Терминация - транскрипция
Cтраница 1
Терминация транскрипции выражается в том, что РНК-полимераза узнает сигнал окончания синтеза РНК, в результате чего синтезированный полирибонукле-отид отделяется от ДНК-матрицы. [1]
Для терминации транскрипции на ДНК имеются особые сигналы - терминаторные последовательности. [2]
 |
Шпилька РНК в сайте терминации. [3] |
Механизмы терминации транскрипции у эукариот до конца не изучены. По-видимому, вблизи З ОН-конца гена с РНК-полимеразой взаимодействует белковый стоп-сигнал, который замедляет ( но не прекращает) транскрипцию. Далее фермент катализирует синтез последовательности ААУААА и следующие за ней 15 нуклеотидов, после чего завершает свою работу. [4]
Сигнальные нуклеотид-ные последовательности на 3 -конце гена и факторы, определяющие терминацию транскрипции с помощью РНК-полимеразы II, недостаточно исследованы. РНК определяется специфической эндонуклеазой, разрезающей длинный транскрипт. Эта реакция протекает быстро, отрезаемый эндонуклеазой дистальный конец мгновенно деградирует. Положение 3 -конца зрелой мРНК, к которому прикрепляются адениловые остатки, определяется последовательностью A AT AA А на З - конце гена. Эта последовательность в составе зрелой мРНК ( AAUAAA) обнаруживается отступя 11 - 30 нуклеотидов ( в среднем 15) от З - конца. Эндонуклеаза узнавая последовательность AAUAAA ( сигнала полиаденилнрова-ния), расщепляет транскрипт, а образующийся З - конец подвергается полиаденнлированию. Сигнал полиаденилирования необходим но не достаточен для эндонуклеолитической реакции на З - конце транскрипта. [5]
Сигнальные нуклеотид-ные последовательности на З - конце гена и факторы, определяющие терминацию транскрипции с помощью РНК-полимеразы II, недостаточно исследованы. РНК определяется специфической эндонуклеазой, разрезающей длинный транскрипт. Эта реакция протекает быстро, отрезаемый эндонуклеазой дистальный конец мгновенно деградирует. Положение З - конца зрелой мРНК, к которому прикрепляются адениловые остатки, определяется последовательностью ААТААА на З - конце гена. Эта последовательность в составе зрелой мРНК ( AAUAAA) обнаруживается отступя 11 - ЗОнуклеотидов ( всреднем 15) от З - конца. Эндонуклеаза, узнавая последовательность AAUAAA ( сигнала полиаденилирова-ния), расщепляет транскрипт, а образующийся З - конец подвергается полиаденилированию. Сигнал полиаденилирования необходим, но не достаточен для эндонуклеолитической реакции на З - конце транскрипта. [6]
Сигнальные нуклеотид-ные последовательности на З - конце гена и факторы, определяющие терминацию транскрипции с помощью РНК-полимеразы II, недостаточно исследованы. РНК определяется специфической эндонуклеазой, разрезающей длинный транскрипт. Эта реакция протекает быстро, отрезаемый эндонуклеазой дистальный конец мгновенно деградирует. Положение З - конца зрелой мРНК, к которому прикрепляются адениловые остатки, определяется последовательностью ААТААА на З - конце гена. Эта последовательность в составе зрелой мРНК ( AAUAAA) обнаруживается отступя 11 - ЗОнуклеотидов ( в среднем 15) от З - конца. Эндонуклеаза, узнавая последовательность AAUAAA ( сигнала полиаденилнрова-ния), расщепляет транскрипт, а образующийся З - конец подвергается полиаденилированию. Сигнал полиаденилирования необходим, но не достаточен для эндонуклеолцтической реакции на З - конце транскрипта. [7]
 |
Тестирование промоторных конструкций в трансгенных растениях. [8] |
Были протестированы ДНК-конструкции, содержащие все или некоторые из следующих элементов: 358-промотор; сигнал терминации транскрипции гена нопалинсинтазы; от одного до семи тандемных повторов энхансерных элементов; так называемая - последовательность, которая предположительно усиливает экспрессию гена на уровне трансляции. [9]
Клонируемый ген встраивают в Ncol -, Pstl-или ЯшеШ - сайт, расположенный между сайтом связывания рибосомы и сайтами терминации транскрипции. Если его рамка считывания не попадает в ногу с кодоном AUG, то необходимо произвести минимальную коррекцию. В этом случае после индукции и транскрипции происходит достаточно эффективная трансляция клонированного гена. Однако следует иметь в виду, что поскольку нуклеотидная последовательность, кодирующая N-концевой участок белка-мишени, у разных клонированных генов неодинакова, нельзя создать универсальный вектор, исключающий одноцепочечное спаривание мРНК при любых обстоятельствах. [11]
Так или иначе транскрипция провируса начинается с копирования левого района г; заканчивается же она после считывания правого г. По одной из гипотез, для терминации транскрипции провируса важно, чтобы в синтезируемой молекуле РНК возникла шпилька на границе районов иЗ и г; имеющаяся здесь нуклеотид-ная последовательность образование такой шпильки позволяет. Ясно, что при транскрипции правого г шпилька образоваться может, а при транскрипции левого г - не может, поскольку в образующейся здесь РНК район иЗ просто не представлен. [12]
Так или иначе транскрипция провируса начинается с копирования левого района г; заканчивается же она после считывания правого г. По одной из гипотез, для терминации транскрипции провируса важно, чтобы в синтезируемой молекуле РНК возникла шпилька на границе районов иЗ и г; имеющаяся здесь нуклеотид-ная последовательность образование такой шпильки позволяет. Ясно, что при транскрипции правого г шпилька образоваться может, а при транскрипции левого г - не может, поскольку в образующейся здесь РНК район иЗ просто не представлен. [13]
Синтетические гены могут быть сконструированы так, чтобы помимо белок-кодирую-щих последовательностей они содержали концевые участки, обеспечивающие их встраивание в клонирующий вектор ( сайты для рестри-цирующих эндонуклеаз), а также, если это необходимо, сигнальные последовательности для правильной инициации и терминации транскрипции и трансляции. [15]
Страницы: 1 2 3