Трипсин
Cтраница 2
Трипсин следует добавлять по возможности быстро, начиная с первой пробирки. После внесения фермента содержимое пробирок перемешивают и инкубируют 15 мин. [16]
Трипсин следует добавлять, начиная с первой пробирки в ряду А, а затем в ряду Б, стараясь выполнить эту процедуру возможно быстрее. Отсчет времени начи - нают с момента добавления трипсина в первую пробирку. После добавления трипсина содержимое пробирок перемешивают и оставляют в термостате на 15 мин. [17]
Трипсин ускоряет гидролиз пептидных связей белков, альбумоз и пептонов. Многие нативные белки лишь с трудом расщепляются трипсином. Триптический гидролиз таких белков идет значительно быстрее после их денатурации или после предварительного расщепления пепсином. Продуктами триптического гидролиза являются поли - и Дипептиды и аминокислоты. [18]
Трипсин выпускается двух видов. [19]
Трипсин лиофилизованный, марки А, Б и В - белый аморфный порошок. Легко растворим в воде. [20]
Трипсин, иммобилизованный на силохроме, марка Б - белая зернистая масса, нерастворимая в воде. Сухой препарат нестоек, быстро теряет активность. Выпускается в боратном буферном растворе ( рН 8 0) в соотношении: 100 мл буферного раствора на 150 г влажного иммобилизованного фермента. [21]
 |
Оптимальное значение рН для некоторых ферментов. [22] |
Трипсин - фермент, входящий в состав поджелудочного сока, как оказывается, после его инактивирования нагреванием также может стечением времени самопроизвольно восстанавливать свою протеолитическую активность. [23]
Трипсин содержится в поджелудочном соке в недеятельной форме, в виде т р и п с и н о г е н а. Но под влиянием другого фермента - энтерокиназы кишечного сока-трипсиноген превращается в трипсин. [24]
Трипсин гидролитически расщепляет как белки, не изменившиеся в желудке под влиянием пепсина, так и высокомолекулярные продукты распада белков, полипептиды типа пептонов. При этом разрушаются пептидные связи в этих молекулах с освобождением карбоксильных и аминных групп. [25]
Трипсин - - фермент, входящий в состав поджелудочного сока, как оказывается, после его инактивирования нагреванием также может с течением времени самопроизвольно восстанавливать свою протеолитическую активность. [26]
Трипсин содержится в поджелудочном соке в недеятельной форме, в виде трипсиногена. [27]
Трипсин гидролитически расщепляет как белки, не изменившиеся в желудке под влиянием пепсина, так и высокомолекулярные продукты распада белков, полипептиды типа пептонов. При этом разрушаются пептидные связи в этих молекулах с освобождением карбоксильных и аминных групп. [28]
Трипсин проявляет наибольшую активность по отношению к пептидам, у которых карбоксильная группа принадлежит остатку основной аминокислоты. [29]
Трипсин и химотрипсин, очевидно, имеют второй активный центр, содержащий гистидин. Второй участок удален от первого, но на спиральной цепочке они сближены. Установление активной роли гистидина основывалось частично на изменении скорости ферментативной реакции в зависимости от рН, что соответствовало предположению о стратегическом расположении слабоосновного остатка, имеющего характер гистидина. То, что фермент в 105 раз эффективнее, чем имидазол, имеет аналогию - в модельных опытах по мутаротации глюкозы - реакции, катализируемой кислотами и основаниями. И в а-окси-лиридине, и в протеолитических ферментах бифункциональность повышает каталитическую активность, поскольку протоны могут быть одновременно поданы и отщеплены в сопряженной реакции. Механизм действия, предложенный Нейратом ( 1957) для химотрипсина, сводится к следующему. При взаимодействии гидроксильной группы серина с имидазольным кольцом гистидина отщепляется протон и образуется активированный комплекс II, имеющий электрофильный и неуклеофиль-ный центры. [30]
Страницы: 1 2 3 4