-фазном анализе ( статистический подсчет фаз митоза и хромосомных перестроек) препаратов костного мозга, роговицы, эпителия кишечника, срезов активированной печени или ( реже) семенников подопытных животных. [25]
В одном отношении имеющиеся данные требовали изменения гипотезы, поскольку ацетион, как оказалось, обладает очень низкой токсичностью по отношению к американскому таракану: LD50 составляла 1000 мкг / г. Однако в этом случае была обнаружена хорошая корреляция между токсичностью и метаболизмом in vitro - ацетион быстро разрушался в присутствии срезов печени мышей и под действием гомогенатов тараканов; в то же время разрушения совершенно не происходило под влиянием гомогенатов комнатных мух. [26]
Срезы печени, почек и слизистой тонкого кишечника синтезируют аланин из пировино-градной кислоты и аммиака. [27]
Срезы печени, почек и слизистой тонкого кишечника синтезируют аланин из пировиноградной кислоты и аммиака. [28]
В печени усвоение фосфора связано с реакциями цитохромной системы. Опыты со срезами печени в растворе меченого фосфата показали, что в присутствии ингибиторов дыхания, например H2S, CO, HGN, или в отсутствии кислорода, скорость усвоения фосфора тканью уменьшается в десять раз. Тот же результат был получен с почечной тканью. Эти данные показывают связь усвоения фосфора с действием дыхательных энзимов. Присутствие холина, не повышая общего содержания фосфатидов в печени, ускоряет их обмен, благодаря чему ускоряется переход в нее радиоактивного фосфора. [29]
Другим методическим подходом для изучения биохимических процессов вне организма явилось применение срезов различных органов, достаточно тонких, чтобы обеспечить необходимый доступ кислорода. Кребсу, который использовал срезы печени для выяснения основных реакций, протекающих с участием цитруллина, орнитича и аргинина и приводящих к биосинтезу мочевины из аммиака. В срезах печени происходит также окисление жирных кислот. [30]