Cтраница 3
Это позволяет разделить образец на определенное число фракций, приблизительно равных по весу. Осаждение проводят при 25 С непосредственно в центрифужном стакане. Образующуюся дисперсию центрифугируют сразу после осаждения. Далее определяют вес и степень полимеризации каждой фракции. [31]
Нерастворимый материал отделяют центрифугированием и экстрагируют еще четыре раза горячим раствором щелочи, каждая экстракция длится 12 час. Нерастворившийся материал отделяют центрифугированием и промывают в центрифужном стакане до нейтральной реакции. [32]
После добавления сульфата аммония иногда выпадает темный вязкий осадок, который сильно прилипает к стенкам стеклянного стакана. Рекомендуется осаждение сульфатом аммония проводить прямо в центрифужном стакане: раствор сульфата аммония добавляют по каплям из делительной воронки, а содержимое стакана при этом постоянно встряхивают. Смесь центрифугируют 20 мин после 10 мин инкубации. Осадок растворяют в 16 мл 0 1 М фосфатного буфера ( рН 7 4), содержащего 1 5 % - ный холат натрия. Снова добавляют насыщенный сульфат аммония до появления легкой мути. Через 10 мин смесь центрифугируют 20 мин. [33]
Через ви часа реакцию заканчивают. Массу центрифугируют и прозрачную жидкость сливают во второй центрифужный стакан, также снабженный делениями по 10 мл. Шлам, остающийся в первом стакане, перемешивают с 10 мл воды, нагретой до 45, центрифугируют 5 мин. В объединенный раствор добавляют мелко-растертую поваренную соль из расчета 3 г на каждые 10 мл раствора и стакан помещают на / г часа в баню со льдом. Выпавший кристаллический осадок отсасывают и сушат в вакууме над серной кислотой. [34]
Слегка охладившуюся смесь выливают в центрифужный стакан с 40 мл воды, постепенно добавляют 2 г мела и нагревают на водяной бане до прекращения выделения углекислого газа. После нейтрализации теплую массу центрифугируют и жидкость декантируют во второй центрифужный стакан, который помешают в водяную баню, затем в не го по каплям прилив ют раствор соды до щелочной реакции. Массу вновь центрифугируют, жидкость декантируют в другой стакан и концентрируют, помещая на 1 / 4 - / г часа в кипящую водяную баню. Далее массу охлаждают вначале проточной водой, а затем льдом или, лучше, охладительной смесью. Через некоторое время выделяется натриевая соль ( 3-нафталинсульфокислоты. Ее отделяют центрифугированием, а маточный раствор декантируют в фарфоровую чашку и упаривают. Как только начинают выделяться кристаллы, выпарку прекращают, чашку охлаждают водой, а затем льдом. Через / часа густую кристаллическую массу соскабливают со стенок чашки на фильтровальную бумагу и высушивают. Оба осадка смешивают и сушат на водяной бане. [35]
Добавляют 200 мл метилового спирта, перемешивают и приливают 200 мл дихлорметана. Интенсивно взбалтывают содержимое воронки не менее минуты, сливают в центрифужный стакан подходящего объема и центрифугируют в течение 15 мин. [36]
При экстракции прочих твердых продуктов 2 % раствор соляной кислоты наливают IB ступку строго по расчету выбранной кратности к навеске. По окончании настаивания жидкость из ступки вместе с нерастворив-шейся частью разливают по центрифужным стаканам. [37]
Полученный препарат центрифугируют при охлаждении ( стаканы на 0 5 л) в течение 30 мин при 2500 об / мин. Супернатант осторожно сливают в большой стакан, не взмучивая осадок, разливают в центрифужные стаканы на 50 мл и центрифугируют при 40 000 g ( ЦБР-1) в течение 1 5 ч при 1 - 2 С. Почти прозрачный супернатант сливают. К осадкам добавляют по 2 мл фосфатно-боратного буфера. Смесь суспендируют в стеклянном гомогенизаторе при малой скорости вращения пестика и разливают в пробирки по 3 мл. [38]
Высушенный материал измельчают так, чтобы он проходил через сито 50 - 80 меш. Навески по 50 - 250 мг в зависимости от содержания крахмала помещают в центрифужные стаканы емкостью по 50 мл, смачивают несколькими каплями 80 % - ного спирта для предотвращения комкования, прибавляют 5 мл воды и тщательно перемешивают. [39]
К прозрачному бесцветному раствору прибавляют раствор 1 мл ледяной уксусной кислоты и 1 г ацетата калия в 10 мл воды. Полученную калиевую соль хондроитина осаждают 400 мл спирта, отделяют центрифугированием, промывают в центрифужном стакане спиртом и эфиром и высушивают в вакууме. [40]
Небольшие количества твердого вещества, которые суспендированы в большом объеме жидкости, лучше всего улавливать в центрифуге со сливом жидкости. Жидкость подводится через воронку, в которой независимо от расстояния до оси линейная скорость постоянна, и поступает в центрифужный стакан через тонкий шланг, который достигает примерно середины стакана. [41]
Все водные растворы соединяют вместе и экстрагируют смесью амилового спирта и эфира. Последнюю вытяжку, извлекают небольшим количеством разбавленной серной кислоты. Раствор сульфата лизина переносят в центрифужный стакан на 250 мл и доводят рН до 5 по конго и лакмусу. Затем добавляют нескольке граммов ВаСОз и перемешивают до тех пор, пока, реакция не станет щелочной по лакмусу. Осадок отделяют и промывают. Фильтрат концентрируют в вакууме до 200 мл, предварительно добавив около 1 г ВаСОз и немного каприлового спирта. Осадок фильтруют, промывают и концентрируют раствор углекислого лизина при низкой температуре до 30 - 50 мл. [42]
К гомогенату добавляют дистиллированную воду до общего объема 400 мл и 200 мл бензола. Встряхивают смесь в течение 30 мин. Отдельные порции смеси переносят в большие центрифужные стаканы и центрифугируют до полного разделения фаз. Бензольную фазу фильтруют, фильтр промывают чистым бензолом и фильтрат упаривают на паровой бане с помощью тока воздуха примерно до 2 мл. Вливают в колбу 5 мл раствора соляной кислоты, закрывают ее стаканчиком и помещают на паровую баню на 5 час. Затем добавляют 0.2 г цинка и выдерживают на бане еще в течение 5 мин. Охлаждают и доводят до 100 мл дистиллированной водой. Переливают в чистый сухой сосуд, всыпают чайную ложку кизельгура, перемешивают, оставляют на 10 мин. Затем приливают по 1 мл раствора сульфамата аммония, перемешивают, опять оставляют на 10 мин. Доводят растворы до 50 мл дистиллированной водой, перемешивают и оставляют на 60 мин. [43]
Сухой измельченный хрящ ( 4 г) и 280 мл холодной воды помещают в гомогенизатор Виртис-45, снабженный двумя бритвенными лезвиями. К гомогенату при хорошем перемешивании прибавляют 630 мл холодного спирта, оставляют стоять 15 мин, а затем центрифугируют на холоду в течение 30 мин при 2000 об / мин. Опалесцирующий надосадочный раствор декантируют через комочек стеклянного волокна в центрифужный стакан. [44]
Указанные количества реагентов нагревают в колбе с обратной холодильной трубкой в течение 2 час. После окончания реакции массе дают немного охладиться, затем приливают несколько миллилитров воды и перегоняют с водяным паром до тех пор, пока не исчезнет запах бензальде-гида. Содержимое колбы кипятят с небольшим количеством животного угля и горячим отфильтровывают в центрифужный стакан. [45]