Тимоцит

Cтраница 1

Тимоциты являются очень удобной экспериментальной моделью для изучения биохимических механизмов интерфазной гибели облученных клеток. Существует представление о том, что физиологическая гибель лимфоидных клеток связана с системой цАМФ [ Caffino P. Однако в связи с тем, что лучевая болезнь сопровождается снижением, а не увеличением уровня цАМФ в вилочковой железе, можно предположить, что либо возрастание-уровня цАМФ наступает в первые минуты после облучения ( в сроки до 60 мин этот показатель не исследовался), либо пусковые механизмы пострадиационной интерфазной и физиологической гибели; лимфоидных клеток не идентичны. [1]

Тимоцит - лимфоцит тимуса, Т - клетка. [2]

Аденилатциклаза тимоцитов, выделенных от облученных животных, теряет способность стимулироваться изопро-теренолом. Содержание цГМФ в вилочковой железе непосредственно после облучения мышей в дозе 8 Гр увеличивается в 1 8 раза, а через 30 и 60 мин превышает контрольные значения соответственно в 2 3 и 2 6 раза. [3]

ДНК тимоцитов, наиболее выраженное в области уникальных и умеренных повторов. К сожалению, данные об изменении процесса трансляции в столь ранние после облучения сроки отсутствуют. Результаты экспериментов с применением ингибиторов трансляции не позволяют прийти к однозначным выводам о возможности индукции синтеза эндонуклеазы после облучения. Вопрос осложняется еще и тем, что циклогексимид снижает чувствительность хроматина к экзогенным нуклеазам. [4]

Облучение тимоцитов приводит к образованию одно - и двунитевых разрывов в ДНК. При этом лишь около 20 % однонитевых разрывов ( ОР) обладает лигазоспецифическими концевыми группами ( З ОН-б РО, которые воссоединяются, в течение 15 мин после облучения. Почти 50 % разрывов с З ОН-концевой группой не являются инициаторами для ДНК-полимеразы I, что связано с дополнительными повреждениями структуры ДНК ( вероятно, модификацией сахарного остатка), препятствующими функционированию полимера-зы. Обработка ДНК из облученных клеток экзонуклеазой III лишь частично восстанавливает матричную активность в ДНК-полимераз-ной системе. Таким образом, репарация большей части ОР в облученной ДНК тимоцитов требует предварительного этапа их перевода в лигазоспецифичную форму. [5]

Инкубация изолированных тимоцитов с дексаметазоном вызывает кратковременную стимуляцию активности ДНК-зависимой РНК-полимеразы В, в дальнейшем сменяющуюся ингибированием активности как А, так и В РНК-полимераз [ Bell P. A., Borthwick N. Промежуточный этап в действии глюкокортикоида ( 5 - 15 мин) чувствителен к изменению температуры, причем в этот период не требуется синтез ни РНК, ни белка. Вероятно, этот этап соответствует транспорту иРНК из ядра в цитоплазму. [6]

Развитие радиационного повреждения в зависимости от дозы в тимоцитах, выделенных через 4 ч после облучения [ Scaife J. F., Vittorio P. V., 1964 ]. [7]

Потеря облученными тимоцитами К также может быть использована в качестве критерия гибели клеток. По сравнению с прокрашиванием этот метод более чувствительный. Так, при инкубации облученных тимоцитов ( 10 Гр) в течение 5 - 6 ч клетки теряют около 50 % К, что почти в 4 раза превышает результат, полученный при подсчете числа прокрашенных клеток [ Myers D. Однако также как и при применении витальных красителей данные, полученные при оценке выхода К и по подсчету пикнозов в облученных клетках, часто не совпадают [ Myers D. [8]

После облучения тимоцитов in vitro в различных дозах характер, накопления погибших клеток в зависимости от времени инкубации свидетельствует о существовании двух субпопуляций тимоцитов, различающихся по радиочувствительности и представляющих собой кортикальные и медуллярные клетки. Малые кортикальные тимоци-ты более чувствительны к облучению по сравнению с медуллярными. [9]

После облучения тимоцитов уже в дозе 3 Гр в клетках наряду с уменьшением количества АТФ отмечается увеличение содержания фруктоза-1 6-дифосфата и диоксиацетонфосфата ( ДАФ) - продукта альдолазной реакции. Активация фосфофруктокиназной ( ФФК) реакции приводит к повышенному расходу АТФ и к снижению его внутриклеточного фонда. В норме ФФК подвержена аллостерическо-му контролю со стороны АТФ. [10]

Изменения проницаемости мембран тимоцитов заключаются в потере облученными клетками Na, K, нуклеотидов и нуклеозидов, а также различных ферментов. Это предшествует появлению клеток, прокрашивающихся красителями. Выход Na и К тимоцитов отмечается через 1 ч после облучения животных уже в такой небольшой дозе, как 0 25 Гр, а при облучении изолированных ядер - в дозе 0 20 Гр, потеря Na составляет 50 % уже через 5 мин после облучения [ Creasey W. [11]

Парадоксальная реакция тимоцитов через 5 ч после облучения животных ( количество погибших клеток в процентах [ Trowetl О. А., 1964 ]. [12]

Однако при облучении тимоцитов в более высокой дозе ( 600 Гр) количество погибших клеток, выявляемое по окрашиванию витальным красителем и по выходу К, не отличалось от такового после облучения в дозе 10 Гр, хотя число клеток с пикнотическими ядрами было гораздо меньшим. [13]

Так, инкубация тимоцитов с ионофором А23187, вызывающим накопление Са2 в клетках, ведет к их лизису [ Durant S. При отсутствии Са2 в среде лимфолитическое действие как глюкокортикоидов, так и ионофора значительно тормозится. [14]

К и Na тимоцитами после облучения in vivo и in vitro не были подтверждены, что, впрочем, может обусловливаться различными условиями инкубации. [15]

Страницы: 1 2 3 4