Генная терапия

Cтраница 1

Наследственные заболевания, для лечения которых применяют трансплантацию костного мозга. [1]

Генная терапия ex vivo основана на трансплантации генетически модифицированных клеток, производящих терапевтический белок. Использование собственных клеток пациента предотвращает их отторжение, но ограничивает сферу применения генной терапии ex vivo. Так, число клеток ткани-мишени может быть недостаточно для их извлечения и культивирования in vitro, некоторые соматические клетки неэффективно поглощают ДНК, а экспрессия клонированного гена иногда оказывается временной. [2]

Генная терапия in vivo ( In vivo gene therapy) Введение гена ( генов) непосредственно в ткань или орган с целью устранения генетического нарушения. [3]

Генная терапия представляет собой одно из новейших направлений развития медицины. [4]

Неаутологичная генная терапия ex vivo включает выделение тканеспецифичных клеток, хорошо растущих в культуре ( например, фибробла-стов или кератиноцитов кожи, астроцитов мозга, гепатоцитов или миобластов), и их генетическую модификацию с помощью терапевтического гена. Рекомбинантные клетки заключают в искусственную полупроницаемую полимерную мембрану, через которую выходит рекомбинант-ный белок и поступают в клетки питательные вещества. Мембрана неиммуногенна и не вызывает сенсибилизации пациента и отторжения имплантированных клеток. [5]

Генная терапия человека в широком смысле предусматривает введение в клетки функционально активного гена ( генов) с целью исправления генетического дефекта. Существуют два возможных пути лечения наследственных болезней. При этом коррекция генетического дефекта ограничивается определенным органом или тканью. Во втором случае изменяют генотип клеток зародышевой линии ( сперматозоидов или яйцеклеток) или оплодотворенных яйцеклеток ( зигот), чтобы все клетки развившегося из них индивидуума имели исправленные гены. [6]

Коррекция дефекта, приводящего к ошибочному сплайсингу, с помощью антисмыслового олигонуклеотида. А. Результат мутации, приводящей к ошибочному сплайсингу. Обозначения. цифры - экзоны, А - первый интрон, Б - второй интрон, содержащий мутацию ( красный кружок, разделяющую его на две части ( Б1 и Б2. Штриховые линии охватывают сегменты РНК, вырезаемые при процессинге. Возможны два варианта сплайсинга. вариант а приводит к образованию функциональной мРНК, вариант б - к образованию РНК, включающей часть второго интрона ( Б2. Б. Антисмысловой олигонук-леотид ( АС, связывающийся с мутантным сайтом сплайсинга, препятствует его распознаванию при процессинге, и в резульгате образуется только функциональная мРНК. [7]

При генной терапии ex vivo терапевтический ген переносят в изолированные клетки больного с помощью ретровирусных векторов или других систем доставки, трансдуцирован-ные клетки культивируют и вводят пациенту. При этом у реципиента не развивается нежелательного иммунного ответа, но сама процедура является весьма дорогостоящей и трудоемкой. Альтернативный способ генной терапии ех vivo использует генноинженерную модификацию неаутологичных клеток, заключенных в мембрану, которая предотвращает развитие нежелательного ответа и не препятствует высвобождению терапевтического генного продукта. [8]

При генной терапии in vivo терапевтический ген вводят непосредственно в клетки ткани-мишени больного. [9]

Для генной терапии рака разработаны также комбинированные подходы, использующие две разные системы генов. Одну часть опухолевых клеток трансдуцируют геном HSV. &, другую - клонированной кДНК ( или геном) одного из цитокинов. Цитокины ( интерлейкин-2, интер-лейкин-12 и другие) играют роль сигнала, мобилизующего клетки иммунной системы и стимулирующего иммунный ответ. Показано, что опухолевые белки, которые высвобождаются из клетки, уничтоженной в результате терапии с помощью гена самоубийства, взаимодействуют с иммунными клетками, привлекаемыми к месту локализации опухоли цитокином, и запускают противоопухолевую иммунную реакцию. Кроме того, противоопухолевые антитела, поступая в кровоток и циркулируя по всему организму, предотвращают появление метастазов. [10]

Считается, что генная терапия человека может помочь в лечении серьезных заболеваний. Действительно, она способна обеспечить коррекцию ряда физических и психических нарушений, хотя остается неясным, сочтет ли общество приемлемым такое применение генной терапии. [11]

Наследственные заболевания, для лечения которых применяют трансплантацию костного мозга. [12]

В качестве примера успешной генной терапии ex vivo с использованием аутологичных клеток можно привести случай с пациенткой, гомозиготной по рецессивному гену семейной гиперхолестеролемии. Ее гепатоциты были лишены рецепторов липопротеинов низкой плотности ( ЛПНП) и не разрушали холестерол; он постоянно циркулировал в крови, приводя к закупорке артерий и тяжелой болезни сердца. Лекарственные средства в подобных случаях неэффективны, а шунтирование коронарных артерий дает непродолжительный эффект. [13]

Этот подход к генной терапии рака был проверен экспериментально: в печень животных имплантировали клетки рака толстой кишки, раздельно трансдуцированные генами HSVfA: одного из цитокинов. [14]

В большинстве протоколов генной терапии ех vivo и in vivo используются клонированные генетические конструкции, возмещающие функциональную форму белка, который не синтезируется в организме больного или синтезируется в дефектной форме. [15]

Страницы: 1 2 3 4