Cтраница 4
При помощи воронки, в шейку которой вставлена стеклянная палочка с кончиком, расплюснутым наподобие шляпки гвоздя, охлажденный раствор фильтруют при отсасывании в склянку, из которой воздух предварительно вытесняют сухим азотом. Должны быть приняты меры для предохранения прибора и всех резервуаров от атмосферной влаги. Если препарат боргидрида лития сильно загрязнен, лучше всего экстрагировать его эфиром в центрифужном стакане и нерастворившийся остаток отделить центрифугированием. После удаления большей части растворителя реагент выкристаллизовывается и при последующем растворении в тетрагидрофуране образует прозрачный раствор. Восстанавливающую способность растворов можно определить, оттитро-вывая литий титрованным раствором кислоты или, более точно, манометрическим методом Криницкого с сотрудниками [31], основанным на определении объема водорода, выделяющегося при разложении данного реагента кислотой. [46]
В плоскодонной колбе на 50 мл растворяют 0 9 г хлоралыид-рата в 12 мл воды, добавляют 13 г кристаллического сернокислого натрия, а также раствор 0 47 г анилина в 3 мл воды и 0 43 мл конц. Затем добавляют раствор 1 1 г солянокислого гндроксиламина в 5 мл воды и в течение 10 - 15 минут нагревают до кипения. Через 1 - 2 минуты после начала кипения жидкость охлаждают проточной водой, переливают в центрифужный стакан и центрифугируют. [47]
Мясорубку после каждого образца разбирают, все задержавшиеся в ней куски перетирают в ступке или мелко изрезают ножом и присоединяют к основной массе пробы. Мясорубку промывают и вытирают насухо. Очень удобно измельчать овощи и плоды домашней электрической соковыжималкой, в ней материал тонко перетирается быстро вращающейся теркой, а сок отделяется в результате быстрого вращения центрифужного стакана с мелкими отверстиями. Это удобно и для последующего высушивания материала; жом высушивают в термостате, как и свежеубранные растения, а сок выпаривают на водяной бане с доследующим высушиванием остатка или анализируют непосредственно. [48]
Мясорубку после каждого образца разбирают, все задержавшиеся в ней куски перетирают в ступке или мелко изрезают ножом и присоединяют к основной массе пробы. Мясорубку промывают и вытирают насухо. Очень удобно измельчать овощи и плоды домашней электрической соковыжималкой; в ней материал тонко перетирается быстро вращающейся теркой, а сок отделяется в результате быстрого вращения центрифужного стакана с мелкими отверстиями. Это удобно и для последующего высушивания материала - жом высушивают в термостате, как и свежеубранные растения, а сок выпаривают на водяной бане с последующим высушиванием остатка или анализируют непосредственно. [49]
В колбу помещают 38 5 г ( 24 5 мл, 0 28 моля треххлористого фосфора и 150 мл абсолютного эфира, охлаждают до - 10 - 15 С ( ацетон, твердый СОа к Щй перемешивании прибавляют по каплям в течение 2 ч реактив Гриньяра. Температуру смеси доводят до комнатной, перемешивают 2 ч и оставляют на ночь. Затем, заменив капельную воронку на газоподводящую трубку, пропускают в реакционную смесь при охлаждении до 0 С и перемешивании в течение I ч ток сухого хлористого водорода для разложения не вступившего в реащию реактива Гриньяра С примечание К Образовавшийся осадок соли магния центрифугируют в хорошо закрытых стеклянных центрифужных стаканах. Осадок промывают абсолютным эфиром ( 2x100 млК Эфир отгоняют из круглодонной колбы на 500 мл, снабженной дефлегматором, в вакууме водоструйного насоса ( при 50 - 60 мм рт.ст. на теплой бане ( 40 - 50 С в токе сухого аргона. [50]
Мышцу взвешивают ( - 5 г) и измельчают ножницами до кашицеобразного ( почти гомогенного) состояния. Кашицу переносят в гомогенизатор и добавляют 0 3 М раствора сахарозы с ЭДТА из расчета 10 мл раствора на 1 г сырой ткани. Ткань быстро ( не более 1 мин) измельчают в стеклянном гомогенизаторе с тефлоновым пестиком до получения однородной массы. Гомогенат переносят в центрифужный стакан и центрифугируют при 600 g в течение 7 мин. С поверхности удаляют жир ватным тампоном и супернатант переносят в другой центрифужный стакан. Процедуру проводят осторожно, чтобы рыхлый слой осадка остался в первом стакане. Надосадочную жидкость сливают, плотный осадок митохондрий осторожно растирают стеклянной палочкой в 2 мл раствора сахарозы с ЭДТА до гомогенного состояния. [51]