Cтраница 1
Столбик геля разрезают на 10 - 20 равных частей. Заливают каждую часть 1 - 2 мл воды и через несколько часов измеряют рН экстрактов. [1]
![]() |
Электрофореграмма в ПААГ сыворотки здорового человека. [2] |
Столбик геля помещают в пробирку с красителем на 10 мин для окрашивания и фиксации белковых полос, при этом окрашивается и гель. Затем краситель сливают в склянку, а гель заливают 7 % - ным раствором уксусной кислоты для отмывки от избытка красителя. [3]
На столбике геля размером 1 1 X 112 см ( 96 мл) разделяли смесь бензола, нафталина, антрацена и пяти высших полициклических углеводородов в изопропаноле. Эти вещества прекрасно разделялись, появляясь в элюате в порядке возрастания молекулярных весов. [4]
Промежуточное положение между столбиком геля в колонке и тонким слоем геля на пластинке занимают полоски сефадекса G-100 и G-200 ( 0 6X3 5 ел) [98], нанесенные на наклонно расположенные предметные стекла. На такой микроколонке удается разделить очень небольшое количество сыворотки, компоненты которой затем прямо на предметном стекле можно идентифицировать с помощью метода иммуно-диффузии. Перед нанесением полосок геля отдельные участки предметных стекол покрывают агаром. После гель-хроматографии гель на агаре сдвигают и антисыворотку вносят в заранее подготовленную лунку. [5]
Другим важным источником ошибок является температурный градиент от центра столбика геля к периферии. Температура в середине столбика не должна превышать 40 С. [6]
При анализе полученных результатов путем сравнения зон окрашивания в контрольных и опытных столбиках геля выделяют полосы, специфичные для изучаемого фермента. [7]
Метод ГПХ основан на свойстве молекул в разной степени задерживаться при прохождении через столбик геля; при этом небольшие молекулы, свободно проникающие в поры геля, удерживаются в большей степени по сравнению с макромолекулами. Макромолекулы, не проникающие в гель, элюируются в объеме Vo, соответствующем свободному объему колонки. Теоретические основы ГПХ разбираются в гл. [8]
![]() |
Пояснение явления расширения и искривления зоны вещества по мере продвижения по колонке. [9] |
Для получения удовлетворительной скорости элюирова-ния при работе на мягких гелях большое значение имеет качество пористой пластинки, на которую опирается столбик геля. [10]
При разделении на данном геле Kd является константой вещества; она определяется лишь размерами молекул данного вещества и не зависит от объема столбика геля. [11]
В пластмассовую или фаянсовую кювету наливают воду. Держа трубки под водой, вынимают столбики геля, осторожно продвигая препаровальную иглу между гелем и стенкой трубки, и сразу же переносят их на 30 - 60 мин. [12]
В трубку А помещают исследуемый гель или студень, а в присоединенные на шлифах вертикальные трубки Б и В наливают: в одну - чистый растворитель, в другую - раствор испытываемого электролита или другого вещества. Через некоторое время прибор разбирают, осторожно вынимают столбик геля или студня из трубки А, разрезают его поперек на равные части, в которых и определяют содержание диффундирующего вещества. [13]
В трубку А помещают исследуемый гель или студень, а в присоединенные на шлифах вертикальные трубки Б и В наливают: в одну - чистый растворитель, в другую - раствор испытываемого электролита или другого вещества. Через некоторое время прибор разбирают, осторожно вынимают столбик геля или студня из трубки А, разрезают его поперек на равные части, в которых и определяют содержание диф-фундирукщего вещества. [14]
В трубку Л помещают исследуемый гель или студень, а в присоединенные на шлифах вертикальные трубки Б и В наливают: в одну - чистый растворитель, в другую - раствор испытываемого электролита или другого вещества. Через некоторое время прибор разбирают, осторожно вынимают столбик геля или студня из трубки Л, разрезают его поперек на равные части, в которых и определяют содержание диффундирующего вещества. [15]