Cтраница 4
Возможно, что терминальная трансфераза I характерна для незрелых кортикальных тимоцитов и служит предшественником формы II, локализующейся в кортизончувствительных, терминальных тимоцитах. [46]
Большое число работ посвящено исследованию синтеза ДНК в облученных тимоцитах. Все они ограничиваются констатацией изменения интенсивности включения меченых предшественников во вновь синтезированную ДНК. [47]
Одним из наиболее ранимых биохимических процессов является включение в тимоциты меченого аденина. Этот процесс чувствителен к облучению в дозе уже 0 5 Гр. После облучения клеток в дозе до 2 Гр включение аденина тормозится на 3 - 4 ч раньше, чем в суспензии появляются тимоциты с пикнотическими ядрами [ Christen-sen G. M., Jackson К. Включение аденина в нуклеиновые кислоты ингибируется до момента торможения включения изотопа в кислоторастворимую фракцию, что свидетельствует об отсутствии нарушений в системе транспорта основания через наружную мембрану при облучении [ Geraci J. P., Christensen G. M., Jackson К. Излучение селективно инги-бирует включение аденина в нуклеиновые кислоты, поскольку активность образования адениловых нуклеотидов не меняется даже через 2 / 2 ч после облучения, несмотря на то, что к этому времени наблюдается их значительный выход из ядра. Добавление аденина к ти-моцитам до или после облучения предотвращает гибель клеток ( по окрашиванию эозином) [ Araki К. [48]
При оценке значимости радиационных повреждений мембран в интерфазной гибели тимоцитов основная трудность заключается в отсутствии данных о специфике нарушений мембранно-связанных процессов именно для этого типа клеток. Поэтому трактовка наблкь даемых изменений в системе мембран с позиций их возможной роли в пусковых процессах интерфазной гибели должна проводиться с осторожностью. Действительно, кинетика осмотического разрушения ядер лимфоцитов селезенки, клеток печени и коркового вещества почек после облучения в дозах 3 - 30 Гр одинакова для всех типов клеток. [49]
Характерно, что длительность лаг-периода при выходе ПДН из малых тимоцитов примерно соответствует времени задержки инициации репликации после облучения, а размеры ПДН соответствуют фрагментам ДНК в пределах величины репликона. [50]
Оказалось, что снижение содержания АТФ, наблюдаемое в облученных тимоцитах, совпадает со снижением поступления в клетки К, которое регистрируется через 3 - 4 ч после облучения. Известно, что при недостатке АТФ в клетках нарушаются процессы активного транспорта катионов. [51]
АТФ в результате его деградации до гипоксантина объясняется уменьшение гибели облученных тимоцитов после их кратковременной инкубации при 41 - 43 С [ Ohyama H. [52]
Приведенные данные свидетельствуют о том, что при облучении в тимоцитах повреждается система трансмембранного переноса ме таболитов. Как известно, она включает в себя три звена [ Whittam В. В случае, если перенос метаболита осуществляется против электрохимического или концентрационного градиента, в систему энергообеспечения входят ферменты, ответственные как за синтез АТФ, так и за высвобождение энергии. [53]
Таким образом, одна из сторон нарушения процесса транскрипции в облученных тимоцитах может быть связана с изменениями хроматина. [54]
Таким образом, согласно изложенным представлениям, основной причиной, вызывающей гибель тимоцитов в интерфазе, является выход из-под контроля ФФК-реакции, что сопровождается резким снижением количества АТФ в клетке и аномально высоким накоплением промежуточных продуктов гликолиза. Ведущая роль при этом отводится радиационному повреждению регуляторного ( аллостерическо-го) центра молекулы ФФК. [55]
Под их действием осуществляется экспрессия соответствующих генов, сопровождающаяся появлением характерных для кортикальных тимоцитов поверхностных маркерных антигенов. Этот процесс включает в себя транскрипцию ДНК и трансляцию РНК [ Storrie В. На этом этапе дифференцировки образуются иммунонекомпетентные кортикальные тимоциты - предшественники медуллярных тимоцитов. [56]
Было отмечено, что выход ПДН и развитие процесса ядерного пикноза в тимоцитах происходят параллельно при облучении как in vivo, так и суспензии клеток. При этом выход ПДН и образование пикнотических ядер наблюдается в клетках, не потерявших жизнеспособность. Если суспензию облученных тимоцитов прогревали при 56 С в течение 2 - 4 мин, то клетки погибали, и при последующей их инкубации не отмечалось ни развития пикнозов, ни выхода ПДН. Глубина деструкции хроматина в разные сроки после облучения была примерно одинаковой, изменялось только количество ДНК, подвергавшейся деградации. Аналогичные результаты были получены при исследовании накопления фрагментов хроматина и количества пикнозов в клетках вилочковой железы после введения животным гидрокортизона. Эти данные демонстрируют возможность использования деградации хроматина под действием экзогенных факторов в качестве показателя гибели клеток. [57]