Изменение - активность - фермент
Cтраница 3
В экспериментальных попытках найти ответ на этот вопрос были получены некоторые многообещающие результаты. Так, например, Нортроп обнаружил, что введение нескольких ацетильных групп ( СН5СО) в боковую группу аминокислоты тирозина в молекуле пепсина приводит к частичной потере активности фермента, тогда как введение тех же ацетильных групп в боковую группу лизина не приводит к изменению активности фермента. Таким образом, можно было сделать вывод, что тирозин принимает участие в работе фермента, а лизин, скорее всего, нет. Этот результат стал первым свидетельством того, что в молекуле фермента есть участки, не являющиеся необходимыми для проявления его активности. [31]
 |
Окисление фенолов. Протеазная активность иловой. [32] |
Изменение активности ферментов является одним из путей регуляции обмена веществ микроорганизмов в процессе их адаптации к трудноассимилируемым загрязнениям. Этот тип регуляции наиболее выражен у микроорганизмов, окисляющих фенолы. [33]
Одновременно была установлена важная роль имидазольного остатка в ферментативных реакциях подобного типа. При помощи модельных систем было доказано, что / г-нитрофенилацетат можно гидролизовать также производными имидазола, например пептидами, в которых имеется гистидиновый остаток, или полимерами этой аминокислоты. Кривая диссоциации имидазоль-ной группы в зависимости от изменений рН вполне соответствует кривой изменений активности фермента в зависимости от рН среды. Этот факт, естественно, свидетельствует о важной роли имидазольных радикалов в реакции. [34]
Большое различие в действии тиолов на центральную нервную систему обусловливает интерес к исследованию их влияния на основные ферментпьРе системы мозговой ткани. После введения emop - бутилтиола выявлено значительное угнетение холинэстеразы мозга; статистически значимое угнетение холинэстеразы мозга имело место после введения третичных тиолов ( Св, С8, Ся, С 2) - После введения третичного тиола С [ 5 изменений активности фермента не было. [35]
Вещества, получающиеся в результате ферментной реакции, в той или иной степени похожи на субстрат, который связывается с активной группой фермента. Следовательно, возможно и связывание продуктов с ферментом, блокирующее его активные участки. Это явление называется конкурентным торможением. Оно делает возможным изменение активности фермента за счет обратимой адсорбции на его поверхности продуктов реакции и стерических аналогов субстрата. [36]
Обычно зависимость скорости реакции от рН выражается кривой с одним ( иногда двумя) максимумами. Величина оптимума рН является характерной для каждого фермента, хотя и изменяет свое значение от концентрации субстрата и температуры. В сильно кислой и сильно щелочной среде падение активности фермента может быть связано с необратимой денатурацией белковой молекулы. Вблизи же оптимума рН изменение активности фермента может быть обратимым и при изменении концентрации водородных ионов в сторону оптимального значения активность фермента также полностью восстанавливается. [37]
Хиноны легко взаимодействуют с аминокислотами. Так, еще в 1927 г. Опарин показал способность системы хлорогеновая кислота - фенолоксидаза дезаминировать аминокислоты. Способность хи-нона реагировать с сульфгидрильными амино - и иминогруппами является причиной связывания хинонов с белками. Именно эта способность хинонов может явиться причиной изменения активности ферментов. Так, Вильяме ( Williams, 1960), а затем Салькова и Платонова ( 1968) показали, что в процессе ферментативного окисления фенолов наибольшее снижение активности полигалактуро-назы вызывали первичные продукты окисления фенолов. [38]
Активность аспартат - карбамоилтрансферазы в течение 30 сут после v-облучения крыс в дозе 154 8 мКл / кг ( ЛДбо / зо) претерпевает тканеспецифичные волнообразные изменения. В экстрактах костного мозга активность фермента уменьшается к концу 1 - х суток до 69 %, достигает минимального уровня через 5 сут ( 41 %), затем постепенно возрастает, нормализуясь через 8 сут. Через 14 сут она превышает контрольный уровень на 18 %, а потом снижается и на протяжении 20 - 30 сут остается в пределах нормы. В вилочковой железе через сутки после облучения активность аспартат - карбамоилтрансферазы, наоборот, увеличивается на 32 %, через 2 сут нормализуется, к концу 8 - х суток вновь превышает контрольный уровень на 27 %, через 14 сут достигает максимума ( 268 %), на 20 - е сутки снижается до 50 %, повторно нормализуется через 26 сут, а по истечении 30 сут снова становится значительно выше нормы. Аналогичная динамика изменения активности фермента при облучении наблюдается и в селезенке. Аспартат - карбамоилтрансферазная активность экстрактов этой ткани через сутки после облучения крыс возрастает на 74 %, через 8 сут снижается до 65 %, через 14 сут вновь резко увеличивается ( на 153 %), на 20 - 26 - е сутки падает до S9 - 52 % и устанавливается на контрольном уровне к исходу 1-го месяца после облучения. [39]
Активность АТФ-азы в митохондриях печеночных клеток в расчете на 1 г сырой ткани ( табл. 29) на фоне гиповитаминоза А достоверно повышалась у крыс с дефицитом трех аминокислот на 60 - й день и нормализовалась на 90 - й день эксперимента. Дефицит треонина и лизина на том же фоне, не вызвав существенных сдвигов в первом периоде опыта, обусловил значительное угнетение фермента во втором периоде. Недостаток в диете трех аминокислот и ретинола вызвал статистически значимую стимуляцию активности АТФ-азы в митохондриях на протяжении всего периода наблюдения, тогда как дефицит двух аминокислот и витамина - лишь на первом этапе исследования. В группе животных, содержавшихся на диете с недостатком треонина и ретинола, изменения активности ферментов в расчете на 1 мг митохондриального белка не отмечено. [40]
Юбен [642] подошли к определению буферной емкости, наблюдая за изменением каталитической активности фермента, полученного из солодового экстракта. Они заметили, что кислота или основание оказывают на него влияние лишь в том случае, если их концентрация превышает некоторую предельную величину, и пришли к выводу, что это обусловлено присутствием в смеси моно - и бифосфатов: Смесь, подобно буферному диску вагона, ослабляет воздействие кислот и оснований. Обозначение рН было введено Серенсеном. В статье, озаглавленной Изучение ферментов ( Enzym studien), Серенсен [643] писал, что изменение активности фермента под действием кислоты определяется не природой кислоты, а концентрацией ионов водорода. Чтобы доказать справедливость этого предположения, Серенсену был необходим надежный метод измерения кислотности раствора и возможность приготавливать растворы с точно известной концентрацией ионов водорода. [41]
Страницы: 1 2 3