Фенилизотиоцианат

Cтраница 2

Эти реакции аналогичны тем, какие имеют место при использовании фенилизотиоцианата. Главным преимуществом цианатной методики является легкость отделения и идентификации гидантоина путем хроматографи-рования на ионообменных смолах. [16]

Носитель опрыскивают смесью ( 150: 50: 6: 2) пиридин-вода-триэтил-амин - фенилизотиоцианат и оставляют в атмосфере паров той же смеси на 3 ч, чтобы дать возможность пептидам превратиться в фенилтиокарбамильные производные. Три раза промывают бензолом, дважды - этиленхлоридом. Высушивают 30 мин при комнатной температуре. Пятна локализуют в УФ-свете с помощью флуоресцирующего экрана. Бумагу перед хроматографией следует промыть. [17]

Еще в 1876 г. Зелл и Проскауэр [49] установили, что при пропускании через фенилизотиоцианат тока сероводорода при обычной температуре медленно образуются сероуглерод и дифенилтиомочевина. Аллилизотиоцианат реагирует таким же образом, только не так легко. [18]

После сушки каждую полоску увлажняют 50 - 70 [ хд свежеприготовленного 20 % - ного раствора фенилизотиоцианата в диоксане, не содержащем перекиси. Затем полоски промывают несколько раз бензолом, слегка встряхивая их, причем каждый раз берут новую порцию бензола. Далее полоски промывают равными частями абсолютного этанола и эфира, не содержащего перекиси. Промывание продолжают до тех пор, пока оптическая плотность при 270 м 1 4 мл жидкости после встряхивания в течение 2 - 3 час будет ниже 0 025; этого обычно достигают через 24 час. Эксикатор эвакуируют до остаточного давления 100 мм рт. ст. Через 4 - 16 час ( в зависимости от характера белка) бумагу проветривают и отщепившийся фенилтиогидантоин экстрагируют смесью этанол - эфир. N-концевая группа аминокислоты определяется либо непосредственно хроматографированием фенилтиогидантоина, либо в виде свободной аминокислоты после гидролиза фенилтиогидантоина. После экстракции смесью этанол - эфир полоски считаются готовыми для дальнейшей стадии разложения. [19]

Одномерная хрома-тограмма для обнаружения ФТГ-аспарагиновой кислоты и ФТГ-глутаминовой кислоты.| Двумерная хроматограмма смеси, содержащей по 0 5 цг ФТГ-аминокислот, МФТГ. [20]

Остаток смешивают с 250 л л буферной смеси триэтиламин - уксусная кислота ( см. реактивы) и 250 л л ацетонового раствора фенилизотиоцианата ( что соответствует 6 1л ФИТЦ), тщательно перемешиваемую пробу при герметичном затворе оставляют на 2 5 час в водяной бане при 25; затем отфильтровывают раствор с применением в течение 15 мин водоструйного насоса, после чего на 12 час оставляют в глубоком вакууме над пятиокисью фосфора. HGl-ледяная уксусная кислота); полученный раствор выдерживают 6 час в водяной бане при 25 и растворитель и кислоту удаляют, как описано выше, над КОН. Остаток содержит ФТГ-аминокислоты; для хроматографического сравнения проводят параллельный опыт без добавления аминокислоты. ФТГ-производные цистеина и цистина по описанной методике получить нельзя. Для определения этих аминокислот перед гидролизом следует провести окисление надмуравьиной кислотой; в этом случае после гидролиза получают цистеиновую кислоту и из нее более или менее удовлетворительно - ФТТ-производное. [21]

Для определения N-концевой аминокислоты значительно более широко применяется фенилтиогидантоиновый метод Эдмана благодаря своей высокой чувствительности и возможности многократного использования в одной и той же пробе. Фенилизотиоцианат реагирует со свободной a - NH2 - rpynnoft N-концевой аминокислоты полипептида с образованием фенилтиокарбамоилпептида. [22]

Показано, что в условиях, аналогичных условиях циклизации тиосеми-карбазидодитиокарбоксилатов калия [118], ар ил - и алкилизотиоцианаты конденсируются с метиловым эфиром дитиокарбазиновой кислоты. Например, фенилизотиоцианат при кипячении с метиловым эфиром дитиокарбазиновой кислоты в разбавленной соляной кислоте образует 2-анилино - 5-метилмеркапто - 1 3 4-тиадиазол. [23]

Для получения 1 4-дифенилтиосемикарбазпда в 100 мл бензола растворяют 13 5 г ( 0 1 моля) фениллзотиоцианата, полученного из дифенилтиомочевины путем перегонки ее с соляной кислотой. К бензольному раствору фенилизотиоцианата небольшими порциями, при перемешивании, приливают 10 8 г ( 0 1 моля) фенилгидразина. [24]

При выяснении структуры белков - поэтому необходимо быдр; установить не только число и природу остатков, но также и порядок юГ чередования в макромолекуле. В методе Эдмана, например, белок обрабатывают раствором фенилизотиоцианата в пиридине, а полученный продукт присоединения - раствором НС1 в нитрометане. [25]

Образующиеся фенилтиокарбамилпроизвод-ные аминокислот подвергаются обработке безводной соляной кисдотой, под действием которой они превращаются в фенил-тиогидантоины. Фенилтиогидантоины различных аминокислот могут быть разделены хроматографически; при гидролизе щелочью они распадаются на фенилизотиоцианат и соответствующую аминокислоту, которая идентифицируется хроматографически. [26]

Ячейки фирм Ольтроникс, Электро-оптикл инструменте и AVCO выпускаются в запаянном виде. Все изготовители камер применяют для заполнения ячеек Керра нитробензол, a LCA - частично фенилизотиоцианат. [27]

Над жидкостью в пробирке создают ток свободного от СО2 азота и пускают в ход самописец рН - стата на 5 - 10 мин. Поглощение менее чем 2 мкл щелочи указывает на эффективный барьер азота; далее к содержимому пробирки добавляют 0 2 мл дважды перегнанного фенилизотиоцианата. Дальнейшее усовершенствование состоит в том, чтобы реакции проводить в маленьком экстракторе, в котором ФТК-производное непрерывно экстрагируют циклогексаном. [28]

Реакция первичного ароматического амина с фосгеном ( 1 экв) приводит к арилкарбамоилхлориду, который при нагревании теряет молекулу хлористого водорода, превращаясь в арилизо-цианат. Диамины превращаются в диизоцианаты аналогичным образом. Фенилизотиоцианат синтезируют аналогичным способом из анилина и тиофосгена. [29]

Большинство из них реагирует не только с аминогруппами, но иногда ( и даже более активно) с фенольными ОН-группами, SH-группами и некоторыми другими. Здесь будут рассмотрены только те реагенты, которые предпочтительно реагируют с аминогруппами. К ним относятся уксусный ангидрид, фенилизоцианат и фенилизотиоцианат, хлористый бен-зоил и карбобензоксихлорид. [30]

Страницы: 1 2 3